Beschreibung
Phalloidin ist ein zyklisches Heptapeptidtoxin aus dem Grünen Knollenblätterpilz (Amanita phalloides). Es bindet mit hoher Affinität (Kd = 20 nM) an filamentöses Aktin (F-Aktin), nicht jedoch an globuläres Aktin (G-Aktin). Es wird häufig zur Markierung von F-Aktin in Gewebeschnitten, Zellkulturen oder zellfreien Systemen für qualitative und quantitative Analysen verwendet. Phalloidinderivate binden zudem an Aktinfilamente tierischen und pflanzlichen Ursprungs, einschließlich Muskel- und Nicht-Muskelzellen, in einem stöchiometrischen Verhältnis von etwa einem Phalloidinmolekül pro Aktinuntereinheit. Die unspezifische Bindung ist vernachlässigbar, sodass gefärbte und ungefärbte Bereiche klar voneinander unterschieden werden können. Daher eignen sich Phalloidinderivate besonders gut als Ersatz für Aktin-Antikörper in verwandten Forschungsgebieten. Darüber hinaus sind Phalloidinderivate klein, mit einem Durchmesser von etwa 12–15 Å und einem Molekulargewicht von weniger als 2000 Dalton. Viele physiologische Eigenschaften von Aktin bleiben erhalten, wie beispielsweise die Fähigkeit zur Interaktion mit Aktin-bindenden Proteinen wie Myosin, Tropomyosin und DNase I. Phalloidinmarkierte Filamente können weiterhin feste Myosinmatrizen durchdringen, und Glycerin-extrahierte Muskelfasern können sich nach der Markierung kontrahieren.
Die Bindung von Phalloidin hemmt die Depolymerisation von filamentösem Aktin (Mikrofilamenten), stabilisiert deren Struktur und stört das dynamische Gleichgewicht von Polymerisation und Depolymerisation. Diese Eigenschaft reduziert die kritische Konzentration (CC) für die Aktinpolymerisation auf unter 1 µg/ml und macht Phalloidin zu einem wirksamen Polymerisationsförderer. Zusätzlich hemmt Phalloidin die ATP-Hydrolyseaktivität von F-Aktin.
Bei diesem Produkt handelt es sich um iFluor™ 555-markiertes Phalloidin, das orangerot fluoresziert. Es zeichnet sich durch hohe Helligkeit und Photostabilität, hohe Spezifität und hohen Kontrast aus und bietet bessere Färbeeffekte als Aktin-Antikörper. Es eignet sich für den qualitativen und quantitativen Nachweis von F-Aktin. Phalloidin-iFluor™ Die 555-Konjugatfärbung ist vollständig kompatibel mit anderen in der Zellanalyse verwendeten Fluoreszenzfarbstoffen, einschließlich fluoreszierender Proteine, Qdot®-Nanokristallen und anderen iFluor™-Konjugaten (einschließlich iFluor™-konjugierter Sekundärantikörper). Das von diesem Produkt gebundene F-Aktin behält viele biologische Eigenschaften des Aktins selbst. Darüber hinaus ist dieses Produkt nicht speziesspezifisch und breit anwendbar.
Dieses Produkt wird in einer Konzentration von 1 mg/ml bereitgestellt.
Merkmale
Bindet selektiv an filamentöses Aktin (F-Aktin).
Phalloidin ist nicht speziesspezifisch und weist praktisch keine unspezifische Färbung auf. Dadurch wird ein extrem klarer Kontrast zwischen gefärbten und ungefärbten Bereichen geschaffen.
Es ist hochverträglich und beeinträchtigt die Aktivität von Aktin nicht.
Anwendungen
Die enge und selektive Bindung an F-Aktin zeigt die Verteilung des Mikrofilament-Zytoskeletts innerhalb der Zelle.
Technische Daten
Molekulargewicht | ~1300 |
Anregung/Emission | 556/574 nm |
Löslichkeit | Löslich in DMSO |
Struktur | ![]()
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Komponenten
Komponenten Nr. | Name | 40737ES75 |
40737 | Phalloidin-iFluor™ 555-Konjugat | 300 T |
Versand und Lagerung
Das Produkt wird mit einem Kühlakku geliefert. Kann bei -15 °C bis -25 °C in einer dunklen, trockenen Umgebung bis zu einem Jahr gelagert werden.
Unterlagen:
Sicherheitsdatenblatt
Benutzerhandbücher
Zitate und Referenzen:
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