설명
T7 RNA 중합효소는 T7 프로모터 서열(5'-TAATACGACTCACTATAG*-3')을 포함하는 이중 가닥 DNA를 템플릿으로 사용하고 NTP를 기질로 사용하여 프로모터 하류의 DNA 역가닥에 상보적인 RNA를 합성합니다. 블런트 말단이나 5' 오버행이 있는 선형 이중 가닥 DNA는 모두 T7 RNA 중합효소의 템플릿 기질로 사용할 수 있으므로 선형화된 플라스미드나 PCR 산물을 시험관 내 RNA 합성의 템플릿으로 사용할 수 있습니다.
이 키트는 샌드위치 효소 결합 면역 흡착 검사(ELISA) 원리를 사용하여 잔류 T7 RNA 중합효소를 검출합니다. T7 RNA 중합효소 표준 및 검사 샘플을 항-T7 RNA 중합효소 항체(36705-A)로 미리 코팅한 마이크로플레이트 웰에 첨가합니다. 그런 다음 희석된 바이오틴 표지 T7 RNA 중합효소 검출 항체(36705-C)를 첨가한 다음 스트렙타비딘-HRP(SA-HRP)(36705-D)를 첨가하여 항체 + 항원 + 항체-바이오틴 + SA-HRP 복합체를 형성합니다. 세척 후 TMB 기질(36705-H)을 첨가하여 색상을 개발합니다. TMB는 HRP에 의해 촉매되어 무색에서 파란색으로, 마지막으로 정지 용액(36705-I)을 첨가하면 노란색으로 전환됩니다. 노란색의 강도는 샘플에서 검출된 T7 RNA 중합효소의 양과 양의 상관 관계가 있습니다.
구성 요소
아니요. |
이름 |
36705ES48 |
36705ES96 |
36705-A |
항-T7 RNA 중합효소 코팅 마이크로타이터 스트립 |
48 티 |
96티 |
36705-B* |
표준: T7 RNA 중합효소 |
1 바이알 |
2 바이알 |
36705-C |
발각 항체 : 비오틴- 접합 항체 |
60 μL |
120 μL |
36705-D |
스트렙타비딘-HRP |
30 μL |
60 μL |
36705-E |
희석 완충액 1 |
25 분당 |
45 분당 |
36705-F |
세척 버퍼 농도 비율(20×) |
25 분당 |
50 분당 |
36705-G |
희석 완충액 2 |
15 분당 |
30 분당 |
36705-H |
TMB 기판 |
8 분당 |
15 분당 |
36705-I |
해결책을 중단하다 |
5 분당 |
10 분당 |
36705-J |
플레이트 실러 |
각각 3개씩 |
각각 5개씩 |
*표준 36705-B는 동결건조 분말입니다.
T7 RNA 중합효소 10625 , 10628 및 10629와 호환됩니다.
검증 데이터
표 1. 선형성 범위: 1~32ng/mL , R2=0.999 , CV≤5%。
표준 |
농도 ( ng/mL) |
평균 ( ng/mL) |
회복 ( %) |
이력서 % |
1단계 |
32 |
31.965 |
99.9% |
2.2% |
2단계 |
16 |
16.070 |
100.5% |
5.0% |
3단계 |
8 |
7.812 |
97.7% |
2.1% |
4학년 |
4 |
4.192 |
104.8% |
0.8% |
표준5 |
2 |
2.020 |
101.8% |
3.5% |
6학년 |
1 |
1.173 |
117.3% |
0.0% |
엔씨소프트 |
0 |
/ |
/ |
/ |

표 2. 높은 특이성
단백질 이름 |
농도 |
감지 여부 |
긍정적 제어 |
1ng/mL |
감지됨 |
부정적 통제 |
0ng/mL |
~이다 |
울트라뉴클레아제 |
1 0 μg/mL |
~이다 |
솔트 액티브 울트라뉴클레아제 |
1 0 μg/mL |
~이다 |
DNA 분해 효소 1 |
1 0 μg/mL |
~이다 |
쥐 RNase 억제제 |
1 0 μg/mL |
~이다 |
바키니아 캡핑 효소 |
1 0 μg/mL |
~이다 |
무기 피로인산가수분해효소 |
1 0 μg/mL |
~이다 |
mRNA 캡 2´-O-메틸트랜스퍼라제 |
1 0 μg/mL |
~이다 |
1%BSA |
1 0 μg /mL |
~이다 |
표 3. LOQ: 이 제품의 정량 한계는 표준 곡선의 가장 낮은 농도점을 희석하여 결정하는데, 여기서 가장 낮은 농도의 변동 계수(CV)는 20% 미만입니다. 이는 정량 한계로 정의되며, 1 ng/mL입니다.
S td6 이론값 ( ng/mL ) |
표준 6 테스트 평균값 ( ng/mL ) |
테스트 반복 |
이력서 % |
회복 |
1 |
0.858 |
24 |
12.6% |
85.8% |
표 4. LOD: 이 제품의 검출 한계는 음성 대조군(NC)의 평균 검출 값에 해당하는 표준 농도에 표준 편차의 2배를 더한 값으로 정의됩니다. 24개의 NC 표준을 측정하여 평균과 표준 편차를 계산하면 검출 한계는 0.318 ng/mL로 결정됩니다.
평균값 ( OD ) |
SD ( 외경 ) |
평균값 +2SD(OD) |
평균값 +2SD (ng/mL) |
0.0527 |
0.0038 |
0.0604 |
0.3176 |
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