Die rekombinante Expression in Escherichia coli ist ein relativ einfaches und kostengünstiges Mittel zur Herstellung einiger Proteine ​​und Plasmid-DNA. Während des Prozesses der Produktherstellung mit Escherichia coli besteht eine hohe Wahrscheinlichkeit einer Kontamination von Wirtszellproteinen (HCPs) durch Escherichia coli, was die Wirksamkeit von Therapeutika verringern und nachteilige Toxizität oder Immunreaktionen verursachen kann. Daher ist es bei der Herstellung und Reinigung von Therapeutika für Menschen oder Tiere notwendig, den Gehalt dieser Verunreinigung so weit wie möglich zu minimieren.

ELISA ist eine einfache, hochempfindliche und objektive Methode zum Nachweis von HCPs. Dieses Kit verwendet das experimentelle Prinzip des Doppelantikörper-Sandwich-Enzymelinked Immunoassay (ELISA), um die Restmenge an E.coli HCP zu erkennen. Um E.coli HCP-Rückstände festzustellen, geben Sie den E.coli HCP-Standard und die zu testende Probe auf die mit einem Enzymetikett vorbeschichtete Platte mit Anti-E.coli HCP-Antikörpern (36712-A). Geben Sie dann verdünnten biotinmarkierten E.coli HCP-Nachweisantikörper (36712-C) und schließlich Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36712-D) hinzu, um einen Antikörper+Antigen+Antikörper-Biotin+SA-HRP-Komplex zu bilden. Nach dem Waschen der Platte geben Sie TMB-Farbentwicklerlösung (36712-G) hinzu, um Farbe zu entwickeln. TMB verwandelte sich unter der Katalyse des HRP-Enzyms von farblos in blau und schließlich unter Einwirkung der Stopplösung (36712-H) in gelb. Der Gelbton korreliert positiv mit der Menge an E.coli HCP, die in der Probe nachgewiesen wurde. Dieses Kit kann zur Optimierung des Reinigungsprozesses biologischer Produkte, zur Kontrolle von Verunreinigungen im Zwischenprozess und zur Erkennung der Freisetzung von Endprodukten verwendet werden.

Komponenten