Natürliches Protein A ist ein Zellwandoberflächenprotein, das in Staphylococcus aureus vorkommt. Es ähnelt dem Protein G, das aus dem Gattung G oder C Streptokokken, binden am meisten Säugetier IgG von interagieren in erster Linie mit Die Fc Region von Immunglobulin (Ig), unterscheiden sich jedoch in ihrer Bindungsspezifität. Es kann zur Trennung und Reinigung einer Vielzahl von Antikörpern (monoklonale Antikörper und polyklonale Antikörper) verwendet werden. Protein A und Protein G unterscheiden sich in ihren Bindungseigenschaften an verschiedene Immunglobulin-Unterklassen (Einzelheiten finden Sie in Anhang 1).
Dieses Produkt verwendet genetisch modifiziertes Protein A, das nicht nur seine Ig-Affinitätseigenschaften beibehält, sondern auch die nicht-wichtige Bindungsdomäne des natürlichen Proteins selbst entfernt, um unspezifische Bindungen zu reduzieren. SuRi rProtein A Agarose Resin, das ein hochvernetztes Agarosegel als Matrix und modifiziertes alkaliresistentes rekombinantes Protein A als Ligand ist, weist eine hohe physikochemisch Stabilität auf. Mit diesem Produkt, das bequem zu verwenden und weit verbreitet ist, können hochreine Antikörper aus Aszites-, Serum- und Kulturmediumproben durch einstufige Affinitätschromatographie gewonnen werden.

Komponenten

Technische Daten

Versand Und Lagerung

Die Produkte werden mit Kühlakku versendet.   Es kann stabil bei 2~8℃ gelagert werden für 5 Jahre.

Anweisungen

1. Puffervorbereitung

Es wird empfohlen, die folgenden Puffer müssen vor der Verwendung mit einer 0,22 μm- oder 0,45 μm-Filtermembran gefiltert werden. Ausgleichs-/Bindungs-/Waschpuffer: 0,15 M NaCl, 20 mM Na2 HPO4, pH 7,0

Elutionspuffer: 0,1 M Glycin, pH 3,0

Neutralisierungspuffer: 1 MTris-HCl, pH 8.5

2. Probenvorbereitung

Sicherstellen Das Die Probe Lösung hat Die geeignet ionisch Stärke Und pH vor Laden Die Spalte, entweder von Verdünnung der Serumprobe, Aszites oder Zellkulturlösung mit einem Binde-/Waschpuffer oder durch Dialyse der Probe mit einem Binde-/Waschpuffer.

3. Säulenpackung

Laden Sie das SuRi rProtein A Agarose-Harz in eine geeignete chromatographische Säule geben und darauf achten, dass keine Blasen entstehen.

4. Probenreinigung

1) Balance: Die chromatographische Säule Ist ausgeglichen durch eine Bindung Puffer 0 von 5 mal Die Spalte Volumen, Also Das Die Verpackung erfolgt im selben Puffersystem wie das Zielprotein und übernimmt die Rolle des Proteinschutzes.

2) Probe Laden: Der Probe War geladen Zu Die ausgewogen Protein A Agarose Harz Zu sicherstellen voll Kontakt zwischen dem Zielprotein und dem Harz, verbessern die Rückgewinnung Rate des Zielproteins und sammeln Sie das Abwasser, um getestet werden.

3) Waschen: Waschen mit 10-15 mal die Spalte Volumen der Waschen Puffer, entfernen Die Verunreinigung Protein es sei denn speziell adsorbiert, sammeln Sie die Waschlösung.

4) Elution: Elution mit 5-10 mal Spalte Volumen der Elution Puffer, sammeln Elutionsmittel, Das Ist, Die Ziel Protein Komponente.

5) CIP-Reinigung Und Erhaltung: Allgemein verwenden 0,1-0,5 M NaOH größer als 3CV und Die Kontakt Zeit Ist 15 Mindest; Dann mit 5CV-Ausgleichslösung neutral spülen. Schließlich ist es ausgeglichen mit 20% Ethanol von 5 mal der Spalte Volumen, Und Dann gelagert  In 20 %  Ethanol  von Die  Dasselbe  Volumen  bei  4°C  Zu  verhindern  Die  Verpackung  aus  Sein durch Bakterien kontaminiert.

5. SDS-PAGE-Erkennung

Der Proben erhalten In Die Reinigung Verfahren (einschließlich Original Proben, Abwasser Komponenten, Waschen Und Zur Ermittlung des Reinigungseffekts wurden die Moleküle (z. B. Elutionskomponenten usw.) mittels SDS-PAGE nachgewiesen.

Hinweise

1. Das Produkt nicht kühlen.
2. rProteinAAgarose-Harz muss vor der Verwendung mehrmals vollständig umgerührt werden, damit das Agarose-Harz gleichmäßig vermischt wird.
3. Während aller Vorgänge muss die Probe bei 4 °C oder auf Eis gelagert werden.
4. Tragen Sie zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit bei Operationen bitte Laborkittel und Einweghandschuhe.
5. Nur für Forschungszwecke.

Beigefügte Tabelle 1: Zusammenfassung der Bindungsfähigkeit of Proteine ​​A und G bis Ig in verschiedenen Spezies

SuRi rProtein Eine Agarose Harz