Scénarios d'application de produits

1. Élimination des acides nucléiques résiduels dans les produits biologiques : lors de la production de produits biologiques, tels que les virus, les vaccins et les protéines, l'UltraNuclease peut être ajoutée pour dégrader les acides nucléiques résiduels. Cette étape permet non seulement d'augmenter le rendement des virus, mais également de réduire considérablement la teneur en acides nucléiques résiduels, garantissant ainsi la sécurité et l'efficacité des médicaments.
2. Réduction de la viscosité : En dégradant les acides nucléiques, la viscosité des lysats cellulaires est réduite, ce qui facilite les processus de filtration/ultrafiltration lors de la purification de particules dérivées de cellules telles que les virus, les vecteurs AAV et les corps d'inclusion.
3. Résolution et récupération améliorées : dans les analyses ELISA, électrophorèse bidimensionnelle et immunoblot, il améliore la résolution et la récupération.
4. Prévention de l’agrégation cellulaire : UltraNuclease peut prévenir efficacement l’agrégation des cellules mononucléaires du sang périphérique humain (PBMC).

L'effet des différentes conditions de réaction sur l'activité enzymatique

Pour explorer les conditions de fonctionnement optimales de l’UltraNuclease, nous avons étudié les effets de divers systèmes tampons sur l’activité enzymatique.

Analyse comparative des produits concurrents (d'une entreprise A)

Les performances de l’UltraNuclease sont cohérentes avec celles de la société A et peuvent produire un effet de remplacement.

La norme d'inspection de qualité est conforme à la norme de production GMP

Éléments de détection	Normes de qualité	Méthode de détection
Activité enzymatique	250-300 UI/uL	Méthode du substrat universel
Activité spécifique	≥1.5×106 U/mg	Méthode du substrat universel
Pureté des protéines	≥ 99%	SDS-PAGE
Protéase	Répond aux exigences	Méthode du substrat universel
Endotoxine bactérienne	Répond aux exigences	Méthode du gel
Protéine hôte	Négatif	Méthode ELISA
ADN de l'hôte	Négatif	Méthode qPCR
Tests stériles	Croissance stérile	Règle générale 1101
Détection des agents pathogènes	Négatif (non détecté)	Se référer à la méthode interne
Test de détection des mycoplasmes	Négatif (non détecté)	Se référer à la méthode interne
Test de métaux lourds	Répond aux exigences	Règle générale 0821

Pour correspondre à l'utilisation d'UltraNuclease, Yeasen a également développé de manière indépendante un kit de détection spécifique pour l'UltraNuclease, qui peut détecter efficacement l'enzyme résiduelle et réduire les risques. Le kit de détection résiduelle Yeasen UltraNuclease a été développé en référence aux directives de validation des méthodes analytiques de la pharmacopée chinoise 2020 <9101> et respecte strictement les exigences clés des tests multiparamétriques (plage linéaire, spécificité, exactitude, précision, sensibilité, stabilité accélérée, etc.).

Détection d'ultranucléases résiduelles

Lors des étapes de purification normales, l'UltraNuclease est facilement éliminée sous forme d'impuretés. Afin de détecter la quantité résiduelle spécifique d'UltraNuclease omnipotente, elle est souvent utilisée comme produit standard dans l'industrie et un kit ELISA correspondant est développé.

L'UCF.ME® UltraNuclease Le kit ELISA développé indépendamment par Yeasen adopte le principe du test immuno-enzymatique sandwich à double anticorps (ELISA sandwich), qui permet de détecter avec précision la quantité résiduelle d'UltraNuclease dans les échantillons. Le kit est stable en termes de linéarité, de répétabilité, de taux de récupération et de spécificité.

Principe du kit ELISA Yeasen UltraNuclease (dosage immunoenzymatique à deux sites)

Caractéristiques du produit :

Conformité réglementaire : Entièrement validé selon les exigences réglementaires, des rapports de validation sont disponibles ; Assurance qualité : Toutes les matières premières du kit sont développées indépendamment, garantissant ainsi le contrôle qualité ;

Haute sensibilité : limite quantitative aussi basse que 23.5 pg/ml;

Haute précision : répétabilité intra-lot élevée et faible variabilité inter-lot ;

Forte spécificité : aucune réactivité croisée avec d'autres protéines cellulaires modifiées

Paramètres de performance :

Paramètres du produit	contenu
Temps d'analyse	3,5 heures
Principe de l'essai	Dosage immunoenzymatique à deux sites
Amplification du signal	Système biotine-streptavidine
Longueur d'onde de détection	450 nm et 630 nm
Sensibilité	23,5 pg/ml
Plage de détection	0,047 à 3 ng/ml
Objet de détection	UltraNuclease
Instrument applicable	Dispositifs moléculaires : Séries M et i
Application	Détection d'UltraNuclease résiduelle dans les processus de purification de thérapie cellulaire et génique et de vaccins à virus adéno-associés recombinants

Données du produit :

Courbe standard du kit de réactifs :

Expérience réelle de récupération d'échantillons :

L'UltraNuclease a été ajouté à des solutions de lyse cellulaire de 5 μg/mL (HEK293, E.coli, CHO et Vero) de manière indépendante avec une concentration finale ajoutée de 1,5 ng/mL. La précision dans différents échantillons de cellules s'est avérée excellente par rapport aux autres fournisseurs.

Démonstration de spécificité

Conclusion : Le kit de test présente une spécificité élevée sans réaction croisée ; comparaisons par paires, « * » Différence significative par rapport à l'échantillon négatif ; « NS » Aucune différence significative par rapport à l’échantillon négatif.

Précision:

Répétabilité :

Concentration ng/mL	6 dates dupliquées dans la même plaque						Valeur CV
3	2.412	2.390	2.323	2.367	2.476	2.291	2,53%
1,5	1.780	1.883	1.884	1.908	1.876	1.883	2,19%
0,75	1.123	1.215	1.166	1.183	1.140	1.109	3,12%
0,375	0,691	0,706	0,708	0,722	0.722	0,679	2,21%
0,1875	0,449	0,462	0,453	0,460	0,447	0,433	2,13%
0,094	0,306	0,308	0,304	0,311	0,295	0,302	1,65%
0,047	0,242	0,241	0,240	0,241	0,256	0,240	2,37%
0	0,183	0,192	0,189	0,187	0,189	0,189	1,43%

Conclusion : 6 dupliqués ont été testés à chaque concentration sur la courbe standard, et tous les CV% étaient inférieurs à 5%.

Précision intermédiaire :

Précision intermédiaire
Concentration de l'échantillon	1,5 ng/mL	0,375 ng/mL	0,094 ng/mL
Analyste 1	1.388	0,382	0,079
Analyste 2	1.458	0,363	0,068
Analyste 3	1.318	0,37	0,063
Moyenne	1.388	0,372	0,07
SD	0,070	0,010	0,008
Valeur CV	5,04%	2,59%	11,69%

3 analystes ont mené l'expérience UCF.ME™ UltraNuclease ELISA et le CV% était inférieur à 15 %

Informations sur le produit :

Nom du produit	Produit nombre	Spécifications du produit
UCF.ME®UltraNuclease de qualité GMP (Benzonase)	20157ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Université de Californie à Flint.Kit ELISA ME® UltraNuclease	36701ES59	96T

Autres produits connexes

Nom du produit	Produit nombre	Spécifications du produit
Sel actif UltraNuclease de qualité GMP	20159ES25/50/60/80/90	25KU/50KU/100KU/1MU/5MU
Kit ELISA UltraNuclease actif au sel	36703ES96	96T