YEASEN의 원숭이두창 바이러스 검출을 위한 종합 솔루션

원숭이두창의 첫 확진 사례는 5월 초 영국에서 보고되었고, 비풍토병 국가 및 지역에서 빠르게 확산되었습니다. 2022년 9월 21일 현재 전 세계적으로 106개 국가/지역에서 확진되었으며, 총 63,117건의 사례가 발생했습니다. 9월 16일, 충칭은 중국 본토에서 첫 번째 사례인 원숭이두창의 수입 사례를 확인하여 사회적 우려를 불러일으켰습니다.

그림 1. 2022년 원숭이두창 발생 세계 지도(CDC에서 제공)

그림 1. 2022년 원숭이두창 발생 세계 지도(CDC에서 제공)

1. 원숭이두창이란 무엇인가?
2. 원숭이두창의 역사
3. 확산 방법
4. 징후 및 증상
5. 검출 방법
6. 제품 매칭
7. 제품 주문

1. 원숭이두창이란 무엇인가?

원숭이두창 바이러스는 총 길이가 약 197kb인 이중 가닥 DNA 바이러스입니다. 그것은 Poxviridae과의 Orthopoxvirus 속에 속합니다. 바이러스). 원숭이두창 바이러스에는 두 가지 분과(서아프리카 분과와 콩고 분과)가 있습니다. 그 중 서아프리카 분과의 사망률은 약 3.6%이고 콩고 분과의 사망률은 10.6%에 달할 수 있습니다. 2022년 5월 이후 비유행 지역에서 발견된 원숭이두창 사례 샘플, 시퀀싱 분석 결과 서아프리카 분과 [1] 가 나타났습니다.

그림 2. 원숭이두창 사진 (CCDC 사진)

그림 2. 원숭이두창 사진 (CCDC 사진)

2. 원숭이두창의 역사

원숭이두창은 1958년 연구 목적으로 키운 원숭이 집단에서 두 차례의 천연두 유사 질병 발병이 발생하면서 발견되었습니다. "원숭이두창"이라는 이름이 붙었지만 질병의 근원은 여전히 ​​알려지지 않았습니다. 그러나 아프리카 설치류와 비인간 영장류(원숭이와 같은)가 이 바이러스를 보유하고 사람을 감염시킬 수 있습니다 [2] .
원숭이두창의 첫 인간 사례는 1970년에 기록되었습니다. 2022년 발병 전에 원숭이두창은 중부 및 서부 아프리카 여러 국가의 사람들에게 보고되었습니다. 이전에는 아프리카 외부 사람들의 거의 모든 원숭이두창 사례가 질병이 일반적으로 발생하는 국가로의 국제 여행이나 수입 동물을 통한 여행과 관련이 있었습니다. 이러한 사례는 여러 대륙에서 발생했습니다 [2] .

3. 확산 방법

동물에서 사람으로, 사람에서 사람으로, 환경에서 사람으로 전파될 수 있습니다.
원숭이두창은 인간에게 3가지 방법으로 감염될 수 있다는 것이 이제 분명해졌습니다.첫째, 감염된 동물에서 사람으로 전파됩니다.바이러스는 깨진 피부, 호흡기 또는 점막(눈, 코 또는 입)을 통해 신체에 들어갈 수 있습니다.두 번째는 성교, 키스, 포옹 또는 원숭이두창 신체 부위를 만지는 것을 포함한 사람들 간의 밀접한 접촉을 통해 전파되고, 바이러스에 오염된 옷, 침구, 수건 또는 식기 및 감염될 수 있는 다른 품목과 접촉합니다.세 번째는 호흡기 방울의 전파입니다 [3] .

4. 징후 및 증상

주요 임상 증상은 발열, 발진, 림프절 종대입니다.
초기 증상으로는 발열, 두통, 근육통, 림프절 부종 등이 있다. 발진은 발병 후 1~3일 후에 나타난다. 전형적인 발진은 먼저 얼굴에 나타나 점차 사지와 다른 부위로 퍼진다. 발진은 대부분 원심성이며, 얼굴과 사지의 발진은 몸통보다 흔하고, 손바닥과 발바닥에 발진이 나타날 수 있으며, 발진의 수는 몇 개에서 수천 개까지 다양하다. 또한 구강 점막, 소화관, 생식기, 결막, 각막에도 나타날 수 있다.
증상은 일반적으로 14~21일 동안 지속되며 환자는 보통 스스로 증상을 해소합니다. 딱지가 떨어진 후에도 홍반이나 과색소침착 또는 흉터가 남을 수 있습니다. 딱지가 떨어지고 그 아래에 새로운 피부층이 형성될 때까지 딱지는 전염성이 있다는 점에 유의하는 것이 좋습니다 [3] .

5. 검출 방법

원숭이두창 전염병을 효과적으로 예방하고 통제하고 바이러스가 수입되고 퍼지는 것을 막기 위해 글로벌 IVD 회사들이 적극적으로 대응했습니다. IVD 검출 시약 생산 원료 및 시약 솔루션 공급업체인 YEASEN은 원숭이두창 바이러스를 효율적으로 검출하는 데 도움이 되는 완벽한 솔루션을 제공합니다. 핵산 추출부터 시약 구성 요소(효소 시약 및 유사 바이러스) 및 반제품 키트(프라이머 프로브, 효소 시약 및 플라스미드 대조군)까지 YEASEN은 안정적으로 공급할 수 있습니다.

그림 3. 바이러스 검출 방법

그림 3. 바이러스 검출 방법

5.1 방법의 장점

  • 효율적이고 편리한 작동 - 번거로운 작업 없이 모든 구성 요소를 포함한 키트 세트, 단계별 추가
  • 높은 검출감도 - 유전자변형 항체법 핫스타트 Taq 효소, 1개/반응도 검출 가능
  • 강력한 시약 안정성 - 37℃에서 1주일 보관 가능하며, 동결과 해동을 반복해도 안정적인 성능을 유지함
  • UDG 오염 방지—dUTP/UDG 시스템이 시스템에 추가되어 에어로졸 오염 위험을 효과적으로 방지합니다.
  • 다중 플랫폼에 적용 가능 - Bio-Rad CFX96, ABI Q5 및 Slan에 적합

5.2 제품 매칭

  • 핵산 추출 시약: MolPure™ Magnetic Swab Viral DNA/RNA Kit(Cat#18300ES)
  • Monkeypox 검출 시약: Monkeypox 바이러스 실시간 qPCR 키트 (Cat#13862ES/Cat#13863ES)
  • 원숭이폭스 슈도바이러스: 원숭이폭스 바이러스 슈도바이러스(Cat#12099ES/Cat#12100ES)

6. 추천 제품

6.1 Monkeypox 바이러스 실시간 qPCR 키트(Cat#13862ES)

제품의 장점:
효율적이고 편리한 운영
높은 민감도와 좋은 특이성
매우 안정적이다
좋은 반복성

6.1.1 사례보기:

  • 37℃에 대한 뛰어난 열 안정성

MPXV는 Cat#13862ES를 37℃에서 7일간 두어 증폭시켰다. 그 결과, Ct 값과 형광 값은 37℃에서 7일간 보관해도 큰 영향을 받지 않았으며, 열 안정성이 강했다.

그림 4. <tc>Yeasen</tc>(Cat#13862ES)37℃ 가속 7일 안정성 검증

그림 4. Yeasen(Cat#13862ES) 37℃ 가속 7일 안정성 검증

  • 초고동결-융해 안정성

MPXV는 Cat#13862ES를 -20℃에서 각각 10회, 20회, 50회 동결 및 해동하여 증폭시켰다. 그 결과 -20℃에서 10회, 20회, 50회 동결 및 해동은 Ct 값과 형광 값에 유의한 영향을 미치지 않았으며 동결 및 해동 안정성이 강했다.

그림 5. <tc>Yeasen</tc>(Cat#13862ES)-20℃ 동결융해 안정성 검증

그림 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ 동결융해 안정성 검증

  • 초고감도, 1Copies/μL도 검출 가능

Yeasen monkeypox 제품(Cat#13862ESES)을 사용하여 1000개 사본/μL, 100개 사본/μL, 10개 사본/μL, 1개 사본/μL, 음성 공백(NTC)을 사용하여 MPXV를 검출했습니다. 단일 사본도 검출할 수 있는 것으로 나타났습니다(Ct 값은 약 38). 48웰 NTC 검사를 반복했는데, 기준선은 안정적이고, NTC 피크는 음성이며, 꼬리 현상은 없었고, 민감도와 특이도가 높았습니다.

그림 6. MPXV 감도 감지

그림 6. MPXV 감도 감지

그림 7. MPXV 특이성 검출

그림 7. MPXV 특이성 검출

  • 시약은 안정적이고 재현 가능합니다.

Yeasen monkeypox 검출 키트(Cat#13862ESES)를 선택하여 저농도, 중농도, 고농도 양성 샘플에 대해 10회 반복 테스트를 수행했습니다. 결과에 따르면 FAM 채널에서 양성 샘플의 CV는 2% 이하이고, 블랭크 대조군에는 피킹이나 테일링 현상이 없었습니다. 반복성이 우수했습니다.

그림 8. 반복성 테스트

그림 8. 반복성 테스트

6.2 Monkeypox 바이러스 실시간 qPCR 키트(UDG Plus) (Cat#13863ES)

제품의 장점:

⑴ 효율적이고 편리한 조작
⑵ 민감도가 높고 특이도가 좋다
⑶ 매우 안정적이다
⑷ 반복성이 좋다
⑸ UDG 오염 방지

6.2.1 사례보기:

  • 37℃에 대한 뛰어난 열 안정성

MPXV는 Cat#13863ES를 37℃에서 각각 7일과 14일 동안 두어 증폭시켰다. 결과는 37℃에서 7일과 14일 후에 Ct 값과 형광 값에 유의한 영향이 없고 열 안정성이 강함을 보여준다.

그림 9. <tc>Yeasen</tc>(Cat#13863ES)37℃ 가속 7일, 14일 안정성 검증

그림 9. Yeasen(Cat#13863ES) 37℃ 가속 7일, 14일 안정성 검증

  • 초고동결-융해 안정성

Cat#13863ES는 MPXV를 증폭하기 위해 -20℃에서 50회 동결 및 해동되었습니다. 결과에 따르면 -20℃에서 50회 동결 및 해동은 Ct 값과 형광 값에 유의한 영향을 미치지 않았으며 동결 및 해동 안정성이 강했습니다.

그림 10. <tc>Yeasen</tc>(Cat#13863ES)-20℃ 동결융해 안정성 검증

그림 10. Yeasen(Cat#13863ES) -20℃ 동결융해 안정성 검증

  • 높은 민감도와 특이성

MPXV 5개 사본/μL와 음성 블랭크(NTC)는 Yeasen monkeypox 제품(Cat#13863ESES)을 사용하여 테스트했습니다. 결과에 따르면 기준선은 안정적이고 FAM 검출률은 100%, 최소 검출 한계는 5개 사본/μL였으며 NTC의 48웰 반복 테스트 동안 FAM 및 VIC 채널의 기준선은 안정적이었고 NTC 음성 피크에는 테일링 현상이 없었으며 높은 민감도와 높은 특이도를 보였습니다.

그림 11. MPXV 감도 감지

그림 11. MPXV 감도 감지

     그림 12. MPXV 특이성 검출

그림 12. MPXV 특이성 검출

  • 시약의 좋은 선형성

양성 템플릿은 1×105개 사본/μL의 농도에서 10배로 희석하였고, Yeasen qPCR monkeypox 키트(Cat#13863ES)를 사용하여 검출을 두 번 반복하였다. 초기 사본 수의 대수는 가로축이고, Ct 값은 세로축이다. 표준 곡선을 작성하였고, 그 결과 monkeypox 유전자의 FAM 채널은 10~1×105개 사본/μL의 선형 범위와 R2>0.99를 나타내어 양호한 선형 관계를 보였다.

그림 13. 선형성 테스트

그림 13. 선형성 테스트

  • 안정적이고 재현 가능한 시약

Yeasen qPCR monkeypox 키트(Cat#13863ES)를 선택하여 양성의 저농도, 중농도, 고농도에 대해 10회 반복 검사, 음성 대조군(NC) 및 블랭크 대조군(NTC)에 대해 20회 반복 검사를 수행했습니다. 결과는 다음과 같습니다. FAM 채널 양성 샘플의 CV는 3% 미만이고, 음성 대조군과 블랭크 대조군은 피킹 및 테일링 현상이 없으며, VIC 채널 NC의 Ct 값은 모두 35 미만이고, CV는 0.3% 미만이며, NTC는 피킹 및 테일링 현상이 없으며 반복성이 좋습니다.

그림 14. 반복성 테스트(FAM)

그림 14. 반복성 테스트(FAM)

   그림 15. 반복성 테스트(VIC)

그림 15. 반복성 테스트(VIC)

7. 제품 주문

2014년에 설립된 Yeasen Biotechnology(Shanghai) Co., Ltd.는 도구 효소 원료와 항원 항체의 R&D 및 생산에 종사하는 하이테크 기업입니다. 이 회사의 제품에는 제약, 식품 안전 검사, 육종, 사법 및 기타 산업에 사용되는 분자 진단 효소, 단백질 및 항체가 포함됩니다. 당사는 생명 과학 분야의 고객에게 고품질의 제품과 서비스를 제공하기 위해 최선을 다하고 있습니다. Monkeypox Virus에 대한 제품 구매 지침은 다음과 같습니다.

표 1. 관련 제품

제품 유형

제품 설명

제품 이름

제품 번호

사양

전부

효소 혼합물

Monkeypox 바이러스 실시간 qPCR 키트 (문의)

13862ES03

24티

13862ES48

48티

13862ES59

96티

Monkeypox 바이러스 실시간 qPCR 키트

13863ES25

25톤

13863ES60

100톤

13863ES80

1000톤

가짜바이러스

F3L 유전자

원숭이두창바이러스 F3L-가성바이러스(문의)

12099ES03

1ml(1ml)

12099ES08

5 × 1ml 용량

B6R 유전자

원숭이두창바이러스 B6R-가성바이러스(문의)

12100ES03

1ml(1ml)

12100ES08

5 × 1ml 용량

참고문헌

[1] 중국 질병통제예방센터: 원숭이두창 건강 팁
[2] CDC: 원숭이두창에 관하여 | 원숭이두창 | 원숭이두창바이러스 | CDC
[3] 율린 저녁 뉴스: 중국 본토 첫 원숭이두창 발병원 확인! 광시 질병 통제 비상 알림

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