Beschreibung
Salt Active UltraNuclease ist eine unspezifische Endonuklease welche wird aus marinen Mikroorganismen gewonnen und gentechnisch in Escherichia coli (E. coli) exprimiert und gereinigt. Diese unspezifische, rekombinante Endonuklease weist optimale Aktivität bei hoher Salzkonzentration (500 mM NaCl) auf, was die Effizienz und Ausbeute in verschiedenen Arbeitsabläufen verbessern kann.
Dieses Kit verwendet das Prinzip des Doppel-Antikörper-Sandwich-Enzyme-linked Immunosorbent Assays (Sandwich-ELISA) zum Nachweis von Rest Salzaktive UltraNuclease in Proben. Fügen Sie zunächst hinzu Die Salt Active UltraNuclease Standard und Testprobe zu den Anti-Salt Active UltraNuclease beschichteten Mikrotiterstreifen (36719-A), dann hinzufügen die verdünnte Biotin-markierter Anti-UltraNuklease-Antikörper (36719-C), und schließlich hinzufügen Streptavidin-HRP (36719-D) um einen Antikörper + Antigen + Antikörper-Biotin + SA-HRP-Komplex zu bilden. Anschließend hinzufügen TMB-Substrat (36719-H) in den Komplex, um die Farbreaktion nach dem Waschen des Komplexes zu beobachten. TMB wird unter der Katalyse des HRP-Enzyms in Blau umgewandelt und schließlich in Gegenwart von Säure in Gelb umgewandelt, und der Farbton korreliert positiv mit der Menge an Salz Aktiv UltraNuclease in der Probe.
Der Erkennung Der Messbereich dieses Kits beträgt 0,047-3 ng/mL; die untere Nachweisgrenze liegt bei 0,024 ng/ml.
Besonderheit
- Hochempfindlich: Nachweis von nur 0,024 ng/ml Salzaktiv UltraNuclease-Rückstände in biologischen Proben während des Prozesses und in der Endverarbeitung.
- Sorgt für Präzision: Der Salt Active UltraNuclease-Reste können mit einer Wiederfindung von 75 %–125 %.
- Besonderheit: Kooperieren Sie mit YEASEN Salt Active UltraNuclease und kann die Residuen genau erkennen.
- Stabil: Der Unterschied zwischen den einzelnen Chargen ist gering, die Eigenschaften des Kits werden bei Temperaturen unter 37 °C nicht beeinträchtigt. 7 Tage.
- Einfache Signalerfassung: Durch die Verwendung des Biotin-Streptavidin-Systems kann das Signal stabil verstärkt werden.
Anwendung
- Restsalz Aktiv UltraNuclease-Test in biologischen Produkten
Spezifikation
| Empfindlichkeit | 0,024 ng/ml (Bereich 0,047–3 ng/ml) |
| Assay-Zeit | <4 Stunden |
| Assay-Prinzip | Zwei-Stellen-Immunenzymtest |
| Signalverstärkung | Biotin-Streptavidin-System |
| Detektionswellenlänge | 450 nm bis 630 nm |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 36703ES96 |
| 36703-A | Anti-Salz Aktive UltraNuclease beschichtete Mikrotiterstreifen | 96 T |
| 36703-B* | Standard: Salzaktive UltraNuclease | 2 Phiole |
| 36703-C | Nachweisantikörper: Biotin-konjugierte Antikörper | 120 μL |
| 36703-D | Streptavidin-HRP | 60 μL |
| 36703-E | Verdünnungspuffer 1 | 50 ml |
| 36703-F | Waschpufferkonzentrat (20×) | 50 ml |
| 36703-G | Verdünnungspuffer 2 | 30 ml |
| 36703-H | TMB Substrat | 15 ml |
| 36703-I | Lösung stoppen | 10 ml |
| 36703-J | Plattenversiegler | 5 jede |
* 1. Der In diesem Kit ist keine Stopplösung enthalten, sie muss vom Benutzer zubereitet werden. 1 M HCl kann als Stopplösung verwendet werden;
* 2. Der Standard (36719-B) ist gefriergetrocknetes Pulver.
Lagerung
Dieses Produkt sollte bei 2 °C – 8 °C gelagert werden. Ungeöffnet ist das Produkt ein Jahr lang gültig. Nach dem Öffnen ist das Reagenz ein halbes Jahr lang gültig.
*Bitte prüfen Sie nach Erhalt des Bausatzes, ob alle Bestandteile vollständig sind und lagern Sie diese umgehend im entsprechenden Zustand.
Zahlen
- Präzision Anzeige
A)Wiederholbarkeit
| Aufgestockte Probe | Intra-Assay | ||
| Duplikate | Durchschnittliche Konzentration (ng/ml) | Lebenslauf (%) | |
| S-1,5 ng/ml | 10 | 1.344 | 2,97 % |
| S-0,375 ng/ml | 10 | 0,260 | 2,27 % |
| S-0,094 ng/ml | 10 | 0,061 | 2.56 % |
B)Mittlere Präzision
| Aufgestockte Probe | Zwischenanalyse | ||
| Duplikate | Durchschnittliche Konzentration (ng/ml) | Lebenslauf (%) | |
| S-1,5 ng/ml | 30 | 1.335 | 5,70 % |
| S-0,375 ng/ml | 30 | 0,258 | 5,59 % |
| S-0,094 ng/ml | 30 | 0,064 | 6,82 % |
Tabelle 1. Die Präzision von Salz Aktiv Der UltraNuclease ELISA wurde wie oben beschrieben getestet. Schema
10 dupliziert wurden getestet bei 3 Konzentrationen auf der Standardkurve, und alle CV% waren niedriger als 5% (Abbildung 2A). 3 viel Salt Active UltraNuclease ELISA Kits wurden getestet und der CV% lag unter 10 % (Abbildung 2B).
- Genauigkeitsvalidierung
| Verdünnungsfaktor | Verdünnungsrückgewinnung (%) | Bereich der Verdünnungsrückgewinnung (%) |
| 1:2 | 92,5 | 87,5-98,9 |
| 1:4 | 87,0 | 79,0-95,2 |
| 1:8 | 92,6 | 78,9-106,2 |
| 1:16 | 96,9 | 79,1-118,1 |
| Mit Spikes versetzte Proben | Spike-Wiederherstellung (%) | Bereich der Spike-Wiederherstellung (%) |
| S-0,75 ng/ml | 105,3 | 91,0-122,1 |
| S-0,18 ng/ml | 96,6 | 86,5-105,5 |
Tabelle 2. Die Genauigkeit des UCF.ME™ UltraNuclease ELISA wurde nach folgendem Schema getestet
Die Proteinprobe mit hoher Salt Active UltraNuclease-Konzentration wurde seriell 2-fach verdünnt und zusätzlich mit 0,75 ng/ml und 0,18 ng/ml Salt Active UltraNuclease angereichert. Die Verdünnungswiederfindung und die Spike-Wiederfindung lagen alle im Bereich von 75 % bis 125 %. (Abbildungen 3).
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