그림 1. 친화크로마토그래피의 개략도 ^[1]

단백질 공학 분야에서 퓨전 태그는 강력한 도구로 작용하여 표적 단백질에 결합하여 다양한 실험 목적을 용이하게 할 수 있습니다. 일반적인 퓨전 태그의 기능은 아래 표에 참조용으로 나열되어 있습니다. 그러나 이러한 태그가 초기 보조 기능을 수행한 후 융합 단백질에 남아 있으면 동물 면역 실험을 방해하거나 단백질의 생물학적 활동에 영향을 미치는 등 후속 실험에 부정적인 영향을 미칠 수 있습니다. 따라서 단백질의 정상적인 기능과 실험의 정확성을 보장하기 위해 이러한 불필요한 융합 태그를 제거하는 것이 중요합니다.

표 1. 일반적인 융합 태그 및 효소 절단 방법의 기능 소개

그림 2. TEV 프로테아제 작용기전의 개략도 ^[2]

UCF.ME ^TM rTEV 프로테아제는 유전자 조작되고 미세 정제된 재조합 프로테아제입니다. 천연 TEV 효소의 완전한 기능적 활동을 유지할 뿐만 아니라 더 넓은 온도 범위에서 뛰어난 안정성과 특이성을 나타냅니다. 본 제품 의 호스트 gDNA 잔류물은 매우 낮아 실제 응용 분야에서 단백질 융합 태그의 절단 효율을 높이고 외인성 물질 잔류물의 도입 위험을 효과적으로 줄여줍니다. UCF.ME ^TM rTEV Protease는 pH 7.0 및 30°C의 조건에서 최적의 활성을 보입니다. 그러나 pH 6.0-8.5 및 온도 4-30°C의 광범위한 조건에서도 활성을 유지하여 다양한 단백질 처리 요구 사항을 충족합니다. UCF.ME ^TM rTEV Protease는 N-말단에 6×His 태그가 있어 Ni-NTA 수지로 효율적으로 제거하여 표적 단백질을 정밀하게 정제할 수 있다는 점을 언급할 가치가 있습니다.

성능 표시

1. 높은 절단 효율성: 단백질 태그가 더 철저하게 절단됩니다.

기질로 UCF.ME ^TM rTEV Protease 절단 부위를 포함하는 융합 단백질(3 μg)을 사용하여 , 각각 10, 5, 3 U의 UCF.ME ^TM rTEV Protease를 첨가하고, 30°C에서 1시간 동안 반응을 진행하였다. 절단 효과는 아가로스 겔 전기영동으로 검출하였다. 그 결과, Yeasen 의 UCF.ME ^TM rTEV Protease는 투입량이 3 U 이상일 때 절단 효율이 >90%로 효율적으로 기질을 절단할 수 있는 것으로 나타났다.

그림 3. UCF.ME ^TM rTEV Protease 의 절단 활성 검증

2. 낮은 호스트 gDNA 잔류물: 외인성 물질 잔류물 도입 위험을 효과적으로 감소시킵니다.

UCF.ME ^TM rTEV 프로테아제 의 다양한 배치에서 숙주( 대장균 ) gDNA 잔류물을 테스트한 결과, UCF.ME ^TM rTEV 프로테아제 의 숙주 gDNA 잔류물이 <1 copy/U보다 훨씬 낮음을 보여주었습니다.

그림 4. UCF.ME ^TM rTEV Protease 의 호스트 gDNA 잔류물 결과

3. 광범위한 적용 조건: 다양한 단백질 가공 요구 사항 충족 가능.

다양한 조건에서 UCF.ME ^TM rTEV Protease 의 절단 활성을 검증한 결과, UCF.ME ^TM rTEV Protease는 4~30°C 조건에서 강력한 활성을 보였으며, 이는 고객의 다양한 응용 분야 요구 사항을 충족할 수 있음을 보여주었습니다.

예 이젠 이 추천하는 퓨전태그 커팅 단백질 제품

참고문헌：

[1] Parikh I, Cuatrecasas P.Affinity Chromatography[J].Vox Sanguinis, 1972, 23(1-2):141-146.DOI:10.1159/000466530.

[2] Paththamperuma C, Page R C. TEV 프로테아제 활성에 대한 형광 소광 제거 검정[J]. 분석 생화학, 2022, 659: 114954.