Descripción general

La coelenterazina es una fluoresceína natural que abunda en la naturaleza y es la molécula de almacenamiento de energía luminosa de la mayoría de los organismos luminiscentes marinos (más del 75%). La coelenterazina se puede utilizar como sustrato para muchas enzimas luciferasas, como la luciferasa de riñón marino (Rluc), la luciferasa secretada por Gaussia (Gluc) y las fotoproteínas, incluidas la aequorina y la obelia. A diferencia del sistema luciferina/luciferasa de la luciérnaga, el sistema coelenterazina/luciferasa no requiere trifosfato de adenosina (ATP), lo que facilita el estudio de la biofluorescencia in vivo. Por lo tanto, la coelenterazina se utiliza comúnmente como sustrato luminiscente para ensayos de fluorescencia basados ​​en ensayos de genes reporteros y ensayos con animales vivos.

La principal coelenterazina comercial que se utiliza actualmente es la coelenterazina nativa. También se sintetizan muchos derivados de la coelenterazina, como la coelenterazina h, la coelenterazina 400a, la coelenterazina cp, la coelenterazina f, la coelenterazina hcp y la coelenterazina n. En teoría, estas coelenterazinas se pueden utilizar en los mismos experimentos, pero debido a sus diferencias en longitud de onda luminosa, permeabilidad de la membrana celular y eficiencia cuántica de la luz, muestran diferentes efectos experimentales en la misma aplicación.

Especies de coelenterazina

Coelenterazina nativa

También conocido como ácido libre de coelenterazina, es el sustrato de muchas enzimas luciferasas, como la luciferasa de Renilla (Rluc) y la luciferasa de Gaussia (Gluc), y también es el cofactor de la proteína luminiscente de las medusas.

Escenarios de aplicación: Detección de concentración de iones calcio en células vivas, análisis de informes genéticos, estudio BRET (transferencia de energía por resonancia bioluminiscente), detección ELISA, HTS y quimioluminiscencia de niveles de ROS en tejidos o células, etc.

Coelenterazina h

Es el sustrato de muchas enzimas luciferasas como la luciferasa de Renilla (Rluc) y la luciferasa de Gaussia (Gluc), y también es el cofactor de la proteína luminiscente de las medusas.

Escenario de aplicación: La intensidad luminosa es más de 10 veces mayor que la de Coelenterazine Native, lo que es adecuado para el análisis de genes reporteros y la detección de la concentración de iones de calcio en células vivas.

Coelenterazina hcp

Es uno de los derivados de la coelenterazina nativa. La intensidad de fluorescencia del complejo de coelenterazina hcp-aequorina es 190 veces mayor que la del complejo de coelenterazina nativa, con un alto rendimiento cuántico y una rápida absorción de Ca²⁺ velocidad de reacción, lo que es muy adecuado para la detección de niveles de iones de calcio.

Escenario de aplicación: Adecuado para la detección del nivel de iones de calcio.

Coelenterazina 400a

También conocida como DeepBlue CTM, es uno de los derivados de la Coelenterazina Nativa. Es un buen sustrato para la luciferasa de Renilla (Rluc), y su longitud de onda de emisión es de aproximadamente 400 nm, por lo que tiene poca interferencia con la señal de la proteína receptora de GFP y no puede ser oxidada por la luciferasa secretada por Gaussia (Gluc).

Escenario de aplicación: Es el sustrato de coelenterazina preferido para la investigación BRET (transferencia de energía por resonancia bioluminiscente).

Coelenterazina f

Es el sustrato preferido para la aequorina, y la única diferencia estructural con la coelenterazina nativa es que el grupo hidroxilo en su grupo fenol R-1 está reemplazado por flúor (F).En comparación con el número total de fotones producidos por el complejo Coelenterazina Nativa-Apoaequorina, este complejo produce sólo el 80% de la energía del fotón. La ventaja es que se necesita muy poco tiempo para generar el complejo aequorina. Cuando entra en contacto con Ca²⁺Emite luz rápidamente y con alto rendimiento, con una intensidad de producción 20 veces mayor que la de Coelenterazina Nativa. Además, tiene buena permeabilidad celular.

Escenario de aplicación: Cuando el Ca es extremadamente alto²⁺ Se requiere sensibilidad de detección para estudiar experimentos de regeneración de proteínas de medusas, se recomienda el uso de sustratos.

Coelenterazina cp

Es un derivado de la Coelenterazina Nativa. El complejo fotoproteico formado con la proteína Apoaequorina es 15 veces más luminoso que la Coelenterazina Nativa y tiene una Ca más rápida²⁺ Velocidad de reacción.

Escenario de aplicación: Se puede utilizar para la detección de alto rendimiento de fármacos con receptores acoplados a proteína G (GPCR).

Coelenterazina n

Su intensidad de fluorescencia es más débil en todos los derivados de Coelenterazina y la velocidad de reacción a Ca²⁺ es significativamente menor que el de Coelenterazina Nativa.

Coelenterazina e

Un derivado de la coelenterazina nativa que estructuralmente tiene un grupo etilo más que la coelenterazina nativa. Como sustrato para la luciferasa de Renilla, su intensidad de fluorescencia es el 137 % de la de la coelenterazina nativa. La coelenterazina e tiene una alta reactividad in vitro de la proteína luminiscente de las medusas y picos de emisión duales (405 y 465), lo que permite la determinación de Ca²⁺ Concentración en el rango pCa5-7 por la relación de longitudes de onda duales. Este método es independiente de la concentración de coelenterazina, lo que mejora la precisión de detección. Debido a que la permeabilidad celular de este derivado es pobre, no tiene esta ventaja para experimentos relacionados con el intracelular.

Escenario de aplicación: Sustrato muy útil para Ca²⁺ Detección de baja sensibilidad.

Coelenterazina 2-metil

Es un poderoso antioxidante celular. Puede actuar eficazmente sobre las especies reactivas de oxígeno intracelulares, como el oxígeno singlete y los aniones superóxido, y el estrés oxidativo es un eslabón intermedio en el proceso de apoptosis. Además, el compuesto tiene las características de no toxicidad y permeabilidad de membrana, por lo que puede usarse para estudiar la apoptosis.

Aplicación del producto:

1) Como herramienta importante para estudiar la apoptosis;

2) También se puede utilizar para quimioluminiscencia para detectar los niveles de anión superóxido y anión peroxinitrito.

Nombre del producto	Peso molecular	Fórmula molecular	En (nm)	RLC*	Intensidad relativa	Tiempo de media subida (ms)**
Coelenterazina nativa	423.46		466	1.00	1	6-30
Coelenterazina h	407,48		466	0,75	16	6-30
Coelenterazina hcp	399,48		445	0,65	500	2-5
Coelenterazina cp	415,48		442	0,63	28	2-5
Coelenterazina f	425,46		472	0,80	20	6-30
Coelenterazina n	457,52		468	0,25	0,15	6-30
Coelenterazina e	449,5		405 y 465	0,5	4	0,15-0.3
2-metil coelenterazina	331.37		/	/	/	/
Coelenterazina 400 a	391,48		400	/	/	/

Información del producto

Nombre del producto	Número de catálogo	Presupuesto
D-luciferina, sal sódica	40901ES01/02/03/08	100 mg/500 mg/1 g/5 g
D-luciferina, sal de potasio	40902ES01/02/03/09	100 mg/500 mg/1 g/5 g
D-Luciferina Luciérnaga, Ácido libre	40903ES01/02/03	100 mg/500 mg/1 g
Coelenterazina nativa	40904ES02/03/08	1×500 μg/2×500 μg/5 mg
Coelenterazina 400a	40905ES02/03	1×500 μg/2×500 μg
Coelenterazina h	40906ES02/03/08	1×500 μg/2×500 μg/5 mg
Coelenterazina f	40908ES02/03	1×500 μg/2×500 μg

Literatura publicada por los usuarios (estadísticas incompletas)

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