Beschreibung
Rekombinante TEV-Protease (rTEV-Protease) ist eine gentechnisch modifizierte und gereinigte rekombinante Protease, die nicht nur die funktionelle Aktivität der natürlichen TEV-Protease beibehält, sondern auch über einen breiten Temperaturbereich eine stärkere Stabilität und Spezifität aufweist. rTEV-Protease ist ein häufig verwendetes Enzym zum Schneiden von Affinitätsmarkierungen auf Fusionsproteinen. Es ist spezifisch für die sieben Aminosäuren umfassende Sequenz EXXYXQ↓(G/S), und die Schnittstelle liegt zwischen Glutamin und Glycin/Serin. Die häufig verwendete Sequenz aus sieben Aminosäuren ist Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly. rTEV Protease ist optimal aktiv bei pH 7,0, 30°C, ist aber über einen weiten Bereich von pH 6,0-8,5 und Temperaturen 4-30 aktiv°C (siehe Tabelle 1), wodurch die Wahl der Reaktionsbedingungen je nach Zielprotein flexibel ist. Darüber hinaus sind die 6×Seine Markierung des N-Terminus kann auch verwendet werden, um rTEV-Protease durch Ni-NTA-Harz zu entfernen und so das Zielprotein zu reinigen.
Das Produkt wurde auf der Grundlage von 20403ES optimiert und weist im Vergleich zu 20403ES eine höhere Reinheit, eine stärkere Aktivität und einen niedrigeren E.coli gDNA-Rest, der für Anwendungen mit höheren Anforderungen an Enzymreinheit, Aktivität und Rückstand geeignet ist.
Merkmale
Hohe Spaltungseffizienz: Die Proteinmarkierung wird gründlicher entfernt.
Geringe Rest-gDNA des Wirts: Reduzieren Sie wirksam das Risiko der Einschleppung von Rückständen körperfremder Substanzen.
Anwendungen
Entfernung von Fusion-Tags
Technische Daten
| Einheitendefinition | Die Enzymmenge, die erforderlich ist, um >85 % der 3 μg Substrat in einem 1×rTEV-Puffer (50 mM Tris, pH 8,0, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT) bei 30OC für 1 h wurde als Aktivitätseinheit definiert |
| Proteinreinheit | ≥95 % |
| Quelle | Ausgedrückt in Escherichia coli |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 20427ES80 | 20427ES10 | 20427ES50 |
| 20427-A | rTEV-Protease (5 U/μL) | 200 μl | 2×1 ml | 10 ml |
| 20427-B | rTEV-Puffer (10×) | 600 μl | 6 ml | 30 ml |
Versand und Lagerung
rTEV-Protease, gelagert bei -25~-15OC für 6 Monate; Lagerung bei -85~-65OC für 1 Jahr.
rTEV-Puffer, gelagert bei -25~-15OC für 1 Jahr.
Hinweis: Es wird empfohlen, beim Erhalt der Ware oder bei der ersten Verwendung jede Komponente separat zu lagern, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden.
Zahlen
Figur 1. Überprüfung der Spaltungsaktivität von UCF.METM rTEV-Protease
Hinweis: Verwendung eines Fusionsproteins (3 μg) cmit dem UCF.METM rTEV-Protease-Spaltstelle als Substrat, UCF.METM rTEV-Protease wurde in Konzentrationen von 10, 5 bzw. 3 U zugegeben. Die Reaktion wurde bei 30 OC für 1 Stunde, und der Spaltungseffekt wurde durch Agarosegelelektrophorese nachgewiesen. Die Ergebnisse zeigten, dass bei einer Menge an UCF.METM Es waren mehr als 3 U rTEV-Protease vorhanden, die das Substrat mit einer Spaltungseffizienz von >90 % effizient spalten konnte.
Unterlagen:
Sicherheitsdatenblatt
20427_Sicherheitsdatenblatt_Ver.EN20250120.pdf
Benutzerhandbücher
Zahlung und Sicherheit
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Anfrage
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FAQ
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