Phalloidin ist ein zyklisches Heptapeptidtoxin aus dem Grünen Knollenblätterpilz (Amanita phalloides). Es bindet mit hoher Affinität (Kd = 20 nM) an filamentöses Aktin (F-Aktin), nicht jedoch an globuläres Aktin (G-Aktin). Es wird häufig zur Markierung von F-Aktin in Gewebeschnitten, Zellkulturen oder zellfreien Systemen für qualitative und quantitative Analysen verwendet. Phalloidinderivate binden zudem an Aktinfilamente tierischen und pflanzlichen Ursprungs, einschließlich Muskel- und Nicht-Muskelzellen, in einem stöchiometrischen Verhältnis von etwa einem Phalloidinmolekül pro Aktinuntereinheit. Die unspezifische Bindung ist vernachlässigbar, sodass gefärbte und ungefärbte Bereiche klar voneinander unterschieden werden können. Daher eignen sich Phalloidinderivate besonders gut als Ersatz für Aktin-Antikörper in verwandten Forschungsgebieten. Darüber hinaus sind Phalloidinderivate klein, mit einem Durchmesser von etwa 12–15 Å und einem Molekulargewicht von weniger als 2000 Dalton. Viele physiologische Eigenschaften von Aktin bleiben erhalten, wie beispielsweise die Fähigkeit zur Interaktion mit Aktin-bindenden Proteinen wie Myosin, Tropomyosin und DNase I. Phalloidinmarkierte Filamente können weiterhin feste Myosinmatrizen durchdringen, und Glycerin-extrahierte Muskelfasern können sich nach der Markierung kontrahieren.

Die Bindung von Phalloidin hemmt die Depolymerisation von filamentösem Aktin (Mikrofilamenten), stabilisiert deren Struktur und stört das dynamische Gleichgewicht von Polymerisation und Depolymerisation. Diese Eigenschaft reduziert die kritische Konzentration (CC) für die Aktinpolymerisation auf unter 1 µg/ml und macht Phalloidin zu einem wirksamen Polymerisationsförderer. Zusätzlich hemmt Phalloidin die ATP-Hydrolyseaktivität von F-Aktin.

Dieses Produkt ist mit iFluor™ 647 markiertes Phalloidin, das sich durch hohe Helligkeit und Photostabilität auszeichnet. Es weist eine hohe Spezifität und einen hohen Kontrast in der Färbung auf und liefert bessere Ergebnisse als Aktin-Antikörper für den qualitativen und quantitativen Nachweis von F-Aktin. Die Färbung mit Phalloidin-iFluor™ 647-Konjugat ist vollständig kompatibel mit anderen in der Zellanalyse verwendeten Fluoreszenzfärbemethoden, einschließlich fluoreszierender Proteine, Qdot®-Nanokristallen und anderen iFluor™-Konjugaten (einschließlich iFluor™-Sekundärantikörpern). Das durch dieses Produkt gebundene F-Aktin behält viele der biologischen Eigenschaften von Aktin selbst. Darüber hinaus ist dieses Produkt nicht speziesspezifisch und breit anwendbar.

Dieses Produkt wird als Pulver in kleinen Körnchen geliefert. Lösen Sie es in 30 µl DMSO auf, um eine 1 mg/ml-Lösung herzustellen.

Merkmale

Bindet selektiv an filamentöses Aktin (F-Aktin).

Phalloidin ist nicht speziesspezifisch und weist praktisch keine unspezifische Färbung auf. Dadurch wird ein extrem klarer Kontrast zwischen gefärbten und ungefärbten Bereichen geschaffen.

Es ist hochverträglich und beeinträchtigt die Aktivität von Aktin nicht.

Anwendungen

Die enge und selektive Bindung an F-Aktin zeigt die Verteilung des Mikrofilament-Zytoskeletts innerhalb der Zelle.

Technische Daten

Molekulargewicht	～2200
Anregung/Emission	650/665 nm
Löslichkeit	Löslich in DMSO
Struktur

Komponenten

Versand und Lagerung

Das Produkt wird mit einem Kühlakku geliefert. Kann bei -15 °C bis -25 °C in einer dunklen, trockenen Umgebung bis zu einem Jahr gelagert werden.

Unterlagen:

Sicherheitsdatenblatt

40762-MSDS-CN20250217

Benutzerhandbücher

40762_Manual_CN20250217_DE

Zitate und Referenzen:

[1] He YZ, Wang YM, Yin TY, Cuellar WJ, Liu SS, Wang XW. Im Darm exprimiertes Vitellogenin erleichtert die Bewegung eines Pflanzenvirus durch die Mitteldarmwand in seinem Insektenvektor. mSystems. 2021;6(3):e0058121. doi:10.1128/mSystems.00581-21(IF:6.496)

[2] Li T, Liu Y, Zhang Q, Sun W, Dong Y. Ein steroidinduziertes Osteonekrosemodell, das mithilfe einer Organ-on-a-Chip-Plattform erstellt wurde. Exp Ther Med. 2021;22(4):1070. doi:10.3892/etm.2021.10504(IF:2.447)