Beschreibung
D-Luciferin ist ein häufiges Substrat für Luciferase und wird in der gesamten Biotechnologie, insbesondere in der In-vivo-Bildgebungstechnologie, häufig verwendet. Der Wirkungsmechanismus besteht darin, dass Luciferin (das Substrat) oxidiert wird, um als Reaktion auf ATP und Luciferase Licht auszusenden (siehe Abbildung unten). Es entsteht, wenn zu viel Luciferin vorhanden ist. Die Lichtquantenzahl korrelierte positiv mit der Luciferase-Konzentration. Plasmide, die das für Luciferase kodierende Gen (Luc) tragen, wurden in Zellen transfiziert und in Versuchstiere wie Ratten und Mäuse eingeführt. In vivo wird dann Fluorescein injiziert und Änderungen der Lichtintensität werden mithilfe der Biolumineszenzbildgebung (BLI) erkannt, um den Krankheitsverlauf oder die Wirksamkeit von Medikamenten in Echtzeit usw. zu überwachen. Der Einfluss von ATP auf das Reaktionssystem kann auch verwendet werden, um Energie oder Lebenszeichen anhand von Änderungen der Biolumineszenzintensität anzuzeigen.
D-Luciferin wird auch häufig in In-vitro-Studien verwendet, einschließlich der Analyse von Luciferase- und ATP-Werten, Reportergenanalysen, Hochdurchsatzsequenzierung und verschiedenen Kontaminationstests. Derzeit gibt es drei Produktformen: D-Luciferin (freie Säure), D-Luciferinsalze (Natrium- und Kaliumsalze). Der Hauptunterschied liegt in der Löslichkeit: Ersteres ist wasserlöslich und die Löslichkeit im Puffersystem ist schwach, außer in schwachen Basen wie NaOH- und KOH-Lösungen mit niedriger Konzentration, löslich in Methanol und DMSO; Letzteres ist leicht in Wasser oder Puffer löslich, einfach zu verwenden, das Lösungsmittel ist ungiftig und besonders für In-vivo-Experimente geeignet. Als Lösung gibt es in den meisten Anwendungen keinen wesentlichen Unterschied zwischen den drei Produkten.
Merkmale
- Keine Strahlung, nahezu unschädlich für Lebewesen.
- Biolumineszenz, keine Anregungslichtquelle.
- So empfindlich, dass Sie es in einigen hundert Zellen erkennen können.
- Gute Penetration, 3-4cm Gewebetiefe noch erkennbar.
- Hohes Signal-Rausch-Verhältnis, starkes Fluoreszenzsignal und gute Entstörungsfähigkeit.
Anwendung
- Im Tumorigenese-Experiment an Nacktmäusen wurde das Tumorwachstum ohne Invasion in Echtzeit, ohne Tumor-Stripping-Messung, beobachtet.
- Um die Wirkung der Verabreichung auf das Tumorwachstum oder die Metastasierung zu testen, kann das Fluoresceinsubstrat innerhalb von 3 Stunden vollständig eliminiert werden, ohne den Arzneimittelversuch zu beeinträchtigen.
- Die Lokalisierung und Verteilung fremder Zellen im Tier wurde nachgewiesen.
- Das Zielgen oder der Promotor des Zielgens wird mit dem Luciferase-Gen fusioniert, um Änderungen der Genexpression während der Arzneimittelbehandlung oder des Krankheitsverlaufs zu erkennen.
- Überwachung der Stammzelltransplantation, des Überlebens und der Proliferation; Verfolgung der Verteilung und Migration von Stammzellen in vivo.
Technische Daten
| Englisches Synonym | (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolcarbonsäure Säure Natrium Salz; D-Luciferin-Glühwürmchen, Natriumsalz-Monohydrat; |
| CAS-NR. | 103404-75-7 |
| Formel | NaC11H7N2O3S2·H2O |
| Molekulargewicht | 320,32 g/mol |
| Aussehen | Hellgelbes Pulver |
| Löslichkeit | Wasserlöslich (100 mg/ml) |
| Reinheit (HPLC) | ≥95 % |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 40901ES01 | 40901ES02 | 40901ES03 | 40901ES08 | 40901ES10 |
| 40901 | D-Luciferin, Natriumsalz | 100 mg | 500 mg | 1 g | 5 g | 10 g |
Lagerung
Das Produkt sollte bei -15℃ gelagert werden ~ -25℃ für 1 Jahr.
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