Beschreibung
HEK293-Zellen, die aus menschlichen embryonalen Nierenzellen gewonnen werden, werden häufig zur Herstellung verschiedener therapeutischer Proteine, virusähnlicher Partikel (VLP) in Impfstoffen, viraler Vektoren in der Zell- und Gentherapie oder für verwandte wissenschaftliche Forschung verwendet. Während der Herstellung und Reinigung dieser Produkte werden zwangsläufig Verunreinigungen des Wirtszellproteins (HCP) eingeführt. Diese Verunreinigungen können die Wirksamkeit des Produkts verringern und nachteilige Toxizität oder Immunreaktionen verursachen. Daher ist es notwendig, HCP-Verunreinigungen auf das niedrigste praktische Niveau zu reduzieren.
Dieses Kit verwendet das experimentelle Prinzip des Doppelantikörper-Sandwich-Enzymelinked Immunoassay (ELISA) zum Nachweis von HEK293-HCP-Rückständen. Die ELISA-Methode ist einfach, hochempfindlich und objektiv. Zum Nachweis von HEK293-HCP-Rückständen geben Sie den HEK293-HCP-Standard (36713-B) und die zu testende Probe auf die mit Anti-HEK293-HCP-Antikörper (36713-A) vorbeschichtete ELISA-Platte. Geben Sie dann verdünnten biotinmarkierten HEK293-HCP-Nachweisantikörper (36713-C) und schließlich Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36713-D) hinzu, um einen Antikörper+Antigen+Antikörper-Biotin+SA-HRP-Komplex zu bilden. Nach dem Waschen der Platte geben Sie TMB-Chromogenlösung (36713-H) hinzu, um Farbe zu entwickeln. TMB verwandelt sich unter Katalyse des HRP-Enzyms von farblos nach blau und schließlich unter Einwirkung der Stopplösung (36713-I) nach gelb. Der Gelbton korreliert positiv mit der in der Probe nachgewiesenen Menge an HEK293 HCP. Dieses Kit kann zur Optimierung des Reinigungsprozesses biologischer Produkte, zur Kontrolle von Verunreinigungen im Zwischenprozess und zur Erkennung der Freisetzung von Endprodukten verwendet werden.
Komponenten
| NEIN. | Name | 36713ES96 |
| 36713-A | Anti-HEK293 beschichtete Mikrotiterstreifen | 96 T |
| 36713-B | Standard: HEK293 HCP (10 μg/ml) | 100 μL |
| 36713-C | Erkennung Antikörper: Biotin-konjugiert Antikörper (50×) | 300 μL |
| 36713-D | Streptavidin-HRP (100×) | 300 μL |
| 36713-E | Verdünnungspuffer 1 | 50 ml |
| 36713-F | Waschpufferkonzentrat (20×) | 50 ml |
| 36713-G | Verdünnungspuffer 2 | 30 ml |
| 36713-H | TMB-Substrat | 12 ml |
| 36713-I | Lösung stoppen | 10 ml |
| 36713-J | Plattenversiegler | je 5 |
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