Beschreibung
Fibronektin (FN) ist ein extrazelluläres Glykoprotein, das in löslicher Form in Körperflüssigkeiten oder in unlöslicher Form in der extrazellulären Matrix vorkommt. Als eines der wichtigsten Zelladhäsionsmoleküle spielt FN eine Schlüsselrolle bei vielen wichtigen physiologischen Prozessen wie Embryogenese, Wundheilung, Hämostase und Thrombose. Veränderungen in der Fibronektinexpression, dem Abbau und der Kombination stehen in engem Zusammenhang mit einer Vielzahl pathologischer Ereignisse, darunter Krebs und Fibrose.
Anwendungen von Fibronektin (FN):
1) Als Zellkulturmatrix besteht seine Funktion darin, das Zellwachstum zu fördern, die Zelladhäsionsrate zu erhöhen, den Zellstoffwechsel zu verbessern, die Zellwachstumszeit zu verkürzen, die Zellfusionsrate in der Hybridomtechnologie zu erhöhen usw.
2) Diagnose und Behandlung von Krankheiten; seine Funktion ist die Wundversorgung und -heilung, die Diagnose und Behandlung von Krebs, die Behandlung von Gefäßsystemen sowie von Herz-Kreislauf- und zerebrovaskulären Erkrankungen usw.
Dieses Produkt ist ein rekombinantes menschliches Fibronektin, das aus Reis-Endospermzellen gewonnen wird und in monomerer Form vorliegt. Es kann als Zellkulturmatrix verwendet werden, um Matrigel, Rattenschwanzkollagen, aus Blut gewonnenes Fibronektin usw. zu ersetzen, um die Zelladhäsionsrate zu erhöhen, den Zellstoffwechsel zu verbessern und den Zellwachstumszyklus zu verkürzen. Es kann auch direkt dem Kulturmedium hinzugefügt werden, um die verwendete Serummenge zu ersetzen oder zu reduzieren, Zelladhäsion, Migration und mobiles Wachstum zu fördern und den Zellstatus aufrechtzuerhalten.
Bei diesem Produkt handelt es sich um ein gefriergetrocknetes Pulver in Zellkulturqualität, das sich durch geringe Chargenunterschiede auszeichnet und kein potenzielles Risiko einer Virusinfektion darstellt.
Produkt Eigenschaften
CAS-Nummer | 86088-83-7 |
Quelle | REis |
Molekulargewicht | 200–210 kDa |
Aussehen | Sterilgefiltertes, weißes, gefriergetrocknetes Pulver. |
Reinheit | > 95 % durch SDS-PAGE |
pH | 6,0 bis 8,0 |
Biologische Aktivität | Der ED50 wie durch einen CelI-Adhäsionstest mit B16-F1-Mausmelanomzellen bestimmt, beträgt weniger als 1,1 μg/ml, was einer spezifischen Aktivität von > 1,17 x 10 entspricht7 IE/mg. |
Endotoxin | < 0.5 EU/µg |
Versand und Lagerung
Dieses Produkt sollte bei -25~-15℃ gelagert werden für 3 Jahre.
Rekonstitution
Lösen Sie rekombinantes humanes Fibronektin (rFN) in 1×PBS, um eine Aufbewahrungslösung mit einer Konzentration von 1 mg/ml herzustellen. Lagern Sie die Lösung bei -20 °C in Aliquots entsprechend der Einzeldosis, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden. Die Lösung ist 3–6 Monate lang wirksam.
Gebrauchsanweisung
1. Beschichtungsexperiment (am Beispiel einer 6-Well-Platte, für andere Kulturplatten siehe Tabelle 1)
1.1 Nehmen Sie eine geeignete Menge rekombinanten humanen Fibronektins (rFN) heraus und verdünnen Sie es mit sterilem 1×PBS, pH 7,2–7,4, auf die Konzentration der Arbeitslösung. Der Referenzbereich der Endkonzentration beträgt 50–100 μg/ml. Geben Sie es nach dem Mischen in die 6-Well-Platte (800 μl/Well), um sicherzustellen, dass die Arbeitslösung den Boden der 6-Well-Platte vollständig bedeckt.
1.2 Stellen Sie die 6-Well-Platte mit der rFN-Arbeitslösung über Nacht auf 4 °C oder zum Beschichten für 1 Stunde auf 37 °C.
1.3 Die Arbeitslösung in der 6-Well-Platte sammeln und bei 4 °C aufbewahren. Sie kann innerhalb einer Woche zum Beschichten anderer Kulturflaschen/-platten verwendet werden.
1.4 Nehmen Sie die mit rFN beschichtete 6-Well-Platte heraus, geben Sie normales Zellkulturmedium hinzu und impfen Sie die Zellen direkt ein. rFN fördert die Zelladhäsion und das Zellwachstum.
1.5 Wenn die beschichtete 6-Well-Platte vorerst nicht verwendet wird, lagern Sie sie in einem verschlossenen Behälter bei 4 °C. Es wird empfohlen, sie innerhalb einer Woche zu verwenden.
Tabelle 1. Empfohlene rFN-Zugabemengen für verschiedene Kulturflaschen/-platten
Zellkulturschalen/-platten | Bodenfläche (cm2) | Empfohlene Dosierung |
96-Well-Platte | 0,32 | 50 μl/Vertiefung |
24-Well-Platte | 2 | 200 μl/Vertiefung |
12-Well-Platte | 4.5 | 400 μl/Vertiefung |
6-Well-Platte | 9.6 | 800 μl/Vertiefung |
35mm Schüssel | 8 | 600 μl/Vertiefung |
60mm Schüssel | 21 | 1.6 ml/Schale |
T-25 Flasche | 25-28 | 2 ml/Flasche |
Beim Beschichtungs-/Plattierungsexperiment sollte die Menge der zugegebenen Arbeitslösung aus rekombinantem humanem Fibronektin (rFN) entsprechend der Größe der Kulturschale/-flasche angepasst werden, wie in Tabelle 1 unten gezeigt.
2. Zellkulturexperiment
Während der Zellkultur kann die Zugabe von rFN direkt zum Zellkulturmedium die Zelladhäsion und -migration fördern und den Zellstatus aufrechterhalten. Der Referenzbereich für die endgültige Konzentration liegt bei 5 bis 50 μg/ml.
Hinweise
1. Dieses Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt.
2. Bitte operieren Sie mit Laborkittel und Einweghandschuhen,zu Ihrer Sicherheit.
VorsichtS
1. Vermeiden Sie wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen.
2. Bitte tragen Sie zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit bei Operationen Laborkittel und Einweghandschuhe.
3. Nur für Forschungszwecke!
Zahlung und Sicherheit
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Das Produkt ist nur für Forschungszwecke bestimmt und nicht für die therapeutische oder diagnostische Anwendung bei Menschen oder Tieren. Produkte und Inhalte sind durch Patente, Marken und Urheberrechte von
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