Beschreibung
PNGase F ist ein Amidase-Enzym, das geklont ist aus Friedensstation Eliza und hauptsächlich von Neisseria meningitidis und anderen gramnegativen Bakterien abgesondert. Yeasen-PNGase F wird rekombinant in Hefe exprimiert (spezifische Aktivität: 100.000 U/ml) und kann durch Asparagin verknüpfte Oligosaccharid-Glykoproteine mit hohem Mannosegehalt, Hybrid- und komplexe Oligosaccharid-Glykoproteine spalten. Die Spaltstelle von PNGase F ist die Amidbindung zwischen dem inneren N-Acetylglucosamin (GlcNAc) und dem Asparaginrest von Glykoproteinen, wobei das Asparagin auf dem Protein nach enzymatischer Hydrolyse in Asparaginsäure umgewandelt wird. Dieses Produkt ist mit His markiert und wird häufig zur vollständigen Deglykosylierung von Antikörpern und verwandten Proteinen verwendet.
Besonderheit
Hohe Reinheit—Keine Protease- oder Glycosidase-Kontamination, Reinheit ≥95 %.
Hohe Aktivität— 100.000 U/ml.
Gute Verträglichkeit—Kann denaturierend verwendet werden oder nicht denaturierende Bedingungen.
Anwendung
Glykan-Sequenzierung
Proteomik
Glykoprotein-Analyse
.Rekombinante Glykoproteinexpression
Spezifikation
| Englisches Synonym | PNGase F; N-Glycosidase F; N-Glycosidase F |
| Quelle | Rekombinante Hefe-Expression |
| Molekulargewicht | 36 kDa |
| Spezifische Aktivität | 100.000 U/ml |
| Speicherpuffer | 20 mM Tris-HCl pH 7,5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA, 50 % Glycerin |
| Einheitendefinition | 1 Einheit Enzymaktivität bezieht sich auf die Enzymmenge, die erforderlich ist, um innerhalb von 1 Stunde mehr als 95 % der Kohlenhydrate aus 10 μg denaturierter RNase B in einem 10 μL-Reaktionssystem bei 37 °C zu entfernen. |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | Komponentenzusammensetzung | 20407ES01 | 20407ES02 |
| 20407-A | PNGase F | PNGase F | 15000 Einheiten | 75000 Einheiten |
| 20407-B1 | Puffer 1 (10×) | 5 % SDS; 400 mM DTT | 150 μl | 750 μl |
| 20407-B2 | Puffer 2 (10×) | 200 mM Tris, pH 7.5 | 300 μl | 1500 μl |
| 20407-B3 | 10 % NP-40 | 10 % NP-40 in MilliQ-H2O | 300 μl | 1500 μl |
Lagerung
Das Produkt kann ein Jahr lang bei -25 bis -15 °C gelagert werden.
Zahlen
Unterlagen:
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