1. RNA 분해를 방지하는 방법은?

2. RNase 억제제란 무엇입니까?

3. RNase 억제제는 어떤 역할을 하나요?

4. 쥐 RNase 억제제의 특징은 무엇입니까?

5. 관련 제품 및 성과

6. 관련상품

7. 자주 묻는 질문

1. RNA 분해를 방지하는 방법은?

RNase는 핵산 대사에서 중요한 역할을 하며 거의 모든 유형의 원핵생물과 진핵생물에서 발견될 수 있습니다. RNase는 눈물, 타액, 땀과 같은 체액에서 분비되어 미생물의 침입을 방어하며, RNase는 피부 잔해에도 존재합니다. 그러나 대부분 환경에서 RNase의 주요 공급원은 미생물, 즉 박테리아와 곰팡이입니다. RNase는 불활성화하기가 매우 어렵고 안정성, 내열성, 내산성 및 내알칼리성을 나타냅니다. 열 변성 후 원래 구조를 빠르게 회복할 수 있습니다. RNase는 일반적으로 매우 활성적이며 진핵생물과 원핵생물 세포와 조직 모두에 널리 분포합니다. 샘플의 RNA는 미량의 RNase 오염만으로도 완전히 분해될 수 있습니다. 연구에서 RNase 오염은 내부 및 외부 공급원에서 발생할 수 있습니다. 세포의 RNase는 주로 내인성 오염원인 반면, 외인성 오염원에는 실험 용품, 실험실 환경 및 실험자 자신이 포함됩니다. RNase, 특히 RNase A 계열의 구성원은 분자 내 이황화물 결합을 많이 형성할 수 있는 몇 개의 시스테인 잔류물을 포함하는 작고 컴팩트한 단백질입니다. 변성제가 없는 상태에서 실온으로 되돌리면 변성된 RNase는 자연스러운 구조와 일부 기능을 회복합니다. 따라서 RNase는 오토클레이브 후에도 반복적인 동결-해동 주기를 거친 후에도 상당한 활성을 유지합니다. 이러한 효소의 안정적인 특성으로 인해 표면과 용액에서 RNase를 제거하기 위해 일반적으로 공격적인 화학적 방법이 필요한 많은 오염 제거 방법에 내성이 있습니다.

취약한 RNA의 분해를 피하기 위해 RNA를 사용할 때는 특별한 예방 조치를 취해야 합니다. 외인성 RNase를 제어하기 위해 실험자는 실험 중에 장갑을 착용하고 피부, 문 손잡이, 일반 물체 표면을 만진 후에는 장갑을 교체해야 합니다. 그리고 RNA 작업을 위해 특수 피펫 건을 사용하고 RNase가 없는 벽 팁, 원심분리관, 화합물, 시약을 사용해야 합니다. 통풍구와 열린 창문에서 멀리 떨어져 있거나 덮고, 덜 다니는 구역을 RNase가 없는 구역으로 사용합니다. 그리고 RNA 추출 및 분석 중에는 RNase 오염을 일으킬 수 있는 다른 실험을 수행하지 마십시오.
내인성 RNase의 활성을 억제하는 방법은 첫째, 샘플을 보존하는 것입니다. 조직을 샘플링한 후 RNA를 직접 추출해서는 안 됩니다. 대신, -80°C 환경에서 액체 질소와 함께 빠르게 동결하고 보관해야 하며, RNA 분해를 최소화하기 위해 가능한 한 빨리 실험을 수행해야 합니다. RNase 억제제를 세포 용해물에 첨가하여 세포를 동시에 파괴하고 RNase를 불활성화하여 세포 파괴 중에 방출되는 RNase의 활성을 최소화합니다. 모든 시약과 장비는 사용하기 전에 RNase를 불활성화하기 위해 특수 처리해야 합니다.

또한 RNA 억제제는 RNase 활동을 억제하고 RNA의 RNase 분해를 방지하는 데 사용할 수 있습니다. RNA 억제제에는 여러 유형이 있습니다.

• 디에틸 피로카보네이트(DEPC): 강력하지만 완전하지 않은 RNase 억제제입니다. RNase의 활성 유전자 그룹에서 히스티딘의 이미다졸 고리를 결합하여 단백질을 변성시켜 효소의 활동을 억제합니다.
• 구아니딘 이소티오시아네이트: 현재 가장 효과적인 RNase 억제제로 간주되며, 조직을 용해하는 동안 RNase를 불활성화하여 세포 구조를 파괴하고 핵단백질에서 핵산을 분리할 수 있으며, RNase에 강한 변성 효과를 미칩니다.
• 바나딜 리보뉴클레오시드 복합체: 바나듐 산화물 이온과 뉴클레오시드에 의해 형성된 복합체로, RNase와 결합하여 전이 유사체를 형성하여 RNase의 활동을 거의 완전히 억제합니다.
• RNase 단백질 억제제(RNasin): 쥐의 간이나 인간의 배반포에서 추출한 산성 당단백질인 RNasin은 RNase의 비경쟁적 억제제로, 다양한 RNase에 결합하여 불활성화시킬 수 있습니다.
• 기타: SDS, 요소, 규조토 등도 RNase에 대해 어느 정도 억제 효과가 있습니다.

2. RNase 억제제란 무엇입니까?

RNase 억제제는 RNase 활동을 억제할 수 있는 물질 종류입니다. 일반적인 RNase 억제제에는 디에틸 피로카보네이트(DEPC), 구아니딘 이소티오시아네이트, 리보뉴클레오시드 바나딜 복합체(RVC), RNase 단백질 억제제(RNasin)가 있습니다. 그 중 DEPC와 구아니딘 이소티오시아네이트는 어느 정도 독성이 있으며, RVC는 PCR 중합효소에 대한 억제 효과가 있어 후속 실험에 도움이 되지 않습니다. RNasin은 독성이 없으며 RNase의 비경쟁적 억제제로 다양한 RNase에 결합하여 불활성화할 수 있습니다.

3. RNase 억제제는 어떤 역할을 하나요?

RNase 억제제는 이러한 오염 물질을 억제하고 제어하기 위해 RNA의 효소 조작에서 예방 조치로 일반적으로 사용됩니다. RNasin은 쥐의 간이나 인간의 배반엽에서 추출한 산성 당단백질로, 비공유 결합 방식으로 RNase에 특이적으로 결합하여 복합체를 형성하여 RNase 불활성화를 유발하여 RNA의 무결성을 보호할 수 있습니다. 현재 RNase 억제제는 cDNA 합성, RT-PCR, 시험관 내 전사/번역 반응 또는 RNA 정제와 같은 응용 분야에서 RNA 분해를 방지하는 데 도움이 됩니다.

4. 쥐 RNase 억제제의 특징은 무엇입니까?

재조합 쥐 RNase 억제제는 인간 유래 RNase 억제제에 포함된 2개의 산화 민감성 시스테인을 포함하지 않습니다. 따라서 쥐 RNase 억제제는 높은 항산화 활성을 가지고 있으며 낮은 DTT 실험에 더 안정적입니다. 또한 Yeasen의 쥐 RNase 억제제는 다음과 같은 특징이 있습니다.
1) 전방위 RNase 저해: YEASEN의 쥐 RNase 저해제는 RNase A, RNase B, RNase C 등을 특이적으로 저해합니다.
2) 다양한 반응 조건: RNase 억제제는 pH 5.0~9.0, 25℃~55℃에서 활성을 나타내므로 열안정성 역전사효소에 적합합니다.
3) 다양한 다운스트림 실험이 가능: RNase 억제제를 Taq DNA 중합효소, AMV 또는 M-MuLV 역전사효소, 파지 RNA 중합효소(SP6, T7 또는 T3)와 함께 사용하는 경우 중합효소 활성이 억제되지 않습니다.
4) 대량생산 제품 : 20억U의 단일 생산능력은 제품의 동질성, 공급 안정성, 적시성을 보장하여 비용 관리에 도움이 됩니다.
5) 배치 간 일관성: ISO13485 품질 관리 시스템에 의한 성숙한 단백질 발현 및 정제 플랫폼, 품질 요구 사항에 따른 품질 관리 테스트를 통해 배치 간 제품 안정성을 보장합니다.

5. 관련 제품 및 성과

A. RNase 억제제는 RNase 활동을 차단합니다.

1μg HEK 세포 총 RNA, 1μL RNase 억제제는 5ng RNase를 효과적으로 억제할 수 있습니다.

그림 1. Murine RNase Inhibitor의 억제 효과.

B. RNase Inhibitor는 qPCR 테스트에서 외국 제품을 능가합니다.

Yeasen 및 R* Company 마우스 유래 RNase 억제제(MRI)의 억제 효과는 동일한 실험 환경에서 qPCR 기술을 사용하여 측정되었으며, YEASEN Murine 소스의 RNase 억제제는 시스템에서 RNase A를 효과적으로 억제했습니다. 억제 효과는 경쟁사보다 우수했습니다.

그림 2. R* MRI RNase 저해 검사

참고: 그림의 왼쪽에서 오른쪽 순으로 곡선은 다음과 같습니다: 양성 대조군(RNA만, RNase 및 MRI 없음), 40 U MRI, 30 U MRI, 20 U MRI, 10 U MRI, 음성 대조군(RNA + RNase, MRI 없음).

그림 3. Yeasen MRI RNase 저해 검사

참고: 그림의 왼쪽에서 오른쪽 순으로 곡선은 다음과 같습니다: 양성 대조군(RNA만, RNase 및 MRI 없음), 80 U MRI, 60 U MRI, 40 U MRI, 30 U MRI, 20 U MRI, 10 U MRI, 음성 대조군(RNA+RNase, MRI 없음).

그림 4. Yeasen MRI 및 R* MRI의 RT-qPCR 결과의 CT

6. 관련상품

Yeasen이 제공할 수 있는 관련 제품은 표 1에 나와 있습니다.

표 1. 제품 목록

7. 자주 묻는 질문

질문 1: 쥐 RNase 억제제에 RNase가 들어있나요?
A: 각 시약은 RNase 활동을 감지하여 쥐 RNase 억제제가 RNase 오염을 가져오지 않는지 확인합니다.
질문 2: 쥐 RNase 억제제가 후속 PCR 실험에 영향을 미칠까요?
A: 효과가 없습니다. 각 배치의 Murine RNase 억제제는 품질 검사 후 게놈 오염이 없으며 RT-PCR 및 RT-qPCR 연구에 사용할 수 있습니다.
Q3: Murine RNase 억제제는 비활성화되나요?
A: 억제제는 65°C 이상의 온도에서 불활성화되고, 격렬한 교반도 불활성화를 유발합니다.
Q4: 반응 시스템을 준비하기 위해 쥐 RNase 억제제를 사용할 때 어떤 예방 조치를 취해야 합니까?
답변: 시스템을 준비할 때 RNase 오염원을 유입할 수 있는 다른 성분을 첨가하기 전에 RNase 억제제를 먼저 추가할 수 있습니다.
Q5: Murine RNase 억제제는 엔도뉴클레아제와 엑소뉴클레아제 활성을 가지고 있나요?
답변: 엔도뉴클레아제와 엑소뉴클레아제 활동이 없어 생산 수율을 향상시키는 데 도움이 됩니다.

독서에 관하여:

쥐 RNase 억제제 - RNase 오염을 성공적으로 제거하고 RNA를 보존합니다.

역전사효소 선택

YEASEN 내열성 UDG——에어로졸 오염을 쉽게 제어합니다

고품질 등온 증폭 원료 - RT-LAMP를 더욱 민감하고 빠르게 만듭니다!