Beschreibung
Kex2-Protease, auch bekannt als doppelt alkalische Endopeptidase oder YSCF-Protease, ist eine kalziumabhängige Serinprotease, die für die Verarbeitung der Vorläufer von Killertoxin und α-Faktor in Hefezellen verantwortlich ist. Sie erkennt und spaltet spezifisch die Peptidbindungen am Carboxylende von zweibasischen Aminosäuren wie Arg-Arg und Lys-Arg. Im Gegensatz zu Trypsin erkennt und spaltet Kex2 die Peptidbindungen am Carboxylende von einbasischen Aminosäuren wie Arginin oder Lysin nicht. Die Aktivität der Kex2-Protease wird durch herkömmliche Serinproteaseinhibitoren wie Aprotinin, PMSF oder TPCK nicht gehemmt.
Yeasen Rekombinantes Kex2 Die Protease wird in Pichia pastoris exprimiert, gemäß GMP-Vorschriften hergestellt, ist frei von jeglichen Bestandteilen tierischen Ursprungs und birgt kein Risiko einer Viruskontamination durch tierische Quellen. Sie hat die gleiche enzymatische Spezifität wie das natürliche Enzym Kex2 von Saccharomyces cerevisiae. Der optimale pH-Wert für die Aktivität liegt bei 9,0 und der stabile pH-Wert für die Lagerung liegt zwischen 5,0 und 6,0.
Merkmale
1.Starke Spezifität—Erkennt und spaltet speziell die Peptidbindungen am Carboxylende von zweibasischen Aminosäuren wie Arg-Arg und Lys-Arg.
2. Hohe Reinheit – Reinheit≥95 %.
3. Tierfrei—Rekombinant hergestellt, frei von exogener Viruskontamination und im Produktionsprozess werden keine Materialien tierischen Ursprungs verwendet.
Anwendungen
1.Prozessive enzymatische Spaltung bei der Herstellung von Peptidarzneimitteln.
2.Enzymatische Verdauung von Proteinen und Peptidmapping, Sequenzierung usw.
Technische Daten
Quelle | Rekombinante Hefe-Expression |
Molekulargewicht | Theoretischer Wert 67,0±6,7 kDa |
Aussehen | Weißes oder cremefarbenes Pulver |
Enzymkonzentration | ≥10,0 Einheiten/mg pro |
Einheit Definition | Bei 25℃, in einem 3 mL Reaktionssystem mit 50 mM Tris-HCl und 2 mM CaCl2 Bei einem pH-Wert von 8,0 beträgt die Enzymmenge, die die Freisetzung von 1 μmoL katalysiert, 4-Nitroanilin aus dem Substrat Boc-QRR-pNA pro Minute wird als eine Einheit Enzymaktivität definiert. |
Qualitätssicherung | Die SDS-PAGE-Gelerkennung zeigt ein klares Einzelband des Zielproteins; keine anderen Proteasen vorhanden, kein unspezifisches Schneiden. |
Lagerung
Lyophilisiertes Pulver dürfen bei 2~8℃ lagern Ein Jahr lang, geschützt vor Licht und Feuchtigkeit.
Lösungs- und Lagerungspuffer (20 mM NaAc-HAc, pH 5,2, 2 mM Ca2+), nach dem Auflösen bei unter -20 °C lagern. Es wird empfohlen, die Lösung für die Lagerung in Aliquots aufzuteilen, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden.
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