Beschreibung
Rekombinant Rinder ENeutrokinase ist ein hochreines rekombinantes Fragment der leichten Kette der bovinen Enterokinase mit einer Aminosäuresequenz, die mit der leichten Kette der bovinen Enterokinase identisch ist. Es hat die gleiche spezifische Spaltstelle wie natürlich extrahierte Enterokinase, nämlich Asp-Asp-Asp-Asp-Lys (DDDDK). Es kann verwendet werden, um Fusionsproteine am N-Terminus von Proteinen zu entfernen, um unerwünschte Fusionsmarkierungen zu entfernen und so die genaue N-terminale Sequenz rekombinanter Fusionsproteine sicherzustellen. Gleichzeitig ist Recombinant Rinder Enterokinase hat eine höhere Schneidaktivität als natürliche Enzyme.
RÖkokombinant Rinder ENeutrokinase, Sein, Ausgedrückt in Hefe ist eine hochreine, hochaktive und hochspezifische bovine Enterokinase, die durch Pichia pastoris-Sekret exprimiert wird. Sie kann Fusionsproteine in einem weiten pH-Bereich (4,5-9,5) und einem weiten Temperaturbereich effektiv spalten und weist unter verschiedenen Detergenzien und Denaturierungsmitteln immer noch eine teilweise Aktivität auf. Dieses Produkt hat einen His-Tag, der leicht durch Ni entfernt werden kann.2+ Affinitätssäule nach der Schneidereaktion, was den nachfolgenden Reinigungsprozess erheblich vereinfacht.
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Merkmale
1. Starke Spezifität—Eine spezifische Protease Das schneidens die Carboxylendennus von Lysin enthaltening vier Asparaginsäures vorn: Asp-Asp-Asp-Asp-Lys.
2. Hhohe Reinheit—NEIN andere Protease,Kein unspezifisches Schneiden.
3. Tierfrei—Rekombinant hergestellt, frei von exogener Viruskontamination und im Produktionsprozess werden keine Materialien tierischen Ursprungs verwendet.
4. Qualitätsstabilität: Die Chargenproduktion gewährleistet eine stabile und kontinuierliche Chargenherstellung; es gibt keine Unterschiede zwischen den Produktchargen, wodurch eine gleichbleibende Qualität gewährleistet wird.
5. Ausreichende Kapazität: Ein 500-Liter-Fermenter kann ungefähr 50 MU Enterokinase produzieren und Yeasen verfügt über Fermenter von 5 bis 1500 Litern, die den unterschiedlichen Chargenanforderungen verschiedener Kunden in verschiedenen Stadien gerecht werden.
Anwendungen
m Im Produktionsprozess von Fusionspeptiden und -proteinen wird es verwendet, um am N-Terminus von Proteinen gelegene Fusionsproteine zu entfernen, um unerwünschte Fusionsmarkierungen zu beseitigen und so die genaue N-terminale Sequenz rekombinanter Fusionsproteine sicherzustellen.
Technische Daten
| Quelle | Rekombinante Hefe-Expression |
| Molekulargewicht* | Theoretischer Wert 22,7 kDa |
| Aussehen | Sterile Flüssigkeit |
| Speicherpuffer | 50 mM Tris-HCl, 250 mM NaCl, 2 mM CaCl2, 50% Glycerin, pH 8,0 |
| Enzymkonzentration | 5 U/µL |
| Reinheit | ≥95 % |
| Aktivitätsdefinition | Eine Aktivitätseinheit ist definiert als die Enzymmenge, die erforderlich ist, um 95 % des 500 μg Fusionsproteins mit Enterokinase-Spaltstelle unter den Bedingungen von 25 °C, 12–16 Stunden, in einem 25 mM Tris-HCl-Puffersystem, pH 8,0 zu schneiden. |
*Aufgrund des Glykosylierungseffekts nach der Expression in Pichia pastoris beträgt das durch SDS-PAGE angezeigte Molekulargewicht des Zielproteins etwa 40 kDa.
Die Menge des pro Einheit Enterokinase (EK) gespaltenen rekombinanten Proteins
| Lieferanten | Yeasen 5 U/μL | Thermo 1 U/µL | NEB 16 U/μL |
| Aktivität | 500 μg/Einheit | 20 μg/Einheit | 25 μg/Einheit |
Lagerung
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