NGS 라이브러리 정량의 본질은 핵산(DNA 또는 RNA) 정량입니다. NGS 라이브러리 정량의 정확한 분석은 고품질 시퀀싱 데이터를 얻는 데 중요합니다. NGS 라이브러리의 정량 농도가 높으면 클러스터링이 불충분하여 시퀀싱 데이터 수율이 낮을 수 있습니다. 그러나 정량 농도가 낮으면 클러스터 간 신호 간섭이 발생하여 품질이 낮은 데이터가 생성되고 심지어 시퀀싱 실패로 이어질 수 있습니다. 또한 시퀀서의 시퀀싱 플럭스가 증가함에 따라 여러 NGS 라이브러리를 시퀀싱에 결합하는 경우가 많습니다. 시퀀싱 데이터 크기의 요구 사항에 따라 해당 몰 양의 NGS 라이브러리를 정량 결과에 따라 혼합하여 각 샘플 데이터 크기의 출력을 안정화합니다. 따라서 라이브러리의 정확한 NGS 라이브러리 정량화가 중요합니다.

현재 NGS 라이브러리 정량화에는 자외선 흡수법과 형광 염료법의 두 가지 주요 방법이 있습니다. NanoDrop은 자외선 흡수 원리에 따라 설계된 DNA 정량화 기기입니다. Qubit은 형광 염료 원리에 따라 개발된 DNA 정량화 기기입니다. 이 두 가지 방법의 정량적 정확도와 비용은 다릅니다. 여기서는 주로 qubit 방법을 권장합니다. 그렇다면 왜 우리는 여러분에게 qubit을 추천할까요? Yeasen에서 공급하는 Qubit 제품의 특징은 무엇일까요? 계속 읽어주세요...

1. 왜 우리는 Qubit을 당신에게 추천합니까?

2. Yeasen에서 공급하는 Qubit 제품의 특징은 무엇입니까?

• Qubit은 어떻게 작동하나요?
• Yeasen에서 공급하는 인기상품
• 제품 특징

3. 다양한 샘플에 대해 Qubit을 선택하는 방법은 무엇입니까?

1. 왜 우리는 Qubit을 당신에게 추천합니까?

Qubit이 Nanodrop보다 낫다는 것은 의심의 여지가 없습니다. 그렇다면 왜 qubit이 nanodrop보다 나을까요? qubit과 nanodrop의 차이점은 무엇일까요? 첫째, 앞서 언급했듯이 DNA 정량화 원리가 다릅니다. NanoDrop은 자외선 흡수를 기반으로 설계되었습니다. 자외선 흡수법의 원리는 핵산 성분에 퓨린 및 피리미딘 염기가 있으며 이러한 염기에는 공액 이중 결합이 있다는 것입니다. UV 영역에서 250-280nm에서 강한 빛 흡수가 있으며 최대 흡수 값은 약 260nm입니다. 따라서 핵산의 UV 흡수는 농도 정량화에 사용할 수 있습니다. NanoDrop은 간단하고 작동이 빠르지만 DNA, RNA, 분해된 핵산, 유리 뉴클레오타이드 및 기타 불순물을 구별할 수 없습니다. 정확한 라이브러리 정량 데이터를 얻는 데 적합하지 않습니다. 그러나 Qubit 정량화는 특히 DNA 정량화에 대한 정확한 NGS 라이브러리 정량화에 가장 적합한 선택입니다. 그렇다면 qubit DNA 정량화의 특징은 무엇입니까? 다음 표를 살펴보세요.

2. Yeasen에서 공급하는 Qubit 제품의 특징은 무엇입니까?

Yeasen이 공급하는 Qubit 제품의 특성을 소개하기에 앞서, Qubit이 어떻게 작동하는지 알아보겠습니다.

2.1 Qubit은 어떻게 작동하나요?

Qubit의 원리는 형광 염료를 사용하여 DNA 분자에 결합하여 형광을 방출한 다음 형광 강도를 측정하여 핵산의 농도를 얻는 것입니다. 형광 염료는 DNA 이중 가닥에 결합한 후에만 형광을 내며, 그 결과 형광은 DNA 농도에 비례합니다.

2.2 Yeasen에서 공급하는 인기상품

그만큼 Qubit®용 1×dsDNA HS Assay Kit(Cat#: 12642ES)는 다음을 기반으로 개발되었습니다. Qubit® 키트용 dsDNA HS Assay Kit(Cat#: 12640ES)는 원래 키트의 농축 염료를 작동 용액으로 미리 희석하기 위한 바로 사용 가능한 Qubit 프리믹스 용액입니다. 작동 시에는 작동 액체만 테스트할 샘플과 혼합하여 Qubit® 형광계로 샘플 농도를 결정하면 되므로 사용하기가 더 편리합니다.

2.3 제품 특징

간단하고 사용하기 쉽습니다. 즉시 사용할 수 있는 미리 혼합된 액체로, 작업 액체를 준비할 필요가 없으며, 조작이 간단하고, 정량화되어 시간을 더욱 절약할 수 있습니다.

그림 1. Qubit용 dsDNA HS Assay Kit의 프로세스

초고감도: 64배 농도구배 희석 정밀 정량화, 0.2-100 ng dsDNA는 양호한 선형 관계를 가짐

매우 특이성: dsDNA를 특이적으로 검출하며, 몇 가지 기존 오염 물질에 대한 내성이 뛰어납니다.

염료의 빠른 결합 속도: 2분 이내에 포화 상태에 도달할 수 있으므로 정확한 정량 결과를 빠르게 판독할 때까지 기다릴 필요가 없습니다.

높은 안정성: 형광 신호는 3시간 동안 지속되었으며, 실온에서 20일 후에도 정량 정확도에 영향을 미치지 않았습니다.

그림 1. 제품 안정성 시험. 결과는 2주 동안 실온에 보관한 후에도 안정을 유지함을 보여줍니다(측정값과 이론값의 편차는 <10%)

참고사항: dsDNA의 두 가지 농도를 선택하고, 4℃에서 보관한 Thermo#Q33230, 4℃에서 보관한 Yeasen#12642, 그리고 실온(약 25℃)에서 보관한 Yeasen#12642를 사용하여 다른 시간대의 농도값을 구하였고, 각 측정값과 첫 번째 측정값(0d로 표시) 사이의 편차율을 계산하였다.

그림 2. 제품 안정성 시험. 매우 안정적이며 유효 기간 내 시험 결과의 관련성이 높음

3. 다양한 샘플에 대해 Qubit을 선택하는 방법은 무엇입니까?

Qubit, 빠른 정량화! 라이브러리 정량화에 Qubit을 사용하면 많은 장점이 있습니다. 검출 프로세스가 빠르고 효과적입니다. 단일 샘플에 대한 시퀀싱 결과는 몇 초 이내에 얻을 수 있으며 농도를 직접 출력할 수 있어 매우 직관적입니다. 동시에, 일괄 샘플 정량화를 위한 대부분의 효소 라벨 장비와 호환될 수 있으며, 이는 기존 라이브러리 정량화 및 dsDNA 정량화의 첫 번째 선택입니다.