제품 소개
콜라게나제는 Pro-X-Gly-Pro 서열(콜라겐에 자주 나타나며 다른 단백질에서는 거의 발견되지 않음)을 특이적으로 인식하고, 이 서열에서 중성 아미노산(X)과 글리신(Gly) 사이의 펩타이드 결합을 절단하고, 결합 조직의 콜라겐을 가수분해할 수 있는 엔도뉴클레아제의 한 종류입니다.
많은 프로테아제가 단일 가닥 및 변성된 콜라겐 펩타이드를 가수분해할 수 있지만, 콜라게나아제는 3가닥 초나선 구조를 가진 천연 콜라겐 섬유를 분해할 수 있는 유일한 프로테아제로, 결합 조직에서 널리 발견되며, 그 중 가장 강력한 것은 혐기성 세균인 Clostridium histolyticum이 분비하는 "조" 콜라게나아제입니다.
예센 콜라겐 분해 효소는 클로스트리디움 히스톨리티쿰에서 추출한 효소로, 천연 콜라겐과 망상섬유를 분해할 수 있는 콜라겐 분해 효소뿐만 아니라 폴리사카리다제, 리파제 등 다른 프로테아제도 함유하고 있어 결합 조직과 상피 조직의 세포외 기질에 있는 다른 단백질, 폴리사카라이드, 지질을 효과적으로 가수분해할 수 있어 조직 소화에 더 적합한 "굵은" 추출물입니다.
현재 시중에 판매되는 박테리아성 콜라겐 분해효소는 콜라겐 분해효소의 활성 차이에 따라 크게 5가지 유형으로 나뉜다. 즉, 콜라겐 분해효소 I형, II형, III형, IV형, V형이다.
콜라겐 분해효소의 선택
제품 이름 |
모습 |
효소 활성 |
적용범위 |
1형 콜라겐 분해효소) |
갈색 또는 황갈색 결정성 분말 |
≥250 U/mg 고형물 |
상피, 폐, 지방 및 부신 조직 세포를 분리하는 데 사용되는 (콜라게나아제, 카제인아제, 클로스트리디움 및 트립신) 활성을 포함합니다. |
2형 콜라겐 분해효소) |
갈색 또는 황갈색 결정성 분말 |
≥125 U/mg 고형물 |
더 많은 클로스트리데이스 활성을 포함하고 있으며 간, 뼈, 갑상선, 심장 및 타액선 조직 세포의 분리에 적합합니다. |
3형 콜라겐 분해효소) |
갈색 또는 황갈색 결정성 분말 |
≥100 U/mg 고형물 |
소화조직의 접합부에 효과적인 낮은 단백질 분해 활성을 함유하고 있으며, 포유류 조직 세포의 분리에 자주 사용됩니다. |
4형 콜라겐 분해효소) |
갈색 또는 황갈색 결정성 분말 |
≥125 CDU/mg 고형분* |
트립신 활성이 낮으며 췌도와 수용체 무결성을 위한 세포 준비에 일반적으로 사용됩니다. |
5형 콜라겐 분해효소) |
갈색 또는 황갈색 결정성 분말 |
≥125 CDU/mg 고형분* |
췌장 섬 조직의 분리 및 결합 조직을 단일 세포로 분리하는 데 사용할 수 있는 최소 7가지 프로테아제 성분을 함유합니다. |
*CDU = 콜라겐 소화 단위
제품 특징
- 높은 소화 효율: Clostridium histolyticum의 조효소 추출물은 조직에 대한 높은 소화 효율을 나타냅니다.
- 활성제에 의존함: 콜라겐 분해 효소는 Ca 2+ , Zn 2+ 와 같은 2가 양이온과 같은 활성화 효소의 활동에 의존해야 합니다.
- 저해제의 영향: 콜라겐 분해 효소 저해제로는 EDTA, EGTA 등이 있으며, 두 번째는 중금속 이온(Hg 2+ , Pb 2+ , Cd 2+ )이다. 또한 시스테인, 히스티딘, DTT, 2-머캅토에탄올, o-페난트롤린 등과 같은 일부 화학 물질도 콜라겐 분해 효소에 저해 효과를 미친다.
- 강력한 간섭 저항성: 콜라겐은 세포 배양에 사용된 혈청의 영향을 받지 않습니다.
사용상의 주의사항
- 사용 방법: Hank's, Earle's 또는 기타 균형 소금 용액에 녹입니다. 권장 작업 농도는 0.05% ~0.5%(w/v)입니다.
- 보관 온도 : 2-8°C
- 사용 제안:
(1) 콜라겐 구조와 생합성 연구를 위해 더 높은 순도의 콜라겐 분해 효소 제제가 종종 사용되며 다른 단백질 분해 활동은 사용되지 않습니다.
(2) 조직 분리를 위해 엘라스타제, 트립신 또는 파파인과 같은 조 콜라겐 분해 효소 제제가 종종 사용됩니다.
자주 묻는 질문
- 실험 중 소화 불량
(1) 효소 활성이 약하거나 칼슘이온이 부족한 경우에 발생하는 경우, 콜라겐 분해 효소는 저온, 건조조건에서 보관하고, 콜라겐 분해 효소 용액은 분주 후 동결시킨다.
(2) 칼슘이온이 부족한 경우에 발생하는 경우 콜라겐 분해효소 용액의 칼슘이온 농도는 5mM이 되어야 한다.
- 사용 중 세포 사망이 발생합니다.
(1) 프로테아제가 과잉으로 존재하는 경우 프로테아제 접촉시간을 줄이거나 알부민이나 불활성화혈청을 첨가한다.
(2) pH가 변화하는 경우 완충액(예: HBSS)을 사용해야 합니다. pH를 자주 확인하고 재조정하십시오.
(3) 산소가 부족할 경우 소화액은 멸균공기로 환기되어야 한다.
- 실험 중 세포가 손상되었습니다
프로테아제가 너무 많아서 생기는 경우 프로테아제 양을 줄이거나 알부민이나 불활성화된 혈청을 첨가해야 한다.
주문하기
카탈로그 번호 |
제품 이름 |
크기 |
40507ES60 |
콜라게나제 I |
100mg,1g |
40508ES60 |
콜라게나제 II |
100mg,1g |
40509ES60 |
콜라게나제 III |
100mg |
40510ES60 |
콜라게나제 IV |
100mg,1g |
40511ES60 |
콜라게나제 V |
100mg |
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