説明
T7 RNA ポリメラーゼは、T7 プロモーター配列 (5'-TAATACGACTCACTATAG*-3') を含む二本鎖 DNA をテンプレートとして使用し、NTP を基質として使用して、プロモーターの下流の DNA の逆鎖に相補的な RNA を合成します。平滑末端または 5' オーバーハングを持つ線状二本鎖 DNA はどちらも T7 RNA ポリメラーゼのテンプレート基質として使用できます。つまり、線状化プラスミドまたは PCR 産物は、in vitro RNA 合成のテンプレートとして使用できます。
このキットは、サンドイッチ酵素結合免疫吸着測定法 (ELISA) の原理を使用して、残留 T7 RNA ポリメラーゼを検出します。T7 RNA ポリメラーゼ標準およびテストサンプルを、抗 T7 RNA ポリメラーゼ抗体 (36705-A) でプレコートしたマイクロプレートウェルに加えます。次に、希釈したビオチン標識 T7 RNA ポリメラーゼ検出抗体 (36705-C) を加え、続いてストレプトアビジン-HRP (SA-HRP) (36705-D) を加え、抗体 + 抗原 + 抗体-ビオチン + SA-HRP 複合体を形成します。洗浄後、発色のために TMB 基質 (36705-H) を加えます。TMB は HRP によって触媒され、停止液 (36705-I) を加えると無色から青に、そして最終的に黄色に変化します。黄色の強度は、サンプルで検出された T7 RNA ポリメラーゼの量と正の相関関係にあります。
コンポーネント
|
いいえ。 |
名前 |
36705ES48 |
36705ES96 |
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36705-A |
抗T7 RNAポリメラーゼコーティングマイクロタイターストリップ |
48 T |
96 トン |
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36705-B* |
標準: T7 RNAポリメラーゼ |
1 バイアル |
2 バイアル |
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36705-C |
検出 抗体：ビオチン結合 抗体 |
60 μL |
120 μL |
|
36705-D |
ストレプトアビジン-HRP |
30μL |
60 μL |
|
36705-E |
希釈バッファー1 |
25 ミリリットル |
45 ミリリットル |
|
36705-F |
洗浄バッファー濃度（20×） |
25 ミリリットル |
50 ミリリットル |
|
36705-G |
希釈バッファー2 |
15 ミリリットル |
30 ミリリットル |
|
36705-H |
TMB基質 |
8 ミリリットル |
15 ミリリットル |
|
36705-I |
停止ソリューション |
5 ミリリットル |
10 ミリリットル |
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36705-J |
プレートシーラー |
各3個 |
5個ずつ |
*標準品36705-Bは凍結乾燥粉末です。
T7 RNA ポリメラーゼと互換性があります: 10625、10628、10629 。
検証データ
表 1. 直線性範囲: 1～32 ng/mL 、 R2=0.999 、 CV≤5%。
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標準 |
濃度（ ng/mL） |
平均（ ng/mL） |
回復（ ％） |
CV% |
|
標準1 |
32 |
31.965 |
99.9% |
2.2% |
|
スタンダード2 |
16 |
16.070 |
100.5% |
5.0% |
|
スタンダード3 |
8 |
7.812 |
97.7% |
2.1% |
|
スタンダード4 |
4 |
4.192 |
104.8% |
0.8% |
|
スタンダード5 |
2 |
2.020 |
101.8% |
3.5% |
|
6年生 |
1 |
1.173 |
117.3% |
0.0% |
|
ノースカロライナ |
0 |
/ |
/ |
/ |
表2. 高い特異性
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タンパク質名 |
濃度 |
検出されたか否か |
|
ポジティブコントロール |
1 ng/mL |
検出された |
|
ネガティブコントロール |
0 ng/mL |
と |
|
ウルトラヌクレアーゼ |
10μg /mL |
と |
|
塩 アクティブウルトラヌクレアーゼ |
10μg /mL |
と |
|
DNアーゼ 私 |
10μg /mL |
と |
|
マウスRNase阻害剤 |
10μg /mL |
と |
|
ワクシニアキャッピング酵素 |
10μg /mL |
と |
|
無機ピロホスファターゼ |
10μg /mL |
と |
|
mRNA キャップ 2 ´-O-メチルトランスフェラーゼ |
10μg /mL |
と |
|
1%BSA |
10mg / mL |
と |
表 3. LOQ:この製品の定量限界は、標準曲線の最低濃度点を希釈することによって決定されます。最低濃度での変動係数 (CV) は 20% 未満です。これが定量限界として定義され、1 ng/mL になります。
|
標準td6理論値( ng/mL ) |
標準 6 検査平均値( ng/mL ) |
テストの繰り返し |
CV% |
回復 |
|
1 |
0.858 |
24 |
12.6% |
85.8% |
表 4. LOD:この製品の検出限界は、陰性対照 (NC) の平均検出値に対応する標準濃度に標準偏差の 2 倍を加えた値として定義されます。24 個の NC 標準を測定し、平均と標準偏差を計算すると、検出限界は 0.318 ng/mL と判定されます。
|
平均値（OD） |
SD（外径） |
平均値+2SD（OD） |
平均値+2SD （ng/mL） |
|
0.0527 |
0.0038 |
0.0604 |
0.3176 |
配送と保管
2～8℃で保存してください。未開封の場合は1年間、開封後は6ヶ月間保存できます。
商品を受領したら、すべての構成部品が揃っているかどうかを確認し、対応する保管温度ですぐに保管してください。
支払いとセキュリティ
お支払い情報は安全に処理されます。 クレジットカードの詳細を保存したり、クレジットカード情報にアクセスすることはありません
問い合わせ
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よくある質問
この製品は研究目的のみに使用され、人間や動物の治療や診断に使用することを意図したものではありません。製品とコンテンツは、
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