Yeasen GMP-klasse mRNA-enzymen en nucleotiden voor vaccin- en medicijnontwikkeling

Het onderzoek en de formulering van mRNA-vaccins vereisen een divers scala aan grondstoffen om hun succesvolle ontwikkeling te garanderen. Als een pionierende kracht in de moleculaire enzymindustrie, Yeasen heeft succes geboekt bij het creëren van verschillende moleculaire enzymen en reagentia door middel van geavanceerde moleculaire enzymbiotechnologie en grootschalige eiwitfermentatie- en zuiveringstechnieken.

Om zowel de productkwaliteit als de productiecapaciteit te garanderen, Yeasen heeft een GMP-productiefaciliteit in Wuhan opgericht, die volledig kan voldoen aan de eisen voor productie op industriële schaal met een jaarlijkse capaciteit van meer dan 5 miljard eenheden. Bovendien, Yeasen is het eerste Chinese bedrijf dat de ISO 13485-certificering heeft behaald voor onderzoek, ontwikkeling, productie en distributie van moleculaire enzymen. Deze certificering garandeert de kwaliteit, consistentie en traceerbaarheid van al hun reagentia.

1. Voordeel van GMP
2. Yeasen kan GMP-kwaliteitsproducten leveren
3. Yeasen Verkregen DMF-nummers voor veel producten
4. Toepassingsscenario's van Yeasen producten
5. Grondstoffen voor de bereiding van mRNA-vaccins geleverd door Yeasen
6. Bestelgegevens

1. Voordeel van GMP

"GMP-grade" is een merkterm die Yeasen wordt gebruikt om reagentia te beschrijven die worden geproduceerd in ISO 13485-gecertificeerde faciliteiten. YeasenDe GMP-reagentia van worden geproduceerd in overeenstemming met de ISO 13485-normen voor kwaliteitsmanagementsystemen, met strengere procescontroles en volledige documentatieregistraties. Yeasen kunnen niet alleen hoogwaardige reagentia leveren, maar ook documenten, locatie-audits en andere ondersteuning aan onze klanten.

Tabel 1. Voordelen van GMP

2. Yeasen kan GMP-kwaliteitsproducten leveren

Door gebruik te maken van uitgebreide expertise en technische excellentie op het gebied van enzymontwikkeling en productie op industriële schaal, Yeasen heeft een geavanceerde faciliteit opgericht die bekend staat als "mRNAtools." Deze faciliteit, die 50.000 vierkante voet beslaat, voldoet aan de GMP-regelgeving en beschikt over ultramoderne functies, waaronder 2×1500L geautomatiseerde fermentatie-eenheden, grootschalige zuiveringsapparatuur en lyofilisatiemogelijkheden. mRNAtools is toegewijd aan het leveren van strikte reagentia die aansluiten op de productie- en regelgevingsvereisten van de klant.

Yeasen's moleculaire enzymproductiefaciliteit, speciaal gebouwd voor GMP-kwaliteitsproducten, waarborgt de productkwaliteit op zowel hardware- als softwareniveau. Het bestaat uit een zeer bekwaam team van 70 professionals, die allemaal uitgebreide GMP-productie-ervaring hebben. De opslag- en logistieke activiteiten zijn gemodulariseerd, wat zorgt voor veilige opslag en efficiënt transport van producten. Een landelijk multicenter distributienetwerk garandeert bovendien een betrouwbare leveringscyclus.

3. Yeasen Verkregen DMF-nummers voor veel producten

Drug master files (DMF's) zijn vertrouwelijke documenten die vrijwillig worden ingediend bij de Amerikaanse Food & Drug Administration (FDA). Ze bevatten gedetailleerde informatie over faciliteiten, processen of artikelen die worden gebruikt bij de productie, verwerking, verpakking en opslag van humane geneesmiddelen.

De FDA onderzoekt de technische inhoud van een DMF wanneer een fabrikant van een actief farmaceutisch ingrediënt (API) ernaar verwijst ter ondersteuning van hun Investigational New Drug Application (IND), New Drug Application (NDA), Abbreviated New Drug Application (ANDA) of Export Application. DMF's spelen een cruciale rol in deze aanvragen.Wanneer fabrikanten DMF's voor specifieke materialen indienen, kan het FDA-goedkeuringsproces aanzienlijk worden versneld.

Yeasen beschikt over DMF-bestanden die projecttijdlijnen kunnen stroomlijnen. Indien gewenst, kunt u een referentieautorisatie aanvragen bij onze DMF's ter ondersteuning van uw FDA-aanvraag. Om de referentieautorisatie van onze DMF's te initiëren, dient u een verzoek om een ​​autorisatiebrief in te dienen bij Yeasen, met het verzoek om een ​​FDA Center-specifieke DMF Letter of Authorization te verstrekken.

4. Toepassingsscenario's van Yeasen producten

4.1 Sjabloongeneratie

Plasmide-linearisatie is een onmisbare stap tijdens templategeneratie wanneer plasmidevectoren worden gebruikt als transcriptietemplates. Terwijl transcriptie doorgaat tot het einde van DNA-templates, zorgt plasmide-linearisatie ervoor dat RNA-transcripten van een gedefinieerde lengte en sequentie worden gegenereerd. Yeasen biedt verschillende restrictie-enzymen om aan uw behoeften te voldoen. Wij raden aan restrictie-enzymen te selecteren die stompe uiteinden of 5´-overhangen genereren.

4.2 In vitro Transcriptie (IVT)

In vitro transcriptie wordt beïnvloed door verschillende factoren. Enzymen, buffers en gemodificeerde substraten hebben allemaal een grote invloed op de transcriptie-efficiëntie.

Gebaseerd op het ZymeEditor-platform, Yeasen Biotech heeft nieuwe T7 RNA-polymerasen ontwikkeld die de aanmaak van dsRNA tijdens het in vitro transcriptieproces (IVT) aanzienlijk verminderen (T7 RNA-polymerase, laag ds RNA, 250 U/μL). Het verlaagt de immunogeniciteit van mRNA aanzienlijk en verbetert in zekere mate de integriteit van mRNA. Deze ontwikkeling zal naar verwachting een cruciale rol spelen bij het bevorderen van de ontwikkeling van mRNA-vaccins en kankermedicijnen.

Door de buffer te optimaliseren en het zouttype van het nucleotidesubstraat aan te passen, hebben we de transcriptie-efficiëntie aanzienlijk verbeterd en de productie van dsRNA verminderd.

Figuur 2. Tris NTP kan de lVT-efficiëntie aanzienlijk verbeteren en de dsRNA-productie verminderen

4.3 mRNA-afsluiting

Omdat een 5'-capstructuur de immunogeniciteit vermindert en nodig is voor een efficiënte translatie van mRNA's, is het noodzakelijk om capstructuren toe te voegen aan de 5'-uiteinden van mRNA dat door transcriptie wordt gegenereerd.

Figuur 3. Resultaten van de detectie van de cap-rate (LC-MS-detectie)

4.4 mRNA-zuivering

Zuivering is een onmisbare stap om mRNA's met een hoge zuiverheid te verkrijgen.

5. Grondstoffen voor de bereiding van mRNA-vaccins geleverd door Yeasen

Momenteel, Yeasen kan een complete set producten leveren in het productieproces van mRNA-voorraadoplossing. De producten worden strikt gecontroleerd door GMP-productie en voldoen volledig aan de vereisten van mRNA-vaccinproductie.

Tabel 2.Grondstoffen voor de bereiding van mRNA-vaccins geleverd door Yeasen

Sjabloonvoorbereiding		In vitro transcriptie
2× Hieff Canace AdvanceFast High-Fidelity PCR Master Mix	10164ES	T7 High Yield RNA-synthesekit	10623ES
dNTP Set-oplossing	10122ES	T7 RNA-polymerase	10625ES
Hieff Clone Universele One Step Cloning Kit	10922ES	Pyrofosfatase, anorganisch GMP-kwaliteit	10672ES
Goud T4 DNA Ligase	10300ES	Muizen-RNase-remmer van GMP-kwaliteit	10621ES
BspQI GMP-kwaliteit	10664ES	DNase I	10611ES
Bsa ik GMP-kwaliteit	10661ES	NTP Set-oplossing	10133ES
RNAse R (20 U/uL)	14615ES	Pseudo-UTP-natriumoplossing GMP-kwaliteit (100 mM)	10650ES
Xba ik	10662ES	N1-Me-Pseudo UTP natriumoplossing GMP-kwaliteit (100 mM)	10651ES
Afdekken		Zuivering
mRNA Vaccinia Capping Enzyme GMP-kwaliteit	10614ES	Hieff NGS™ RNA-reiniger	12602ES
mRNA-dop 2´-O-methyltransferase GMP-klasse	10612ES	Magnetisch scheidingsrek	80460ES
S-adenosylmethionine (SAM) GMP-kwaliteit	10619ES	Dubbelstrengs RNA (dsRNA) ELISA-kit	36717ES
ARCA (Anti Reverse Cap Analoog)	10681ES

6. Bestelgegevens

Hieronder staan ​​representatieve producten die worden aangeboden door YeasenEr zijn nog andere maten beschikbaar.Onze producten zijn zeer geoptimaliseerd om samen te werken, om superieure prestaties en reproduceerbaarheid te helpen garanderen. We kunnen ook aangepaste services leveren. Als u geïnteresseerd bent in een product dat niet wordt getoond, neem dan contact met ons op en we werken met u samen om aan uw behoeften te voldoen.

Tabel 3. Bestelgegevens

Over het lezen:

GMP-kwaliteit reagentia voor mRNA in vitro synthese

DNase I en hun toepassingen in de biomedische wetenschap

Referenties:

[1] Chaudhary, N., Weissman, D., & Whitehead, KA (2021). mRNA-vaccins voor infectieziekten: principes, toediening en klinische vertaling. Nature reviews. Medicijnontdekking, 20(11), 817–838.
[2] Vogel, AB et al. Zelfversterkende RNA-vaccins bieden een gelijkwaardige bescherming tegen influenza als mRNA-vaccins, maar
bij veel lagere doses. Moleculaire therapie: het tijdschrift van de American Society of Gene Therapy 26, 446-455,
[3] Fuchs, AL, Neu, A. & Sprangers, R. Een algemene methode voor snelle en kostenefficiënte grootschalige productie van 5'
afgedekte RNA. RNA (New York, NY) 22, 1454-1466, doi:10.1261/rna.056614.116 (2016).
[4] Schmidt, A.Overwegingen voor het produceren van mRNA-vaccins voor klinische proeven. Methoden in moleculaire biologie (Clifton, NJ) 1499, 237-251,
[5] Banerji, A. et al. mRNA-vaccins ter voorkoming van COVID-19-ziekte en gerapporteerde allergische reacties: huidig ​​bewijs en voorgestelde aanpak. Het tijdschrift voor allergie en klinische immunologie. In practice 9, 1423-1437,
[6] Richner, JM et al. Gemodificeerde mRNA-vaccins beschermen tegen Zika-virusinfectie. Cel 168, 1114-1125.e1110,
[7] Corbett, KS et al. SARS-CoV-2 mRNA-vaccinontwerp mogelijk gemaakt door prototype pathogeenparaatheid. Nature 586,567-571,
[8] Corbett, KS et al. mRNA-1273 beschermt tegen SARS-CoV-2 bèta-infectie bij niet-menselijke primaten. Nature immunology 22, 1306-1315,
[9] Keech, C. et al. Fase 1-2-onderzoek naar een SARS-CoV-2 recombinant spike-eiwit-nanodeeltjesvaccin. The New England journal of medicine 383, 2320-2332,
[10] Kramps, T. & Elbers, K. Inleiding tot RNA-vaccins. Methoden in moleculaire biologie (Clifton, NJ) 1499, 1-11,
[11] Linares-Fernández, S., Lacroix, C., Exposito, JY & Verrier, B. Het aanpassen van mRNA-vaccin om de aangeboren/adaptieve immuunrespons in evenwicht te brengen. Trends in moleculaire geneeskunde 26, 311-323,