Alamar Blue ist ein oxidativ-reduzierender Indikator, der je nach Stoffwechselaktivität Veränderungen und Fluoreszenzsignale erzeugen kann. Es handelt sich um einen sicheren und ungiftigen Farbstoff, der zur quantitativen Analyse der Zellaktivität und Zellproliferation sowie zur biologischen Bestimmung von Zytokinen und In-vitro-Zytotoxizität verwendet werden kann. Die natürliche Stoffwechselaktivität von Zellen von Tieren, Pilzen und Bakterien kann damit effektiv bestimmt werden. Im oxidierten Zustand ist Alamar Blue violett-blau ohne Fluoreszenz. Im oxidierten Zustand verwandelt es sich in ein rosa oder rot fluoreszierendes oxidiertes Produkt, das den Verbrauch von Sauerstoffmolekülen durch die untersuchten Zellen oder Mikroorganismen widerspiegelt, weshalb es häufig als oxidativ-reduzierender Indikator verwendet wird, um die Stoffwechselaktivität beobachteter Zellen und Bakterien anzuzeigen. Diese Bestimmung ist die Fähigkeit, Reagenzien basierend auf der Stoffwechselaktivität in Fluoreszenz- und Farbindikatoren umzuwandeln. Während des Zellproliferationsprozesses steigt das Verhältnis von NADPH/NADP, FADH/FAD, FMNH/FMN und NADH/NAD in den Zellen an. Die Aufnahme von Farbstoffen in die Zellen wird durch diese Stoffwechselzwischenprodukte und Cytochrome wiederhergestellt und an die äußeren Zellen abgegeben und im Medium gelöst, so dass sich das Medium von einem fluoreszierenden Blau zu einem fluoreszierenden Rosa ändert. Beschädigte und aktive Zellen haben eine geringe natürliche Stoffwechselaktivität, daher sind die entsprechenden Signale geringer. Dies kann mit einem gewöhnlichen optischen Lichtmessgerät oder einem Fluoreszenzlichtmessgerät nachgewiesen werden. Es stimuliert die Wellenlänge zwischen 530 und 560 nm und die übertragene Lichtwellenlänge beträgt 590 nm. Inhalation und Fluoreszenzstärke sind direkt proportional zur Anzahl der aktiven Zellen.

Dieses Produkt kann häufig für den Zellproliferationsstoffwechsel, die In-vitro-Messung der zytotoxischen Wirkung von Arzneimitteln und die schnelle Erkennung und Identifizierung pathogener Mikroorganismen verwendet werden. Im Vergleich zu Analysemethoden wie Taipanlan, TTC, MTT, MTS usw. hat Alamar Blue weitere Vorteile. Alamar Blue verwendet ein einzelnes Reagenz, um die Hyperplasie von Zellen kontinuierlich und schnell zu erkennen. Da Alamar Blue für die Zellen ungiftig und unschädlich ist und die Aktivität der Antikörpersynthese und -sekretion von Zellen nicht beeinflusst, kann es kontinuierlich beobachtet und die Hyperplasie derselben Zellcharge experimentell weiter beobachtet werden. Daher die Eigenschaften des Stoffwechsels.

Versand und Lagerung

Transport mit Nasseis. Produkt bei 4 °C, lichtgeschützt und mindestens ein Jahr haltbar.

Vorsichtsmaßnahmen

1. Kunden müssen selbst ein 100 % reduziertes Alamar Blue-Reagenz herstellen. Um das Alamar Blue zu erhalten, muss die Mischlösung aus Alamar Blue und Zellmedium hergestellt werden. Das Verhältnis von Alamar Blue zum Zellmedium beträgt 1:10 und die Hochdrucksterilisation dauert 15 Minuten. (Es kann weder für das konzentrierte Alamar Blue mit hohem Druck sterilisiert werden, noch kann es mit PBS hergestellt werden, da das 100 % wiederhergestellte Alamar Blue in PBS instabil ist.)

2. Um die besten Ergebnisse zu erzielen, wird empfohlen, vor den Experimenten die Inkubationszeit und die Anzahl der Zellen zu untersuchen.

3. Die Zellen mit geeigneter Dichte können die Nachweisempfindlichkeit erhöhen. Für die 96-Loch-Platte empfehlen wir, 100 Mikrozyllarzellen pro Loch zu impfen. Der Konzentrationsbereich der Zellen beträgt: Pastenwandzellen bei 100-10.000/Loch, suspendierte Zellen bei 2.000-50.000/Loch und das Medium ist leer. Für die 384-Loch-Platte werden die Zellkonzentration und die Impfmenge um die Hälfte reduziert.

4. Der gesamte Prozess sollte sterilisiert werden, da mikrobielle Schadstoffe auch das Testmittel wiederherstellen und die Versuchsergebnisse beeinträchtigen können.

5. Achten Sie auf die Inkubationszeit der Impfzellkonzentration und fügen Sie Nachweisreagenzien hinzu.Die Zellkonzentration ist zu hoch oder die Inkubationszeit zu lang, was zu einer sekundären Reduktionsreaktion führt, die ein farbloses und fluoreszierendes Verschwinden erzeugt.

6. Während der Inkubation müssen Sie Licht vermeiden.

7. Dieses Produkt kann mittels Fluoreszenz oder einem optischen Messgerät nachgewiesen werden, aber die Fluoreszenzempfindlichkeit ist hoch und der experimentelle Fehler gering. Es wird empfohlen, Fluoreszenzerkennung zu verwenden.
8. Dieses Produkt ist nur für wissenschaftliche Forschung bestimmt!