Beschreibung
D-Luciferin ist ein häufiges Substrat für Luciferase und wird in der gesamten Biotechnologie, insbesondere in der In-vivo-Bildgebungstechnologie, häufig verwendet. Der Wirkungsmechanismus besteht darin, dass Luciferin (Substrat) in Gegenwart von ATP und Luciferase oxidiert werden kann, um Licht zu emittieren. Bei einem Überschuss an Fluorescein ist die Quantenzahl des erzeugten Lichts gleich der Luciferase-Konzentration, die positiv korreliert war (siehe Abbildung unten). Plasmide, die das für Luciferase kodierende Gen (Luc) tragen, wurden in Zellen transfiziert und in Versuchstiere wie Ratten und Mäuse eingeführt.
D-Luciferin wird auch häufig in In-vitro-Studien verwendet, einschließlich der Analyse von Luciferase- und ATP-Spiegeln, Reportergenanalyse, Hochdurchsatzsequenzierung und verschiedenen Kontaminationstests. Es gibt drei Produktformen: D-Luciferin (freie Säure), D-Luciferinsalz (Natriumsalz und Kaliumsalz). Der Hauptunterschied liegt in der Löslichkeit: Wasserlöslichkeit der ersteren und Löslichkeit des Puffersystems. Sie sind schwach löslich, außer in schwachen Basen wie niedrigen Konzentrationen von NaOH- und KOH-Lösungen. Löslich in Methanol und DMSO; Letzteres kann leicht in Wasser oder Puffer gelöst werden und ist einfach zu verwenden.
Merkmale
- Keine Strahlung, nahezu unschädlich für Lebewesen.
- Biolumineszenz, keine Anregungslichtquelle.
- So empfindlich, dass Sie es in einigen hundert Zellen erkennen können.
- Gute Penetration, 3-4cm Gewebetiefe noch erkennbar.
- Hohes Signal-Rausch-Verhältnis, starkes Fluoreszenzsignal und gute Entstörungsfähigkeit.
Anwendungen
- Im Tumorigenese-Experiment an Nacktmäusen wurde das Tumorwachstum ohne Invasion in Echtzeit, ohne Tumor-Stripping-Messung, beobachtet.
- Um die Wirkung der Verabreichung auf das Tumorwachstum oder die Metastasierung zu testen, kann das Fluoresceinsubstrat innerhalb von 3 Stunden vollständig eliminiert werden, ohne den Arzneimittelversuch zu beeinträchtigen.
- Die Lokalisierung und Verteilung fremder Zellen im Tier wurde nachgewiesen.
- Das Zielgen oder der Promotor des Zielgens wird mit dem Luciferase-Gen fusioniert, um Änderungen der Genexpression während der Arzneimittelbehandlung oder des Krankheitsverlaufs zu erkennen.
- Überwachung der Stammzelltransplantation, des Überlebens und der Proliferation; Verfolgung der Verteilung und Migration von Stammzellen in vivo.
Technische Daten
| Englisches Synonym | (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolcarbonsäure Kaliumsalz; D-Luciferin-Glühwürmchen, Kaliumsalz |
| CAS-NR. | 115144-35-9 |
| Formel | C11H7N2O3S2K |
| Molekulargewicht | 318,42 g/mol |
| Aussehen | Hellgelbes Pulver |
| Löslichkeit | Wasserlöslich(60 mg/ml) |
Komponenten
| Komponenten Nr. | Name | 40902ES01 | 40902ES02 | 40902ES03 | 40902ES08 |
| 40902 | D-Luciferin, Kaliumsalz | 100 mg | 500 mg | 1 g | 5 g |
Zahlen
Zitiert aus „Ein neuartiger allosterischer Inhibitor der Phosphoglycerat-Mutase 1 unterdrückt Wachstum und Metastasierung von nicht-kleinzelligem Lungenkrebs“, Cell Metab.2019;30(6):1107-1119
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