細胞トランスフェクション試薬は、真核細胞における遺伝子機能の研究と制御のための日常的な試薬となっています。トランスフェクション試薬は、遺伝子機能研究、遺伝子発現調節、突然変異分析、遺伝子治療、細胞治療、タンパク質生産、ワクチン生産に広く使用されています。では、トランスフェクションとは何でしょうか。また、実験に基づいてトランスフェクション試薬の種類をどのように選択すればよいのでしょうか。

トランスフェクションにはどのような種類がありますか?

Yeasenのトランスフェクション試薬の特徴

実験に基づいてトランスフェクション試薬の種類を選択するにはどうすればよいでしょうか?

応用事例

トランスフェクション条件の参考

よくある質問

読書について

トランスフェクションにはどのような種類がありますか?

トランスフェクション後に核酸が宿主細胞の染色体に組み込まれるかどうかによって、「一過性」（一過性トランスフェクション）と「安定」（安定トランスフェクション）に分けられます。異なるトランスフェクション方法のトランスフェクション効率、細胞毒性、正常な生理機能への影響、遺伝子発現レベルは異なります。次の表に、原理、用途、特徴を比較します。

表1 さまざまなトランスフェクション法の比較

Yeasenのトランスフェクション試薬の特徴

DNAトランスフェクション試薬とRNAトランスフェクション試薬については、Yeasen Biotechnologyは強力な研究開発および生産チームを擁し、処方を継続的に最適化し、生産プロセスを改善し、カチオン性リポソームとカチオン性ポリマーをベースにしたさまざまな製品を発売してきました。科学研究​​機関と企業は幅広い製品を提供しており、製品ラインはトランスフェクション試薬に関わるすべての分野をカバーしています。

• 高効率: 細胞株の一過性トランスフェクションまたは安定トランスフェクションに適しています。
• 低毒性: トランスフェクトされた細胞は生存能力を維持します。
• 幅広い適応性: 一般的な細胞とトランスフェクションが難しい初代細胞を包括的にカバーします。
• 操作が簡単: 血清が存在する培地に適しており、トランスフェクションの前後に培地を交換する必要はありません。
• コスト効率が高い: 経済的かつ実用的、高いトランスフェクション効率、低価格。

実験に基づいてトランスフェクション試薬の種類を選択するにはどうすればよいでしょうか?

トランスフェクション試薬の選択は、トランスフェクトされる物質、特定の細胞、操作の利便性などのさまざまな実験目的と実験内容に応じて選択する必要があります。

応用事例

Hieff Trans™ リポソームトランスフェクション試薬

Hieff Trans™ は滅菌液状で供給されます。通常、24 ウェル プレートのトランスフェクションでは、1 回あたり約 1.5 μL、1 mL の Hieff Trans™ で約 660 回のトランスフェクションが可能です。6 ウェル プレートでは、1 回あたり約 6 μL、1 mL の Hieff Trans™ で約 660 回のトランスフェクションが可能です。160 回のトランスフェクション。

詳細については、 Hieff Trans™ Lipofectamine試薬によるトランスフェクションの信頼性をご覧ください。

ポリエチレンイミン リニア (PEI) MW40000 (急速溶解)

PEI 40000は、分子量40,000の高電荷カチオン性ポリマーで、負に帯電した核酸分子と非常に容易に結合し、複合体を形成して複合体が細胞内に侵入することを可能にします。PEI 40000は、HEK293やCHOなどの細胞において、細胞毒性が低く、トランスフェクション効率が高く、遺伝子発現効率が高い一過性トランスフェクション試薬です。リニアPEIトランスフェクション試薬は、HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2、Hela細胞など、幅広い細胞株で検証されています。トランスフェクション効率は80%～90%と高くなっています。

詳細については、 「トランスフェクションの新しいお気に入り —— より効率的なトランスフェクション試薬、リニア PEI MW 40000」をご覧ください。

Hieff Trans™ in vitro siRNA/miRNAトランスフェクション試薬

この製品は、幅広い細胞株で 1 nM siRNA の 90% を超える発現効率を達成し、オフターゲット効果を回避できます。Hela、MCF-7、HepG2、CHO などの接着細胞を含むさまざまな細胞のトランスフェクションに適しており、トランスフェクションが難しい K562 または THP-1 細胞などの懸濁細胞株でも 80% のサイレンシング効率を達成できます。一部の初代細胞、初代ヒト線維芽細胞、初代ヒト肝細胞などを含め、80% のサイレンシング効率を達成できます。

トランスフェクション条件の参考

各製品の説明書以外にも、お客様はそれぞれの実験内容に応じて操作し、使用量にも差があります。製品使用後にお客様から報告されたin vitro細胞トランスフェクション条件に基づき、参考のために整理しました。

よくある質問

1 Hieff Trans™ リポソームトランスフェクション試薬

1.1 Q: 核酸トランスフェクション試薬複合体を調製する際に血清を存在させることはできますか?

A: 血清の存在はリポソームの形成に影響します。核酸トランスフェクション試薬複合体を調製する際は、無血清培地（通常は MEM 培地）の使用をお勧めします。

1.2 Q: Hieff Trans™ リポソーム核酸トランスフェクション試薬を使用する際に注意すべきことは何ですか?

答え:

1) 細胞をトランスフェクトする際、細胞密度は好ましくは80%〜95%であり、具体的な播種密度は細胞の状況に応じて決定される。

2) 高純度 DNA を使用すると、より高いトランスフェクション効率が得られます。

3) トランスフェクション複合体を調製する際には、DNA およびトランスフェクション試薬を無血清培地で希釈する必要があります。

4) トランスフェクション中に培地に抗生物質を添加することはできません。

5) 試薬は2～8℃で保管し、蓋を長時間繰り返し開けないように注意する。

6) 最大のトランスフェクション効率を得るために、初回使用時に DNA 濃度とカチオン性リポソーム試薬の数を最適化する必要があります。DNA とトランスフェクション試薬の比率は、通常 1:2 ～ 1:3 が推奨されます。

1.3 Q: トランスフェクション後に終了する必要がありますか?

A: 必要ありません。リポソーム複合体は 6 時間安定しています。トランスフェクション前に細胞培地を交換していない場合は、正常な細胞成長に必要な栄養素を確保するために、4 ～ 6 時間後に新しい培地に変更する必要があります。ただし、トランスフェクション前に培地を変更した場合は、リポソームトランスフェクション後に培地を変更する必要はありません。

1.4 Q: DNA と siRNA の同時トランスフェクションは可能ですか? 効果はどうですか?

A: はい、DNA と siRNA を共トランスフェクトすると、siRNA トランスフェクション効率はわずかに低下します。

1.5 Q: トランスフェクション試薬はレンチウイルスパッケージングのトランスフェクションに使用できますか?

A: レンチウイルスのパッケージングは​​可能です。

1.6 Q: Hieff Trans™ リポソーム核酸トランスフェクション試薬を使用して懸濁細胞をトランスフェクトでき​​ますか?

A: Hieff Trans™ リポソーム核酸トランスフェクション試薬は、浮遊細胞トランスフェクションに使用できます。詳細についてはプロトコルを参照してください。さらに、浮遊細胞専用のトランスフェクション試薬も導入しました (カタログ番号 40805、Hieff Trans™ 浮遊細胞フリーリポソームトランスフェクション試薬)

2 Hieff Trans™ in vitro siRNA/miRNAトランスフェクション試薬

2.1 Q: トランスフェクション後にトランスフェクション試薬を交換する必要がありますか?

A: この問題は 2 つのケースに分けられます: 1. トランスフェクション前に培地交換を行わない場合、細胞の成長に必要な栄養素を確保するために、トランスフェクション後約 6 時間で培地を交換する必要があります。2. トランスフェクション前に培地交換を行う場合は、培養細胞の通常の操作に従って操作できますか? ? 液体交換操作後?

2.2 Q: トランスフェクション試薬は凍結できますか?

A: トランスフェクション試薬は PEI カチオントランスフェクション試薬であるため、凍結できません。低温で凍結すると、PEI トランスフェクション試薬の活性が破壊されます。したがって、最良のトランスフェクション効率を維持するには、2 ～ 8 °C で保管するのが最適です。

製品情報

当社の製品を使用して公開された記事の一部

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読書について

トランスフェクション試薬 – Hieff Trans™ および PEI

より効率的なトランスフェクション試薬であるリニアPEI MW 40000