세포배양 과정에서는 세포소화가 흔히 요구되므로, 세포소화에 사용되는 트립신은 세포배양에 없어서는 안될 중요한 물질로, 세포의 성장상태에 영향을 미친다.

트립신은 대체로 두 가지 유형으로 나눌 수 있는데, 하나는 재조합 트립신이고 다른 하나는 비재조합 트립신이다.

• 비재조합 트립신은 동물성 추출물에서 유래한 것으로, 동물성 기원이며, 일반적으로 동물의 소화계에서 발견되는 트립신의 전통적인 사용법이기도 하며 소나 돼지의 췌장 조직에서 직접 추출합니다.
• 재조합 트립신은 유전적 재조합 기술을 사용하여 생산되며 동물성 원료가 아닙니다.

제품소개 및 적용

비재조합 트립신(동물 유래)

제품 특징：

비재조합 트립신(트립신이라고도 함)은 소, 양, 돼지의 췌장에서 추출한 세린 단백질 분해 효소로, 양전하를 띤 라이신과 아르기닌의 카르복실 말단을 특이적으로 절단할 수 있으며, 다중 결정화를 통해 정제한 후, 크로마토그래피와 한외여과 기술을 통해 추가로 제조하며, 동물성입니다.

췌장 효소는 카데린, 인테그린 등과 같은 세포외 기질의 막 단백질 및 단백질에 작용할 수 있기 때문에 현재 조직 및 단층 세포를 분리하는 데 일반적으로 사용됩니다. 트립신은 세포 간의 단백질 분해를 가수분해하여 분리된 세포로 만들 수 있지만, 다른 조직이나 세포의 트립신에 대한 반응은 다르며 분산된 세포의 활성은 트립신 농도, 반응 온도 및 시간과도 관련이 있으며 트립신이 세포를 분산시키는 능력은 pH 7-9, 온도 37°C 조건에서 가장 강합니다. 트립신 용액에 EDTA를 킬레이트제로 첨가하면 칼슘과 마그네슘이 6개 치아 구조로 결합되어 세포 간 접착력을 약화시키고 트립신이 가수분해된 표적 펩타이드 결합을 획득하는 것을 향상시킬 수 있습니다.

생물제약 분야에서 초기 트립신의 주요 응용 분야는 인슐린 생산이었고, 곧 다른 세포 배양 분야에서도 사용되었습니다. 동물 췌장 효소는 혈청 배양에 일반적으로 사용되며, 다른 세포에 첨가되는 트립신의 구성과 농도는 다릅니다.

응용 프로그램

1. 인슐린과 불활성화 백신 생산
2. 조직세포의 분리 및 배양
3. 임상 및 수술적 사용
4. 식품 산업의 가공 보조제

재조합 트립신(동물성 유래 불포함)

제품 특징

재조합 트립신은 유전자 조작 기술을 사용하여 생산된 효소로, 안정성이 좋고 순도가 높으며 동물성 유래가 없다는 장점이 있습니다. 현대 생물약품의 생산 과정에서 동물성 유래 원료를 사용하면 광우병, 구제역 바이러스 등과 같이 동물성 질병을 일으키는 잠재적인 바이러스 출처를 제품에 가져올 수 있으므로 오염원을 줄이기 위해 유전자 조작 기술을 통해 트립신을 합성하여 기존 돼지 또는 소 트립신이 가져올 수 있는 바이러스 오염 위험을 해결합니다.

재조합 트립신은 대부분 재조합 대장균 또는 효모 시스템에 의해 재조합적으로 발현되고, 키모트립신과 같은 이종 효소 오염 없이 다단계 크로마토그래피로 정제됩니다. 재조합 트립신은 자연적으로 추출된 트립신과 동일한 특성을 가지고 있으며, 돼지 트립신 서열과 상동하는 아미노산 서열을 가지고 있어 폴리펩타이드 사슬의 라이신 및 아르기닌 잔류물의 카르복실기를 특이적으로 절단합니다. 비동물성 오염원과 높은 순도 덕분에 제약 개발, 생화학 연구, 프로테오믹스 및 기타 분야에서 광범위한 응용 분야가 있습니다.

시중의 주류 재조합 트립신은 대장균이나 효모에서 DNA 재조합 기술을 사용하여 발현시킨 재조합 돼지 트립신이며, 아미노산 서열은 돼지 트립신과 완전히 일치하며 천연 트립신과 동일한 활성과 특이성을 가지고 있습니다. 223개의 아미노산으로 구성되어 있으며 6쌍의 이황화물 결합을 포함합니다. 이 효소는 α-트립신과 β-트립신의 두 가지 활성 형태의 트립신을 포함합니다. 그 활성은 PMSF 및 TLCK와 같은 세린 프로테아제 억제제, EDTA와 같은 금속 이온 킬레이터 등에 의해 억제됩니다. 재조합 트립신은 혈청이 없는 배양에서 사용되며 트립신과 마찬가지로 다른 세포에 다른 성분과 농도의 트립신을 첨가합니다.

응용 프로그램

1. 백신 및 재조합 인슐린 생산
2. 세포 분석을 위한 조직 샘플 준비;
3. 면역세포치료;
4. 생물제약 생산
5. 단백질 서열, 구조 및 오믹스 연구

제품의 상세 비교

제품	비재조합 트립신(동물 유래)	재조합 트립신(동물성 유래 불포함)
목	40123ES（페놀레드(-),EDTA(+)） 40124ES（페놀레드(-),EDTA(-)） 40126ES（페놀레드(+),EDTA(-)） 40127ES（페놀레드(+),EDTA(+)）	40512ES 20416ES（MS-SAFE）
원천	소, 돼지, 양의 췌장에서 추출	대장균（40512ES） 피치아 파스토리스（20416ES）
보안	잠재적인 병원균에 의한 오염	외인성 바이러스 오염 없음
청정	1:250 트립신 용액의 90% 이상이 불순물입니다.	고순도(β-트립신≥ 70%, α-트립신≤20%）
소화세포 유형	가장 인접하고 강력하게 접착하는 세포주	가장 인접하고 강력하게 접착하는 세포주
키모트립신 한계	트립신 2500단위당 키모트립신 50단위를 넘지 않아야 합니다.	미로시나아제 및 기타 불순물 효소 오염 없음
특정 활동	≥2500 USP 단위/mg 단백질	≥3800 USP 단위/mg 단백질
소화효과	불안정	소화력이 강하고 효소량이 적다
자체 절단 속도	자체 절단이 쉽고 자체 절단 파편이 생성되어 질량 분석 결과에 영향을 미칩니다.	자체 절단이 쉽고 자체 절단 파편이 생성되어 질량 분석 결과에 영향을 미칩니다.
용해된 액체	Ca2+, Mg2+가 있거나 없는 HBSS 용액	Ca2+ 및 Mg2+가 포함되거나 포함되지 않은 HBSS 용액(40512ES); 1 mM HCL（20416ES）
세포 생존	정상	정상
동결-해동이 필요한지 여부	예	예

세포 소화에 가장 흔히 사용되는 트립신 외에도 다음과 같이 다양한 유형의 소화 효소 제품이 사용될 수 있습니다.

콜라겐 분해효소의 응용분야에 대하여

콜라게나제는 Pro-X-Gly-Pro 서열을 특이적으로 인식하고 서열 내 중성 아미노산(X)과 글리신(Gly) 사이의 펩타이드 결합을 절단할 수 있는 펩티다제 엔도뉴클레아제입니다. 콜라게나제는 3가닥 초나선 구조의 천연 콜라겐 섬유를 분해할 수 있는 유일한 프로테아제이며, 결합 조직과 상피 조직의 세포외 기질에 있는 다른 단백질, 다당류, 지질을 효과적으로 가수분해할 수 있어 이 제품은 조직 소화에 매우 적합합니다.

1. 콜라게나제 I은 일반적으로 상피세포, 간, 폐, 지방 및 부신 조직 세포의 제제로 사용됩니다.
2. 심장, 뼈, 근육, 간, 갑상선, 연골과 같은 조직 유래 세포를 준비하는 데 사용되는 콜라게나제 II
3. 콜라겐분해효소 III는 일반적으로 유방 세포를 준비하는 데 사용됩니다.
4. 콜라겐분해효소 IV는 일반적으로 췌장 섬 세포를 준비하거나 수용체 무결성을 유지해야 하는 세포 준비 실험에 사용됩니다.
5. 콜라겐분해효소 V는 췌장 섬세포와 결합 조직 세포를 분리하는 데 적합합니다.

복합트립신의 응용분야에 대하여

Accutase는 단백질 분해 및 콜라겐 분해 효소 활성을 포함하는 세포 소화물이며, 기존 조직 배양 용기 및 부착 배양 용기에서 세포를 소화하기 위한 트립신-EDTA 소화물을 완벽하게 대체합니다. Accutase는 분리된 세포가 손상되지 않은 표면 항원을 유지하고 동물 또는 박테리아 유래 성분을 포함하지 않으므로 조직 분리 및 세포 분리에 적합하여 세포 표면 라벨링, 바이러스 성장 분석, 유세포 분석 및 생물 반응기 관련 분석과 같은 후속 실험의 요구 사항을 충족할 수 있습니다.

췌장효소 대체제의 적용 분야

PerfCell Tryzyme™ Express 효소 제품은 매우 순수하고, 세포 손상이 거의 없으며, 소화가 부드럽고, 실온에서 안정적으로 보관할 수 있어 다양한 세포주 배양에 이상적인 소화 효소입니다. 이 유형의 제품은 불활성화를 위해 트립신 억제제를 사용할 필요가 없으며, 일부 혈청이 없는 성장 부착 세포 실험에 더 친화적인 동물성 원료를 포함하지 않습니다.

디스패스의 적용분야에 대하여

디스파제 II 디스파제 II는 비특이적 메탈로프로테이나제로 세포 생물학에서 일반적으로 여러 조직이나 기관에서 단일 세포를 분리하는 데 사용되며, 일차 세포 분리, 세포 통과 등과 같은 후속 세포 배양에 사용되며, 현탁 세포 배양 중에 발생하는 세포 응집을 제거하는 데에도 사용할 수 있습니다. 세포 생물학에서 일반적으로 사용되는 다른 프로테아제(예: 트립신, 콜라게나제, 프로나제 등)와 비교할 때 이 효소는 다음과 같은 장점이 있습니다.

1. 빠르고 효과적이며 온화한 세포 소화 효소로, 세포에 거의 손상을 주지 않으며 세포막의 무결성을 유지할 수 있습니다.
2. 박테리아에서 유래되었으며, 마이코플라스마나 기타 동물 바이러스 오염이 없습니다.
3. 온도, pH 및 혈청 성분에 영향을 받지 않는 강력한 안정성;
4. 다양한 유형의 조직과 세포를 분리하는 데 사용할 수 있습니다.

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카탈로그 번호	제품 이름	크기
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