Yeasen Enzim mRNA dan Nukleotida Kelas GMP untuk pengembangan vaksin dan obat

Penelitian dan formulasi vaksin mRNA memerlukan beragam bahan baku untuk memastikan keberhasilan pengembangannya. Sebagai pelopor dalam industri enzim molekuler, Yeasen telah mencapai keberhasilan dalam menciptakan berbagai enzim dan reagen molekuler melalui bioteknologi enzim molekuler canggih dan teknik fermentasi serta pemurnian protein skala besar.

Untuk menjamin kualitas produk dan kapasitas produksi, Yeasen telah mendirikan fasilitas produksi tingkat GMP di Wuhan, yang mampu sepenuhnya memenuhi persyaratan produksi skala industri dengan kapasitas tahunan melebihi 5 miliar unit. Selain itu, Yeasen merupakan perusahaan Tiongkok pertama yang memperoleh sertifikasi ISO 13485 untuk penelitian, pengembangan, produksi, dan distribusi enzim molekuler. Sertifikasi ini menjamin kualitas, konsistensi, dan keterlacakan semua reagen mereka.

1. Keunggulan GMP
2. Yeasen dapat menyediakan Produk bermutu GMP
3. Yeasen Memperoleh Nomor DMF untuk Banyak Produk
4. Skenario aplikasi Yeasen Produk
5. Bahan baku untuk persiapan vaksin mRNA disediakan oleh Yeasen
6. Informasi Pemesanan

1. Keunggulan GMP

“GMP-grade” adalah istilah merek yang Yeasen digunakan untuk mendeskripsikan reagen yang diproduksi di fasilitas bersertifikat ISO 13485. YeasenReagen tingkat GMP diproduksi sesuai dengan standar sistem manajemen mutu ISO 13485 dan dengan kontrol proses yang lebih ketat serta catatan dokumentasi yang lengkap. Yeasen tidak hanya dapat menawarkan reagen berkualitas tinggi tetapi juga menyediakan dokumen, audit lokasi, dan dukungan lainnya kepada pelanggan kami.

Tabel 1. Keunggulan GMP

2. Yeasen dapat menyediakan Produk bermutu GMP

Memanfaatkan keahlian yang luas dan keunggulan teknis dalam pengembangan enzim dan produksi skala industri, Yeasen telah mendirikan fasilitas canggih yang dikenal sebagai "mRNAtools." Fasilitas ini, yang mencakup luas 50.000 kaki persegi, mematuhi peraturan GMP dan menawarkan fitur-fitur canggih, termasuk unit fermentasi otomatis 2×1500L, peralatan pemurnian skala besar, dan kemampuan liofilisasi. mRNAtools didedikasikan untuk memberikan reagen ketat yang selaras dengan persyaratan produksi dan peraturan pelanggan.

YeasenFasilitas produksi enzim molekuler, yang dibangun khusus untuk produk bermutu GMP, menjaga kualitas produk baik pada tingkat perangkat keras maupun perangkat lunak. Fasilitas ini terdiri dari tim yang sangat terampil yang terdiri dari 70 profesional, yang masing-masing memiliki pengalaman produksi GMP yang luas. Operasi pergudangan dan logistik dimodularisasi, memastikan penyimpanan yang aman dan transportasi produk yang efisien. Jaringan distribusi multipusat nasional semakin menjamin siklus pasokan yang andal.

3. Yeasen Memperoleh Nomor DMF untuk Banyak Produk

Berkas induk obat (DMF) adalah dokumen rahasia yang diserahkan secara sukarela kepada Badan Pengawas Obat dan Makanan AS (FDA). Berkas ini berisi informasi terperinci tentang fasilitas, proses, atau barang yang digunakan dalam produksi, pemrosesan, pengemasan, dan penyimpanan produk obat untuk manusia.

FDA meneliti konten teknis DMF saat produsen bahan aktif farmasi (API) merujuknya untuk mendukung Investigational New Drug Application (IND), New Drug Application (NDA), Abbreviated New Drug Application (ANDA), atau Export Application. DMF memainkan peran penting dalam aplikasi ini.Ketika produsen mengajukan DMF untuk bahan tertentu, proses persetujuan FDA dapat dipercepat secara signifikan.

Yeasen memiliki berkas DMF yang dapat mempersingkat jadwal proyek. Jika diinginkan, Anda dapat meminta otorisasi referensi ke DMF kami untuk mendukung aplikasi FDA Anda. Untuk memulai otorisasi referensi DMF kami, mohon ajukan permintaan Surat Otorisasi ke Yeasen, meminta agar kami memberikan Surat Otorisasi DMF Khusus Pusat FDA.

4. Skenario aplikasi Yeasen Produk

4.1 Pembuatan Template

Linearisasi plasmid merupakan langkah yang sangat penting selama pembuatan templat ketika vektor plasmid digunakan sebagai templat transkripsi. Saat transkripsi berlanjut hingga akhir templat DNA, linearisasi plasmid memastikan bahwa transkrip RNA dengan panjang dan urutan yang ditentukan dihasilkan. Yeasen menyediakan berbagai enzim restriksi untuk memenuhi kebutuhan Anda. Kami sarankan untuk memilih enzim restriksi yang menghasilkan ujung tumpul atau tonjolan 5´.

4.2 Dalam tabung reaksi Transkripsi (IVT)

Transkripsi in vitro dipengaruhi oleh berbagai faktor. Enzim, penyangga, dan substrat yang dimodifikasi semuanya memiliki dampak besar pada efisiensi transkripsi.

Berdasarkan platform ZymeEditor, Yeasen Bioteknologi telah mengembangkan polimerase RNA T7 baru yang secara signifikan mengurangi pembentukan dsRNA selama proses transkripsi in vitro (IVT) (T7 RNA Polimerase, RNA ds rendah, 250 U/μL). Ini sangat menurunkan imunogenisitas mRNA dan, sampai batas tertentu, meningkatkan integritas mRNA. Perkembangan ini diharapkan memainkan peran penting dalam memajukan pengembangan vaksin mRNA dan obat kanker.

Dengan mengoptimalkan buffer dan menyesuaikan jenis garam substrat nukleotida, kami sangat meningkatkan efisiensi transkripsi dan mengurangi produksi dsRNA.

Gambar 2. Tris NTP dapat meningkatkan efisiensi lVT dan mengurangi produksi dsRNA

4.3 Pembatasan mRNA

Karena struktur tutup 5' mengurangi imunogenisitas dan dibutuhkan untuk penerjemahan mRNA yang efisien, penambahan struktur tutup pada ujung 5' mRNA yang dihasilkan oleh transkripsi adalah penting.

Gambar 3. Hasil deteksi laju kapitalisasi (deteksi LC-MS)

4.4 Pemurnian mRNA

Pemurnian merupakan langkah yang sangat diperlukan untuk memperoleh mRNA dengan kemurnian tinggi.

5. Bahan baku untuk persiapan vaksin mRNA disediakan oleh Yeasen

Saat ini, Yeasen dapat menyediakan satu set produk lengkap dalam proses produksi larutan stok mRNA. Produk-produk tersebut dikontrol secara ketat oleh produksi GMP dan sepenuhnya memenuhi persyaratan produksi vaksin mRNA.

Tabel 2.Bahan baku untuk persiapan vaksin mRNA disediakan oleh Yeasen

Persiapan template		Transkripsi in vitro
2× Campuran Master PCR Hieff Canace AdvanceFast dengan Ketepatan Tinggi	10164ES	Kit Sintesis RNA Hasil Tinggi T7	10623ES
Solusi Set dNTP	10122ES	Polimerase RNA T7	10625ES
Kit Kloning Universal Satu Langkah Hieff Clone	10922ES	Pirofosfatase, Anorganik Kelas GMP	10672ES
DNA Ligase T4 Emas	10300ES	Penghambat RNase murine kelas GMP	10621ES
BspQI mutu GMP	10664ES	DNAse saya	10611ES
Bsa saya kualitas GMP	10661ES	Solusi Set NTP	10133ES
RNAse R (20U/uL)	14615ES	Larutan natrium UTP semu bermutu GMP (100 mM)	10650ES
Xba aku	10662ES	Larutan natrium N1-Me-Pseudo UTP GMP-grade (100 mM)	10651ES
Penutupan		Pemurnian
Enzim Penutup Vaksin mRNA GMP-grade	10614ES	Pembersih RNA Hieff NGS™	12602ES
Tutup mRNA 2´-O-Metiltransferase Kelas GMP	10612ES	Rak Pemisah Magnetik	80460ES
S-adenosilmetionina (SAM) kelas GMP	10619ES	Kit ELISA RNA untai ganda (dsRNA)	36717ES
ARCA (Analog Anti Tutup Balik)	10681ES

6. Informasi Pemesanan

Berikut ini adalah produk representatif yang ditawarkan oleh YeasenUkuran tambahan tersedia.Produk kami sangat dioptimalkan untuk bekerja sama, guna membantu memastikan kinerja dan reproduktifitas yang unggul. Kami juga dapat menyediakan layanan yang disesuaikan. Jika Anda tertarik dengan produk yang tidak ditampilkan, hubungi kami dan kami akan bekerja sama dengan Anda untuk memenuhi kebutuhan Anda.

Tabel 3. Informasi Pemesanan

Mengenai membaca:

Reagen bermutu GMP untuk sintesis mRNA in vitro

DNase I dan Aplikasinya dalam Biomedis

Referensi:

[1] Chaudhary, N., Weissman, D., & Whitehead, KA (2021). Vaksin mRNA untuk penyakit menular: prinsip, pemberian dan penerapan klinis. Ulasan Nature. Penemuan obat, 20(11), 817–838.
[2] Vogel, AB et al. Vaksin RNA Amplifikasi Diri Memberikan Perlindungan Setara terhadap Influenza dengan Vaksin mRNA tetapi
pada Dosis yang Jauh Lebih Rendah. Terapi molekular: jurnal American Society of Gene Therapy 26, 446-455,
[3] Fuchs, AL, Neu, A. & Sprangers, R. Metode umum untuk produksi skala besar yang cepat dan hemat biaya dari 5'
RNA yang ditutup. RNA (New York, NY) 22, 1454-1466, doi:10.1261/rna.056614.116 (2016).
[4] Schmid, A.Pertimbangan untuk Memproduksi Vaksin mRNA untuk Uji Klinis. Metode dalam biologi molekuler (Clifton, NJ) 1499, 237-251,
[5] Banerji, A. et al. Vaksin mRNA untuk Mencegah Penyakit COVID-19 dan Reaksi Alergi yang Dilaporkan: Bukti Saat Ini dan Pendekatan yang Disarankan. Jurnal alergi dan imunologi klinis. Dalam praktik 9, 1423-1437,
[6] Richner, JM et al. Vaksin mRNA yang dimodifikasi melindungi terhadap infeksi virus Zika. Sel 168, 1114-1125.e1110,
[7] Corbett, KS et al. Desain vaksin mRNA SARS-CoV-2 dimungkinkan oleh prototipe kesiapan patogen. Nature 586,567-571,
[8] Corbett, KS et al. mRNA-1273 melindungi terhadap infeksi SARS-CoV-2 beta pada primata nonmanusia. Imunologi alam 22, 1306-1315,
[9] Keech, C. et al. Uji Coba Fase 1-2 Vaksin Nanopartikel Protein Spike Rekombinan SARS-CoV-2. Jurnal Kedokteran New England 383, 2320-2332,
[10] Kramps, T. & Elbers, K. Pendahuluan Vaksin RNA. Metode dalam biologi molekuler (Clifton, NJ) 1499, 1-11,
[11] Linares-Fernández, S., Lacroix, C., Exposito, JY & Verrier, B. Menyesuaikan Vaksin mRNA untuk Menyeimbangkan Respons Imun Bawaan/Adaptif. Tren dalam kedokteran molekuler 26, 311-323,