L'outil de recherche circulaire de l'ARN -Rnase R

L'outil de recherche de l'ARN circulaire - RNAse R

—— Accélérer le développement de médicaments à base d’ARN circulaire

Ces dernières années, les vaccins/médicaments à ARNm sont progressivement entrés dans la vision du public. Les vaccins/médicaments à ARNm présentent les avantages d'une conception rapide, d'un faible coût et d'une production facile, mais comme l'ARNm lui-même est facile à dégrader, on améliore actuellement principalement la stabilité de la préparation d'ARNm en ajoutant un chapeau et une queue, et en aidant à la traduction de l'ARNm. Ces dernières années, les chercheurs ont découvert un nouveau type d'ARN - l'ARN circulaire (ARN circulaire, circRNA). Ces ARN ont une structure en anneau fermé covalent, qui n'est pas facile à dégrader. Par rapport à l'ARNm, l'ARN circulaire est plus stable et peut réaliser une traduction non dépendante du chapeau. Par conséquent, la découverte de l'ARN circulaire offre des possibilités de développement d'une nouvelle génération de vaccins et de médicaments à ARN plus simples et plus stables.

Figure 1 : Le processus de fabrication du vaccin à ARN 1

Le processus de production du CIRCRNA comprend : la préparation du modèle, la transcription in vitro, l'élimination du modèle d'ADN, la circularisation et la purification. Une fois l'ARN circularisé, il est nécessaire d'utiliser la ribonucléase R (Ribonuclease R, RNASE R) pour digérer l'ARN non encapsulé afin d'atteindre l'objectif d'enrichissement du CirCRNA. Yeasen dispose d'une plate-forme d'ingénierie enzymatique moléculaire et d'évolution rationnelle. Cela garantit en même temps la qualité du produit. L'équipe de recherche et développement de Yeasen a développé avec succès des enzymes RNASE R de haute pureté et de haute activité.

ARNASE R (CAT#14606ES) est une exonucléase d'acide ribonucléique 3'→5' dépendante de Mg2+ qui est dérivée d'E. coli. Elle peut digérer tous les ARN linéaires et ne digère pas le CirCRNA, l'ARN lariat. Elle est souvent utilisée pour éliminer les molécules d'ARN linéaires et réaliser l'objectif d'enrichissement de l'ARN non linéaire tel que le CirCRNA et l'ARN lariat.

Caractéristiques

Pureté des protéines (SDS-PAGE) ≥ 95 %

Figure 2 : Détection de la pureté des protéines : Différents volumes (1 μL, 2 μL, 3 μL) du produit (Cat#14606ES) présentent une pureté élevée ≥ 95 %.

Aucun résidu exonucléase

Figure 3 : 20 U de RNASE R ont été ajoutés à 0,5 μg de λDNA-Hind III Digest, incubés à 37 ℃ pendant 4 heures. Le résultat montre qu'aucun résidu l'exonucléase a été détectée à partir des produits RNASE R (CAT#14606ES).

Capacité de digestion de l'ARN linéaire et ARNcirc

Figure 4 : La RNASE R (CAT#14606ES) peut digérer des molécules d'ARN linéaires
Figure 5 : CircRNA peut tolérer le traitement de la RNASE R (CAT#14606ES).

Produit

Chat

Taille

ARNase R (20U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNase R (qualité GMP, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

ARN polymérase T7 de qualité GMP (250 U/μL)

10625ES

10 KU/100 KU/2500 KU
ARN polymérase CleaScrip™ T7 (faible teneur en ARNdb, 250 U/μL) 10628ES 10 KU/100 KU/2500 KU

Référence

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y et al. Vaccins circulaires à ARN contre le SRAS-CoV-2 et les variantes émergentes. Cellule.2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H, et al. La boîte à outils bioinformatique pour la découverte et l'analyse de circRNA. Bref Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

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