Beschreibung
PNGase F ist eine Amidohydrolase, die durch Asparagin verknüpfte Oligosaccharide mit hohem Mannoseanteil, Hybrid- und komplexe Oligosaccharide spalten kann, wobei insbesondere N-gebundene Glykane entfernt werden. Die herkömmliche enzymatische PNGase-F-Reaktion benötigt jedoch oft mehrere Stunden, um Antikörper-N-Glykane freizusetzen. Aufgrund der bevorzugten Freisetzung von Glykanen kann eine unvollständige Deglykosylierung zu verzerrten Ergebnissen führen, da die erhaltene Glykanverteilung nicht die wahre Zusammensetzung der therapeutischen Antikörper widerspiegelt. Daher ist die schnelle Erstellung eines genauen N-Glykan-Profils für die Überwachung der Glykosylierung während der Produktion von Antikörpern und Antikörperfusionsproteinen, die in der Biotherapeutik verwendet werden, von entscheidender Bedeutung.
Yeasen Schnelle PNGase F（Glycerinfrei）ist ein optimiertes rekombinantes Reagenz, das Antikörper, Immunglobuline, Fusionsproteine und andere Glykoproteine innerhalb von Minuten gründlich und schnell deglykosylieren kann. Dieses Enzym kann alle N-Glykane schnell und nicht selektiv entfernen und ermöglicht so eine direkte nachgelagerte Chromatographie- oder Massenspektrometrieanalyse. Yeasen Fast PNGase F（Glycerinfrei） vereinfacht das Versuchsverfahren und verkürzt die Versuchszeit, ohne die Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit zu beeinträchtigen.
Besonderheit
Schnell—Vollständige und schnelle Deglykosylierung in wenigen Minuten.
Hohe Reinheit – Keine Protease- oder Glykosidase-Verunreinigung, Reinheit ≥ 95 %.
Nicht selektiv—Entfernen Sie schnell und ohne Vorliebe alle N-Glycane.
Gute Verträglichkeit—Kann direkt für die nachfolgende Chromatographie- oder MS-Spektrometrieanalyse verwendet werden.
Anwendung
Glykan-Sequenzierung
Glykoprotein-Analyse
Rekombinante Glykoproteinexpression
Spezifikation
| Englisches Synonym | Schnelle PNGase F（Glycerinfrei） |
| Quelle | Rekombinante Hefe-Expression |
| Speicherpuffer | 20 mM Tris-HCl pH 7,5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 20406ES20 | 20406ES50 |
| 20406-A | Schnelle PNGase F | 20 μL | 50 μL |
| 20406-B | Schnelle PNGase F Puffer（5×） | 80 μL | 200 μL |
Lagerung
Das Produkt kann ein Jahr lang bei 2 bis 8 °C gelagert werden. nicht einfrieren.
Zahlen
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| Abbildung 1. Zwei-stufiger enzymatischer Spaltungseffekt (Proteinsubstrat) 1: Proteinmarker (Kat.-Nr. 20350ES) 2: Wettbewerber + Substrat 3: Wettbewerber + Substrat 4: Yeasen Fast PNGase F + Substrat 5: Yeasen Schnelle PNGase + Substrat F 6: Substrat 7: Yeasen Fast PNGase F 8: Konkurrent
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| Figur 2. Zwei-stufiger enzymatischer Spaltungseffekt (Antikörper) 1: Proteinmarker (Kat.-Nr. 20350ES) 2: Konkurrent + Antikörper 3: Konkurrent + Antikörper 4: Yeasen Fast PNGase F + Antikörper 5: Yeasen Fast PNGase F + Antikörper 6: Antikörper 7: Yeasen Fast PNGase F 8: Konkurrent
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