Celltransfektionsreagenser har blivit rutinmässiga reagenser för att studera och kontrollera genfunktion i eukaryota celler. Transfektionsreagenser används i stor utsträckning inom genfunktionsforskning, genuttrycksreglering och mutationsanalys, såväl som genterapi, cellterapi, proteinproduktion och vaccinproduktion. Så vad är transfektion? Och hur väljer man ett slags transfektionsreagens baserat på dina experiment?

Vilka typer av transfektion finns det?

Funktionerna hos transfektionsreagenser från Yeasen

Hur väljer man ett slags transfektionsreagens baserat på dina experiment?

Ansökningsärende

Referens för transfektionsförhållanden

Vanliga frågor

Hälsning läsning

Vilka typer av transfektion finns det?

Beroende på om nukleinsyran är integrerad i värdcellskromosomen efter transfektion delas den in i "transient" (transient transfektion) och "stabil" (stabil transfektion). Transfektionseffektiviteten, cytotoxiciteten, effekterna på normal fysiologi och genuttrycksnivåerna för olika transfektionsmetoder är olika. Principerna, tillämpningarna och egenskaperna jämförs i följande tabell:

Tabell 1 Jämförelse av olika transfektionsmetoder

Funktionerna hos transfektionsreagens från Yeasen

För DNA-transfektionsreagenser och RNA-transfektionsreagenser har Yeasen Biotechnology ett starkt FoU- och produktionsteam, optimerar kontinuerligt formler, förbättrar produktionsprocesser och har lanserat en mängd olika produkter baserade på katjoniska liposomer och katjoniska polymerer. Vetenskapliga forskningsinstitutioner och företag tillhandahåller ett komplett utbud av produkter, och produktlinjen täcker alla områden som är involverade i transfektionsreagenser.

• Hög effektivitet: lämplig för transient transfektion eller stabil transfektion av cellinjer.
• Låg toxicitet: Transfekterade celler förblir väl viabla.
• Bred anpassningsförmåga: omfattande täckning av vanliga celler och svårtransfekterade primära celler.
• Lätt att använda: lämplig för medium i närvaro av serum, utan att byta medium före och efter transfektion.
• Kostnadseffektivt: ekonomiskt och praktiskt, hög transfektionseffektivitet, lågt pris.

Hur väljer man ett slags transfektionsreagens baserat på dina experiment?

Valet av transfektionsreagens måste väljas i enlighet med de olika experimentella syftena och experimentella innehållet, såsom de transfekterade substanserna, specifika celler, användarvänlighet och andra faktorer.

Ansökningsärende

Hieff Trans™ Liposomal Transfektionsreagens

Hieff Trans™ levereras i steril flytande form. I allmänhet, för 24-brunnars platttransfektion, cirka 1,5 μL varje gång, 1 mL Hieff Trans™ kan göra cirka 660 transfektioner; för 6-brunnars platta, cirka 6 μL varje gång, 1 mL Hieff Trans™ kan göra cirka 660 transfektioner. 160 transfektioner;

För mer information, se Förtroende för transfektion med Hieff Trans™ Lipofectamine Reagent

Polyetylenimin linjär (PEI) MW40000 (snabb lysis)

PEI 40000 är en högladdad katjonisk polymer med en molekylvikt på 40 000 som binder negativt laddade nukleinsyramolekyler mycket lätt, bildar ett komplex och låter komplexet komma in i cellerna. PEI 40000 är ett transient transfektionsreagens med låg cytotoxicitet, hög transfektionseffektivitet och hög genuttryckseffektivitet i celler som HEK293 och CHO. Linjära PEI-transfektionsreagenser har validerats för ett brett spektrum av cellinjer inklusive HEK-293, HEK293T, CHO-K1, COS-1, COS-7, NIH/3T3, Sf9, HepG2 och Hela-celler. Transfektionseffektiviteten är så hög som 80% ~ 90%.

För mer information, se Ny favorit för transfektion —— Linear PEI MW 40000, ett mer effektivt transfektionsreagens

Hieff Trans™ in vitro siRNA/miRNA-transfektionsreagens

Denna produkt kan uppnå över 90 % uttryckseffektivitet av 1 nM siRNA i ett brett spektrum av cellinjer, vilket undviker effekter utanför målet. Lämplig för transfektion av en mängd olika celler, inklusive Hela, MCF-7, HepG2, CHO och andra vidhäftande celler; och svårtransfekterade suspensionscellinjer, såsom K562- eller THP-1-celler, kan uppnå 80 % tystnadseffektivitet; Inklusive vissa primära celler, primära humana fibroblaster och primära humana hepatocyter, etc., kan en tystnadseffektivitet på 80 % uppnås.

Referens för transfektionsförhållanden

Förutom instruktionerna för varje produkt arbetar kunderna efter sitt specifika experimentella innehåll, och det kommer att finnas olika skillnader i användningsmängden. Enligt de in vitro-celltransfektionsförhållanden som rapporterats av kunder efter användning av produkten, har de sorterats ut för din referens.

Vanliga frågor

1 Hieff Trans™ liposomalt transfektionsreagens

1.1 F: Kan serum finnas när man bereder nukleinsyratransfektionsreagenskomplex?

S: Närvaron av serum kommer att påverka bildandet av liposomer. Det rekommenderas att använda ett serumfritt medium (vanligen MEM-medium) vid beredning av nukleinsyratransfektionsreagenskomplex.

1.2 F: Vad ska jag vara uppmärksam på när jag använder Hieff Trans™ Liposomal Nucleic Acid Transfection Reagent?

A:

1) När cellerna transfekteras är celldensiteten företrädesvis 80%-95%, och den specifika pläteringsdensiteten bestäms i enlighet med cellernas situation;

2) Att använda högrent DNA hjälper till att erhålla högre transfektionseffektivitet;

3) DNA och transfektionsreagens måste spädas med det serumfria mediet vid framställning av transfektionskomplex;

4) Antibiotika kan inte tillsättas till mediet under transfektion;

5) Reagenser bör förvaras vid 2-8°C, och försiktighet bör iakttas för att undvika att locket öppnas upprepade gånger under en längre tid;

6) DNA-koncentrationen och antalet katjoniska liposomreagenser bör optimeras för den första användningen för att erhålla maximal transfektionseffektivitet. Förhållandet mellan DNA och transfektionsreagens rekommenderas i allmänhet att vara 1:2-1:3.

1.3 F: Behöver den avslutas efter transfektion?

A: Inget behov. Liposomkomplex är stabila i 6 timmar. Om cellmediet inte byts före transfektion, för att säkerställa de näringsämnen som krävs för normal celltillväxt, är det nödvändigt att byta till ett nytt medium efter 4-6 timmar. Men om mediet har bytts före transfektion är det inte nödvändigt att byta medium efter liposomtransfektion.

1.4 F: Kan samtransfektion av DNA och siRNA utföras? Hur är effekten?

S: Ja, när DNA och siRNA samtransfekteras blir siRNA-transfektionseffektiviteten något sämre.

1.5 F: Kan transfektionsreagenset användas för transfektion av lentivirala förpackningar?

S: Lentiviral förpackning är möjlig.

1.6 F: Kan suspensionsceller transfekteras med Hieff Trans™ liposomalt nukleinsyratransfektionsreagens?

S: Hieff Trans™ liposomnukleinsyratransfektionsreagens kan användas för suspensionscelltransfektion, se protokoll för detaljer. Dessutom introducerade vi också ett transfektionsreagens specifikt för suspensionsceller (kat nr.40805, Hieff Trans™ suspensionscellfritt liposomalt transfektionsreagens)

2 Hieff Trans™ in vitro siRNA/miRNA-transfektionsreagens

2.1 F: Måste transfektionsreagenset bytas efter transfektion?

S: Detta problem kan delas upp i två fall: 1. Om det inte finns någon mediumförändring före transfektion, bör mediet bytas cirka 6 timmar efter transfektion för att säkerställa de näringsämnen som krävs för celltillväxt; 2. Om det finns en mediumförändring före transfektion, kan den drivas enligt normal drift av odlade celler? ? Efter vätskebytesoperationen?

2.2 F: Kan transfektionsreagenser frysas?

S: Det kan inte frysas, eftersom transfektionsreagenset är ett katjoniskt PEI-transfektionsreagens. Frysning vid låga temperaturer kommer att förstöra aktiviteten hos PEI-transfektionsreagenset. Därför är det bäst att förvara den vid 2-8 °C för att upprätthålla den bästa transfektionen. effektivitet.

Produktinformation

Några av artiklarna publicerade med våra produkter

[1] Liu R, Yang J, et al. Optogenetisk kontroll av RNA-funktion och metabolism med hjälp av konstruerade ljusomkopplingsbara RNA-bindande proteiner. Nat Biotechnol. 3 januari 2022. (IF:55)

[2] Luo J, Yang Q, et al. TFPI är en kolonkryptreceptor för TcdB från hypervirulent clade 2 C. difficile. Cell. 17 mars 2022 (IF:41.582)

[3] Zhou J, Chen P, et al. Cas12a-varianter designade för lägre genomomfattande effekt utanför målet genom strikt PAM-igenkänning. Mol Ther. 5 januari 2022 (IF:11.454)

[4] Chen S, Cao X, et al. circVAMP3 driver CAPRIN1 fasseparation och hämmar hepatocellulärt karcinom genom att undertrycka c-Myc Translation. Adv Sci (Weinh). 2022 24 januari (IF:16.808)

[5] Gu C, Wang Y, et al. AHSA1 är ett lovande terapeutiskt mål för cellulär proliferation och proteasominhibitorresistens vid multipelt myelom. J Exp Clin Cancer Res. 6 januari 2022.(IF:11.161)

[6] Zhang Y, Yu X, et al. Splitsningsfaktor arginin/serinrik 8 främjar multipelt myelom malignitet och benskada genom alternativ splitsning av CACYBP och exosombaserad cellulär kommunikation. Clin Transl Med. 2022 februari (IF:11.492)

[7] Qin J, Cai Y, et al. Molekylär mekanism för agonism och omvänd agonism i ghrelinreceptor. Nat Commun. 13 januari 2022.(IF:14.9)

[8] Tang X, Deng Z, et al.Ett nytt protein som kodas av circHNRNPU främjar multipelt myelomprogression genom att reglera benmärgens mikromiljö och alternativ splitsning. J Exp Clin Cancer Res. 8 mars 2022 (IF:11.161)

[9] Xie F, Su P, et al. Tekniska extracellulära vesiklar berikade med palmitoylerad ACE2 som COVID-19-terapi. Adv Mater. 19 oktober 2021. (IF:30.849)

[10] Liang Y, Lu Q, et al. Reaktivering av tumörsuppressor i bröstcancer genom förstärkarbyte genom NamiRNA-nätverk. Nucleic Acids Res. 7 september 2021 (IF:16,9)

[11] Fan Y, Wang J, et al. CircNR3C2 främjar HRD1-medierad tumörsuppressiv effekt via sponging miR-513a-3p i trippelnegativ bröstcancer. Mol Cancer. 2 februari 2021 (IF:27.403)

[12] Dai L, Dai Y, et al. Strukturell insikt i BRCA1-BARD1 komplex rekrytering till skadat kromatin. Mol Cell. 1 juli 2021 (IF:17.97)

[13] Zhang K, Wang A, et al. UBQLN2-HSP70-axeln reducerar poly-Gly-Ala-aggregat och lindrar beteendedefekter i C9ORF72-djurmodellen. Neuron. 16 juni 2021.(IF:17.17)

[14] Li T, Chen X, et al. En syntetisk BRET-baserad optogenetisk enhet för pulserande transgenuttryck som möjliggör glukoshomeostas hos möss. Nat Commun. 2021 27 januari (IF:14,92)

[15] Yan F, Huang C, et al. Treonin ADP-ribosylering av ubiquitin av en bakteriell effektorfamilj blockerar värd ubiquitinering. Mol Cell. 21 maj 2020.(IF:17.97)

[16] Sun X, Peng X, et al. ADNP främjar neural differentiering genom att modulera Wnt/β-catenin-signalering. Nat Commun. 12 juni 2020.(IF:14.911)

[17] Yang X, Wang H, et al. Omkoppling av ERBB3- och ERK-signalering ger resistens mot FGFR1-hämning i mag-tarmcancer med en ERBB3-E928G-mutation. Proteincell. 2020 dec.(IF:14.872)

[18] Zou Y, Wang A, et al. Analys av redoxlandskap och dynamik i levande celler och in vivo med hjälp av genetiskt kodade fluorescerande sensorer. Nat Protoc. 2018 oktober (IF:13.490)

[19] Hao H, Hu S, et al. Förlust av endotelial CXCR7 försämrar vaskulär homeostas och hjärtombyggnad efter hjärtinfarkt: konsekvenser för kardiovaskulär läkemedelsupptäckt. Omlopp. 28 mars 2017 (IF:29.69)

Hälsning läsning

Transfektionsreagens – Hieff Trans™ och PEI

Linear PEI MW 40000, ett mer effektivt transfektionsreagens