La PCR cuantitativa fluorescente es un experimento de alta sensibilidad que requiere un alto grado de precisión en la operación por parte del personal de laboratorio. Por lo tanto, durante el proceso del experimento de qPCR, inevitablemente nos encontramos con problemas:
I. Cuestiones relacionadas con factores no experimentales
- El laboratorio tiene muchos proyectos de experimentos de qPCR y los instrumentos están ocupados, lo que deja las mezclas de reacción cuidadosamente preparadas sin un método de eliminación claro.
- Existen numerosas muestras cuantitativas, la tarea de agregar muestras es onerosa y existe el riesgo de errores en la adición de muestras debido a mareos, lo que conduce a resultados experimentales poco confiables.
- Los tiempos de funcionamiento de la máquina son prolongados, el número de ejecuciones experimentales es limitado y las tareas experimentales no pueden completarse según lo planeado de manera regular.
- Se están reemplazando los equipos de laboratorio por nuevos instrumentos, hay múltiples instrumentos cuantitativos en el laboratorio y los reactivos cuantitativos no son compatibles con los instrumentos.
II. Cuestiones limitadas por factores experimentales
Problemas de cuantificación con genes de baja abundancia. Diseño complejo de cebadores y procesos de selección, sensibilidad y reproducibilidad de pocillos replicados...
Como fabricante experimentado dedicado a la investigación y el desarrollo de reactivos qPCR, YEASEN ha desarrollado meticulosamente una solución de premezcla qPCR de alto rendimiento: Alto UNICON™ Mezcla maestra universal azul qPCR SYBR Green, que puede resolver los problemas experimentales antes mencionados de una sola vez. El ROX universal utilizado en este producto reemplaza al ROX tradicional, compensando las diferencias de trayectoria óptica en varias plataformas de instrumentos, lo que lo hace adecuado para todos los instrumentos de qPCR. Además, el producto emplea un método de modificación de anticuerpos e incluye aditivos que mejoran la amplificación genética, lo que mejora significativamente el rendimiento de amplificación del producto. Equilibra perfectamente las necesidades de alto rendimiento de los investigadores de la comunidad científica con los requisitos de alta eficiencia de las empresas industriales.
Características del producto
- Ancho instrumento compatibilidad: El premezcla contiene a específico tipo de referencia teñir, eliminando el necesidad a ajustar el ROX concentración.
- Fácil Rastreo: El azul premezcla permite para directo visualización a distinguir si el muestra tiene estado agregado, simplemente por observando el color.
- Alto Estabilidad: El sistema es preparado en habitación temperatura, y el mezclado sistema poder ser almacenado en 4°C para arriba a 24 horas sin cualquier cambiar en el prueba resultados.
- Rápido Configuración: Compatible con ambos estándar y rápido programas, Permitiendo el cuantitativo experimento a ser terminado en como rápido como 46 minutos.
- Excelente Amplificación Actuación: Alto amplificación eficiencia, bien especificidad, capaz de detector genes en el soltero Copiar número.
Información de pedidos
| Posicionamiento del producto | Nombre del producto | Gato# |
| Premezcla cuantitativa universal de alta sensibilidad | Mezcla maestra universal azul qPCR SYBR Green de Hieff UNICON™ | 11184ES |
| Seguimiento de color Alta sensibilidad Fluorescencia Cuantitativo Premezcla | 11188ES | |
| 11189ES | ||
| 11190ES |
Rendimiento del producto
1. Alta sensibilidad: capaz de detectar hasta una sola copia
Figura 1. Hieff UNICON™ La premezcla Universal Blue puede detectar eficazmente una cantidad de plantilla que varía en 7 órdenes de magnitud, con una alta eficiencia de amplificación y una buena relación lineal dentro de un amplio rango lineal. La plantilla utilizada fue 2 µL de plásmido con una concentración de 10^6 a 10^0 copias, que amplifica el gen IL23R humano.
2.El detección tasa y especificidad son bien: ampliamente aplicable a amplificadores con 30-70% GC contenido
Figura 2. Hieff UNICON™ La premezcla Universal Blue es ampliamente aplicable a amplicómeros con un contenido de GC del 30 al 70 %, lo que garantiza una tasa de detección de especificidad extremadamente alta. Utilizando 2 µL de ADNc 293T como plantilla, se diseñaron 1000 pares de cebadores para amplicómeros de 200 pb (contenido de GC del 30 % al 70 %) con el software Primer5, y 27 de estos amplicómeros se amplificaron aleatoriamente.
3. Alta resolución: puede distinguir con precisión las diferencias en la concentración de plantilla de 2 veces.
Figura 3. Alto UNICON™ Premezcla azul universal Puede distinguir con precisión las diferencias en la concentración de plantilla de 2 veces. La plantilla utilizada fue una dilución en gradiente de 2 veces de 2 µL de solución madre de ADNc 293T, que amplifica el gen GAPDH.
4.Buena reproducibilidad de pocillos duplicados: 90 pocillos duplicados
Figura 4. Hieff UNICON™ La premezcla Universal Blue muestra una excelente reproducibilidad, con curvas de amplificación de 90 pocillos duplicados que muestran una alta coincidencia y una desviación estándar de los valores de Ct de menos de 0,2. Utilizando 1 µL de ADNc 293T como plantilla, se amplificó el gen GAPDH.
5.Buena estabilidad: la premezcla no se ve afectada en el rendimiento de amplificación incluso después de ser congelada y descongelada 50 veces.
| Ciclos de congelación y descongelación | 0 tiempo | 10 veces | 30 veces | 50 veces |
| Ct promedio | 23.11 | 23.17 | 23.18 | 23.25 |
| ▲Ct | - | 0,06 | 0,07 | 0,14 |
Figura 5. Hieff UNICON™ La premezcla Universal Blue no muestra cambios en el rendimiento de amplificación después de congelarse y descongelarse 50 veces. Utilizando 1 µL de ADNc 293T como plantilla, se amplificó el gen C2orf68 con una premezcla que había sido sometida a diferentes cantidades de ciclos de congelación y descongelación.
Cliente Fretroalimentación
Fuente de muestra: línea celular de cáncer de ovario de ratón ID8, HM1
Fuente de muestra: ARN adiposo del epidídimo de ratón
Fuente de muestra: ARN de hoja de Arabidopsis thaliana
Literatura con alto factor de impacto publicada parcialmente utilizando YEASEN qPCR Mix
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