Aperçu
La coelentérazine est une fluorescéine naturelle abondante dans la nature et constitue la molécule de stockage de l'énergie lumineuse de la plupart des organismes marins luminescents (plus de 75 %). La coelentérazine peut être utilisée comme substrat pour de nombreuses enzymes luciférases, telles que la luciférase rénale marine (Rluc), la luciférase sécrétée par Gaussia (Gluc) et les photoprotéines, notamment l'aequorine et l'Obelia. Contrairement au système luciférine/luciférase de luciole, le système coelentérazine/luciférase ne nécessite pas d'adénosine triphosphate (ATP), ce qui facilite l'étude de la biofluorescence in vivo. Par conséquent, la coelentérazine est couramment utilisée comme substrat luminescent pour les tests de fluorescence basés sur des tests de gènes rapporteurs et les tests sur animaux vivants.
La principale coelentérazine commerciale actuellement utilisée est la coelentérazine native. Il existe également de nombreux dérivés de la coelentérazine tels que la coelentérazine h, la coelentérazine 400a, la coelentérazine cp, la coelentérazine f, la coelentérazine hcp, la coelentérazine n. Théoriquement, ces coelentérines peuvent être utilisées dans les mêmes expériences, mais en raison de leurs différences de longueur d'onde lumineuse, de perméabilité de la membrane cellulaire et d'efficacité quantique de la lumière, elles présentent des effets expérimentaux différents dans la même application.
Espèces de coelentérazine
Également connu sous le nom d'acide libre de coelentérazine, il est le substrat de nombreuses enzymes luciférases telles que la luciférase Renilla (Rluc) et la luciférase Gaussia (Gluc), et est également le cofacteur de la protéine luminescente des méduses.
Scénarios d'application : Détection de la concentration en ions calcium dans les cellules vivantes, analyse du rapport génétique, étude BRET (transfert d'énergie par résonance bioluminescente), détection ELISA, HTS et chimioluminescence des niveaux de ROS dans les tissus ou les cellules, etc.
C'est le substrat de nombreuses enzymes luciférases telles que la luciférase Renilla (Rluc) et la luciférase Gaussia (Gluc), et est également le cofacteur de la protéine luminescente des méduses.
Scénario d'application : L'intensité lumineuse est plus de 10 fois supérieure à celle de la coelentérazine native, ce qui convient à l'analyse des gènes rapporteurs et à la détection de la concentration en ions calcium dans les cellules vivantes.
Coelentérazine hcp
C'est l'un des dérivés de la coelentérazine native. L'intensité de fluorescence du complexe hcp-aequorine de coelentérazine est 190 fois supérieure à celle du complexe natif de coelentérazine, avec un rendement quantique élevé et une calcémie rapide2+ taux de réaction, ce qui est très approprié pour la détection des niveaux d'ions calcium.
Scénario d'application : Convient à la détection du niveau d'ions calcium.
Également connu sous le nom de DeepBlue CTM, il s'agit de l'un des dérivés de la coelentérazine native. C'est un bon substrat pour la luciférase de Renilla (Rluc), et sa longueur d'onde d'émission est d'environ 400 nm, ce qui interfère peu avec le signal de la protéine réceptrice GFP et ne peut pas être oxydé par la luciférase sécrétée par Gaussia (Gluc).
Scénario d'application : C'est le substrat de coelentérazine préféré pour la recherche BRET (transfert d'énergie par résonance bioluminescente).
C'est le substrat préféré de l'aequorine, et la seule différence structurelle avec la coelentérazine native est que le groupe hydroxyle de son groupe phénol R-1 est remplacé par du fluor (F).Comparé au nombre total de photons produits par le complexe Coelentérazine Native-Apoaequorine, ce complexe ne produit que 80 % de l'énergie des photons. L’avantage est qu’il faut très peu de temps pour générer le complexe d’aequorine. Lorsqu'il entre en contact avec Ca2+, il émet de la lumière rapidement et avec un rendement élevé, avec une intensité de production 20 fois supérieure à celle de la Coelentérazine Native. De plus, il présente une bonne perméabilité cellulaire.
Scénario d'application : Lorsque le Ca est extrêmement élevé2+ une sensibilité de détection est nécessaire pour étudier les expériences de régénération des protéines des méduses, l'utilisation de substrats est recommandée.
Cœlenterazine cp
Il s'agit d'un dérivé de la Coelentérazine Native. Le complexe photoprotéique formé avec la protéine Apoaequorine est 15 fois plus lumineux que la Coelentérazine Native et a une calcémie plus rapide2+ taux de réaction.
Scénario d'application : Il peut être utilisé pour le criblage à haut débit des médicaments à base de récepteurs couplés aux protéines G (GPCR).
Cœlentérazine n
Son intensité de fluorescence est plus faible dans tous les dérivés de la cœlentérazine et la vitesse de réaction au Ca2+ est significativement inférieure à celle de la coelentérazine native.
Coelentérazine e
Dérivé de la coelentérazine native qui est structurellement un groupe éthyle de plus que la coelentérazine native. En tant que substrat de la luciférase de Renilla, son intensité de fluorescence est de 137 % de celle de la coelentérazine native. La coelentérazine e présente une forte réactivité in vitro de la protéine luminescente des méduses et des pics d'émission doubles (405 et 465), ce qui permet la détermination du Ca2+ concentration dans la gamme pCa5-7 par le rapport des longueurs d'onde doubles. Cette méthode est indépendante de la concentration en coelentérazine, améliorant ainsi la précision de détection. Comme la perméabilité cellulaire de ce dérivé est faible, il ne présente pas cet avantage pour les expériences intracellulaires.
Scénario d'application : Substrat très utile pour le Ca2+ détection de faible sensibilité.
Coelentérazine 2-méthyle
C'est un puissant antioxydant cellulaire. Il peut agir efficacement sur les espèces réactives de l'oxygène intracellulaires, telles que l'oxygène singulet et les anions superoxydes, et le stress oxydatif est un lien intermédiaire dans le processus d'apoptose. De plus, le composé présente les caractéristiques de non-toxicité et de perméabilité membranaire, il peut donc être utilisé pour étudier l'apoptose.
Application du produit :
1) En tant qu’outil important pour étudier l’apoptose ;
2) Il peut également être utilisé pour la chimioluminescence afin de détecter les niveaux d'anions superoxyde et d'anions peroxynitrite.
| Nom du produit | Poids moléculaire | Formule moléculaire | En (nm) | RLC* | Intensité relative | Temps de montée à mi-hauteur (ms)** |
| 423.46 |
| 466 | 1,00 | 1 | 6-30 | |
| 407,48 |
| 466 | 0,75 | 16 | 6-30 | |
| Coelentérazine hcp | 399,48 |
| 445 | 0,65 | 500 | 2-5 |
| Cœlenterazine cp | 415,48 |
| 442 | 0,63 | 28 | 2-5 |
| 425,46 |
| 472 | 0,80 | 20 | 6-30 | |
| Cœlentérazine n | 457,52 |
| 468 | 0,25 | 0,15 | 6-30 |
| Coelentérazine e | 449,5 |
| 405 et 465 | 0,5 | 4 | 0,15-0.3 |
| 2-méthyl cœlentérazine | 331,37 |
| / | / | / | / |
| 391,48 |
| 400 | / | / | / |
Informations sur le produit
| Nom du produit | Numéro de catalogue | Caractéristiques |
| 40901ES01/02/03/08 | 100 mg/500 mg/1 g/5 g | |
| 40902ES01/02/03/09 | 100 mg/500 mg/1 g/5 g | |
| 40903ES01/02/03 | 100 mg/500 mg/1 g | |
| 40904ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5 mg | |
| 40905ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg | |
| 40906ES02/03/08 | 1×500 μg/2×500 μg/5 mg | |
| 40908ES02/03 | 1×500 μg/2×500 μg |
Littérature publiée par les utilisateurs (statistiques incomplètes)
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- Haifeng Zheng, Xinan Wang, Si Chen, Xiaorui Shi, Jinrong Xie, Wenjie Mao, Jie Tian et Fu Wang. Bioimagerie fonctionnelle en temps réel de la dynamique des microARN spécifiques aux neurones lors de la différenciation neuronale à l'aide d'un double rapporteur luciférase. ACS Chem. Neurosci.DOI : 10.1021/acschemneuro.8b00614