Beschreibung
Fas (Fibroblast alssociated; auch bekannt als APO-1 oder CD95) ist ein Mitglied der Todesrezeptor-Unterfamilie der TNF-Rezeptor-Superfamilie und wird als TNFRSF6 bezeichnet. Der menschliche Fas-Vorläufer ist 335 Aminosäuren lang und enthält ein 25 Aminosäuren langes Signalpeptid, eine 148 Aminosäuren lange extrazelluläre Domäne (ECD), eine 17 Aminosäuren lange Transmembransequenz und eine 145 Aminosäuren lange cytoplasmatische Region. Die ECD besitzt drei cysteinreiche TNFR-Wiederholungen, während die cytoplasmatische Region eine Todesdomäne (DD) enthält, die für die Übertragung apoptotischer Signale erforderlich ist (4). Menschliches Fas-ECD hat 55 %, 58 %, 62 %, 63 % und 64 % Aminosäuren-Sequenzidentität mit Fas-ECD von Maus, Ratte, Katze, Rind und Schwein. Eine humane Fas-Isoform von 314 Aminosäuren, der die Transmembransequenz fehlt, wird von ruhenden Lymphozyten sezerniert, während Isoformen von 149, 132, 103 und 86 Aminosäuren, denen ebenfalls die DD fehlt und die Substitutionen für Teile der TNFR-Wiederholungen aufweisen, weniger ausgeprägt exprimiert werden. Alle fünf Isoformen blockieren den durch die Bindung des Fas-Liganden induzierten extrinsischen Apoptoseweg. Fas-Ligand (FasL; auch TNFSF6) ist ein Typ-II-Transmembranprotein, das zur TNF-Familie gehört und auf aktivierten T-Zellen, NK-Zellen und Zellen an immunprivilegierten Stellen exprimiert wird. Alternativ wird FasL auch in löslicher Form abgesondert. Die Bindung von Fas induziert die Oligomerisierung vorgefertigter Fas-Trimere. Dieser aktivierte Rezeptorkomplex rekrutiert das Adaptermolekül FADD, um den Death-Inducing Signaling Complex (DISC) zu bilden. Bei Aktivierung initiieren Caspasen im DISC die apoptotische Signalkaskade. Fas ist in Epithelzellen, Hepatozyten, aktivierten reifen Lymphozyten, virustransformierten Lymphozyten und Tumorzellen prominent vertreten. Es ist ein wesentlicher Mediator beim aktivierungsbedingten Tod von T-Lymphozyten, der die Immunreaktion beendet.
Technische Daten
Synonyme | FASLG-Rezeptor; CD95; APT1; FAS1; TNFRSF6; FAS; ALPS1A; APO1; FASTM; FasR |
Uniprot-Nr. | |
Quelle | Rekombinantes humanes Fas/TNFRSF6/CD95-Protein wird exprimiert von HEK293-Zellen mit His-Tag am C-Terminus. Es enthält Gln26-Asn173. |
Molekulargewicht | Das Protein hat ein geschätztes Molekulargewicht von 13,7 kDa. Aufgrund der Glykosylierung wandert das Protein basierend auf dem Tris-Bis-PAGE-Ergebnis auf 30–40 kDa. |
Aussehen | Sterilgefiltertes, weißes, gefriergetrocknetes Pulver. |
Reinheit | > 95 % bestimmt durch SDS-PAGE |
Aktivität | SPR Daten:Auf einem CM5-Chip immobilisiertes menschliches Fas, His-Tag kann an menschliches Fas-Ligand, His-Tag, mit einer Affinitätskonstante von 19,45 nM binden, wie im SPR-Test ermittelt. |
Endotoxin | < 1.0 EU pro 1μg Die Protein durch Die LAL-Methode. |
Formulierung | Lyophilisiert ab 0,22 μm gefilterte Lösung in PBS (pH 7,4). Normalerweise Vor der Gefriertrocknung werden 5 % Trehalose als Schutzmittel hinzugefügt. |
Rekonstitution | Zentrifugieren Sie die Röhrchen vor dem Öffnen. Rekonstituieren auf eine Konzentration von mehr als 100 μg/mL wird empfohlen (normalerweise verwenden wir 1 mg/ml Lösung zur Gefriertrocknung). Das gefriergetrocknete Protein in destilliertem Wasser auflösen. |
Lagerung
Mit Kühlakkus transportiert. Bei -20 °C bis -80 °C lagern, ein Jahr haltbar.
Nach der Rekonstitution ungeöffnet 3 bis 6 Monate bei -20 bis -80 °C lagern. Nach der Rekonstitution 2 bis 7 Tage bei 2 bis 8 °C lagern.。
Es wird empfohlen, in Aliquots aufzubewahren und für den ersten Gebrauch einzufrieren, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden.
Notiz
1. Vermeiden Sie wiederholtes Einfrieren und Auftauen.
2. Tragen Sie zu Ihrer Sicherheit und Gesundheit bei der Arbeit einen Laborkittel und Einweghandschuhe.
3. Dieses Produkt ist nur für wissenschaftliche Forschungszwecke bestimmt.
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