역전사효소는 RNA 의존성 DNA 중합효소라고도 하며, 단일 가닥 RNA를 DNA로 전사하는 DNA 중합효소입니다. 역전사효소의 성능은 분자 진단 시약의 최종 성능에 직접적인 영향을 미칩니다. 분자 진단 시약 제조업체의 문제점에 대응하여 Yeasen은 역전사효소에 대한 방향성 변환을 수행했습니다. 역전사효소는 성능이 뛰어나고 고객으로부터 호평을 받고 있습니다!

1. 역전사효소의 기능은 무엇입니까?
2. 역전사효소는 어떻게 선택하나요?
3. 왜 Yeasen의 역전사효소를 선택해야 합니까?
4. 관련 제품 및 성과
5. 관련상품

1. 역전사효소의 기능은 무엇입니까?

역전사효소는 RNA 의존적 DNA 중합효소입니다. 주형 RNA를 전사하고 상보적 DNA(cDNA)를 형성할 수 있습니다. 단일 가닥 cDNA는 DNA 중합효소를 사용하여 이중 가닥 DNA로 전환됩니다. 따라서 역전사효소는 RT-PCR이라고 하는 중합효소 연쇄 반응 기술과 결합할 때 mRNA 합성 수준을 정량화하는 데 일반적으로 사용됩니다. 정량적 RT-PCR 분석은 일반적으로 질병 진단에 사용됩니다. 따라서 역전사효소는 과학적 연구와 실제 적용에서 중요한 역할을 합니다.

2. 역전사효소는 어떻게 선택하나요?

일반적인 역전사효소는 M-MLV와 AMV이며, 그 중 M-MLV가 AMV보다 우수합니다. 그러나 기존의 RT 효소는 두 개의 활성 부위를 가지고 있는데, 하나는 중합효소 활동을 실행하고 다른 하나는 리보뉴클레아제 H 활동을 실행합니다. RNase H는 DNA-RNA 하이브리드 패밀리의 RNA 부분을 분해할 수 있는 엔도뉴클레아제입니다. 따라서 RNase H 활동이 없는 역전사효소는 cDNA 합성에 유익합니다. 그 외에도 열안정성 버전의 RT를 사용하면 비특이적 핵산 증폭을 낮추고 복잡한 2차 구조의 영향을 최소화하는 데 유익합니다.

3. 왜 Yeasen의 역전사효소를 선택해야 합니까?

Yeasen은 역전사효소에 방향성 수정을 수행하여 RNase H 활성을 제거하여 cDNA 합성 능력을 개선했습니다. 단백질 진화 기술을 사용하여 역전사의 열 안정성을 개선했습니다.

Yeasen의 역전사효소는 강력한 합성 능력뿐만 아니라 강력한 내성 능력도 가지고 있습니다. 또한 Yeasen은 품질에 대한 엄격한 요구 사항을 가지고 있습니다. 역전사효소에 대한 최상의 선택입니다.

4. 관련 제품 및 성과

4.1 65°C 고온에 강함

293T 세포 총 RNA 500ng을 템플릿으로 사용하여 Hifair™ III 역전사효소를 사용하여 42°C-65°C에서 역전사를 수행했습니다. TFRC 유전자(4.4kb)를 증폭하기 위해 1 μL의 cDNA를 템플릿으로 사용했습니다.

그림 1. 42°C-65℃에서 역전사 수행

4.2 복잡한 템플릿과 호환

55°C의 반응 온도는 기존 템플릿과 2차 구조 템플릿의 역전사를 만족시킬 수 있으며, 고 GC 템플릿의 반응 온도는 적절히 65°C까지 증가될 수 있습니다.

그림 2. GC가 풍부한 템플릿 및 2차 구조 템플릿에 적합

4.3 뛰어난 확장 성능

293T 세포의 총 RNA 500ng을 템플릿으로, Oligo(dT)를 프라이머로 사용하여 Hifair™ III 역전사효소를 사용하여 cDNA를 합성했습니다. 1 μL의 cDNA를 템플릿으로 사용하여 DY1C1N1 유전자(19.9kb)의 5' 500bp를 증폭했습니다. 결과에 따르면 Hifair™ III 역전사효소는 최대 19.8kb의 cDNA를 합성할 수 있습니다.

그림 3. 최대 19.8kb cDNA 합성 가능

4.4 빠른 합성

293T 세포의 RNA를 템플릿으로 사용하여 매뉴얼의 표준 절차에 따라 역전사를 수행하였고, 역전사 시간은 각각 5, 10, 15, 30, 45, 60분으로 설정하였다. Hifair™ III 역전사효소는 5분 이내에 6kb cDNA를 합성할 수 있으며, 특이성과 수율은 V 브랜드보다 우수하다.

그림 4. 6kb cDNA는 5분 이내에 합성 가능

4.5 넓은 선형 범위

293T 세포의 총 RNA 5pg-5μg을 주형으로 사용하여 Hifair™ III 역전사효소를 사용하여 cDNA를 합성했습니다. 1 μL의 cDNA를 주형으로 사용하여 4개 유전자에 대해 qPCR을 수행한 결과 증폭 효율이 모두 98%에서 100.10% 사이였습니다. 이는 cDNA가 광범위한 선형 범위의 주형에서 효율적으로 합성될 수 있음을 보여줍니다.

그림 5. cDNA는 광범위한 템플릿 범위에서 효율적으로 합성될 수 있습니다.

4.6 엄격한 품질관리

Yeasen의 역효소의 안정적인 성능을 보장하기 위해 Yeasen은 생산 공정의 요구 사항을 엄격히 이행하여 생산 공정을 안정화하고 배치 안정성을 보장합니다. 동시에 엑소뉴클레아제, 니카아제, RNase 등의 잔류물을 검출하기 위한 품질 검사를 강화하여 잔류물이 없도록 하여 하류 실험에 영향을 미치지 않도록 합니다.

그림 6. 잔류물 검출

5. 관련상품

Yeasen에서 제공하는 제품은 다음과 같습니다.

표 1. 관련 제품

독서에 관하여

역전사효소 선택 지침

YEASEN UDG: PCR 반응의 "오염 방지 전문가"