Giải pháp tổng thể để phát hiện virus đậu mùa khỉ Yeasen

Trường hợp đầu tiên được xác nhận mắc bệnh đậu mùa khỉ được báo cáo tại Anh vào đầu tháng 5 và nhanh chóng bùng phát ở các quốc gia và khu vực không lưu hành. Tính đến ngày 21 tháng 9 năm 2022, 106 quốc gia/khu vực đã được xác nhận trên toàn thế giới, với tổng số 63.117 trường hợp. Vào ngày 16 tháng 9, Trùng Khánh xác nhận một trường hợp đậu mùa khỉ nhập khẩu, trường hợp đầu tiên ở Trung Quốc đại lục, gây lo ngại cho xã hội.

Figure 1. 2022 Monkeypox Outbreak Global Map(From the CDC)

Hình 1. Bản đồ bùng phát bệnh đậu mùa khỉ toàn cầu năm 2022 (Theo CDC)

1. Bệnh đậu mùa khỉ là gì?
2. Lịch sử của bệnh đậu mùa khỉ
3. Cách lây lan
4. Dấu hiệu và triệu chứng
5. Phương pháp phát hiện
6. Phù hợp sản phẩm
7. Đặt hàng sản phẩm

1. Bệnh đậu mùa khỉ là gì?

Virus đậu khỉ là một loại virus DNA sợi đôi có tổng chiều dài khoảng 197kb. Nó thuộc chi Orthopoxvirus của họ Poxviridae. Virus). Có hai nhánh của virus đậu khỉ (nhánh Tây Phi và nhánh lưu vực Congo). Trong số đó, tỷ lệ tử vong của nhánh Tây Phi là khoảng 3,6% và tỷ lệ tử vong của nhánh lưu vực Congo có thể lên tới 10,6%. Các mẫu trường hợp đậu khỉ được tìm thấy ở các khu vực không lưu hành kể từ tháng 5 năm 2022, phân tích trình tự cho thấy nhánh Tây Phi[1].

Figure 2. Monkeypox picture (picture from CCDC)

Hình 2. Hình ảnh bệnh đậu mùa khỉ (hình ảnh từ CCDC)

2. Lịch sử của bệnh đậu mùa khỉ

Bệnh đậu mùa khỉ được phát hiện vào năm 1958 khi hai đợt bùng phát của một căn bệnh giống đậu mùa xảy ra ở các đàn khỉ được nuôi để nghiên cứu. Mặc dù được gọi là "đậu mùa khỉ", nguồn gốc của căn bệnh này vẫn chưa được biết. Tuy nhiên, các loài gặm nhấm châu Phi và các loài linh trưởng không phải người (như khỉ) có thể chứa vi-rút và lây nhiễm cho người[2].
Trường hợp đầu tiên mắc bệnh đậu khỉ ở người được ghi nhận vào năm 1970. Trước đợt bùng phát năm 2022, bệnh đậu khỉ đã được báo cáo ở người tại một số quốc gia Trung và Tây Phi. Trước đây, hầu hết các trường hợp đậu khỉ ở người bên ngoài Châu Phi đều liên quan đến việc đi du lịch quốc tế đến các quốc gia thường xảy ra bệnh này hoặc thông qua động vật nhập khẩu. Những trường hợp này xảy ra ở nhiều châu lục[2].

3. Cách lây lan

Bệnh có thể lây lan từ động vật sang người, từ người sang người và từ môi trường sang người.
Hiện nay đã rõ ràng rằng bệnh đậu mùa khỉ có thể lây nhiễm cho người theo 3 cách: Một là từ động vật bị nhiễm sang người. Vi-rút có thể xâm nhập vào cơ thể qua da bị trầy xước, đường hô hấp hoặc niêm mạc (mắt, mũi hoặc miệng). Thứ hai là lây truyền qua tiếp xúc gần giữa người với người, bao gồm quan hệ tình dục, hôn, ôm hoặc chạm vào các bộ phận cơ thể của bệnh đậu mùa khỉ, và tiếp xúc với quần áo, khăn trải giường, khăn tắm hoặc đồ dùng trên bàn ăn bị nhiễm vi-rút và các vật dụng khác cũng có thể bị nhiễm. Thứ ba là lây truyền các giọt hô hấp[3].

4. Dấu hiệu và triệu chứng

Các biểu hiện lâm sàng chính là sốt, phát ban và nổi hạch.
Các triệu chứng phổ biến nhất ở giai đoạn đầu bao gồm sốt, nhức đầu, đau nhức cơ và sưng hạch bạch huyết. Phát ban xuất hiện từ 1 đến 3 ngày sau khi bệnh khởi phát. Phát ban điển hình đầu tiên xuất hiện trên mặt và dần dần lan ra các chi và các bộ phận khác. Phát ban chủ yếu là ly tâm., phát ban ở mặt và chân tay phổ biến hơn ở thân mình, phát ban có thể xuất hiện ở lòng bàn tay và lòng bàn chân, và số lượng phát ban thay đổi từ vài đến hàng nghìn; nó cũng có thể liên quan đến niêm mạc miệng, đường tiêu hóa, bộ phận sinh dục, kết mạc và giác mạc.
Các triệu chứng thường kéo dài từ 14 đến 21 ngày và bệnh nhân thường tự khỏi. Ban đỏ hoặc tăng sắc tố hoặc thậm chí là sẹo có thể vẫn còn sau khi vảy bong ra. Cần lưu ý rằng vảy vẫn có khả năng lây nhiễm cho đến khi vảy bong ra và một lớp da mới hình thành bên dưới[3].

5. Phương pháp phát hiện

Để phòng ngừa và kiểm soát hiệu quả dịch bệnh đậu mùa khỉ và ngăn chặn virus xâm nhập và lây lan, các công ty IVD toàn cầu đã tích cực ứng phó. Là nhà cung cấp nguyên liệu sản xuất thuốc thử phát hiện IVD và dung dịch thuốc thử, Yeasen cung cấp giải pháp hoàn chỉnh giúp phát hiện hiệu quả virus đậu mùa khỉ. Từ chiết xuất axit nucleic đến các thành phần thuốc thử (thuốc thử enzyme và pseudovirus), và bộ dụng cụ bán thành phẩm (mồi dò, thuốc thử enzyme và kiểm soát plasmid), Yeasen có thể cung cấp cho bạn một cách ổn định.

Figure 3. Virus detection method

Hình 3. Phương pháp phát hiện virus

5.1 Ưu điểm của phương pháp

  • Hoạt động hiệu quả và thuận tiện—một bộ dụng cụ, bao gồm tất cả các thành phần, không cần thao tác rườm rà, bổ sung một bước
  • Độ nhạy phát hiện cao—Phương pháp kháng thể biến đổi gen khởi động nóng Enzym Taq, 1 bản sao/phản ứng cũng có thể được phát hiện
  • Độ ổn định thuốc thử mạnh—Bảo quản ở 37℃ trong 1 tuần, hiệu suất ổn định sau nhiều lần đông lạnh và rã đông
  • Phòng ngừa ô nhiễm UDG—Hệ thống dUTP/UDG được bổ sung vào hệ thống để ngăn ngừa hiệu quả nguy cơ ô nhiễm khí dung.
  • Áp dụng cho nhiều nền tảng—Thích hợp cho Bio-Rad CFX96, ABI Q5 và Slan

5.2 Sản phẩm phù hợp

  • Thuốc thử chiết xuất axit nucleic: MolPure™ Bộ dụng cụ lấy mẫu DNA/RNA virus bằng tăm bông từ tính (Mã số: 18300ES)
  • Thuốc thử phát hiện bệnh đậu khỉ: Bộ dụng cụ qPCR thời gian thực virus đậu mùa khỉ(Mã số: 13862ES/Mã số: 13863ES)
  • Pseudovirus Monkeypox: Pseudovirus virus Monkeypox(Cat#12099ES/Cat#12100ES)

6. Sản phẩm được đề xuất

6.1 Bộ xét nghiệm virus đậu khỉ qPCR thời gian thực (Mã số: 13862ES)

Ưu điểm của sản phẩm:
Hoạt động hiệu quả và tiện lợi
Độ nhạy cao và độ đặc hiệu tốt
Siêu ổn định
Độ lặp lại tốt

6.1.1 Trường hợp trình bày:

  • Độ ổn định nhiệt siêu cao ở 37℃

MPXV được khuếch đại bằng cách đặt Cat#13862ES ở 37℃ trong 7 ngày. Kết quả cho thấy giá trị Ct và giá trị huỳnh quang không bị ảnh hưởng đáng kể trong 7 ngày ở 37℃ và độ ổn định nhiệt mạnh.

Figure 4. Yeasen(Cat#13862ES)37℃ accelerated 7-day stability verification

Hình 4. Yeasen (Cat#13862ES) Xác minh độ ổn định tăng tốc 37℃ trong 7 ngày

  • Độ ổn định đông lạnh-tan băng tuyệt vời

MPXV được khuếch đại bằng cách đông lạnh và rã đông Cat#13862ES ở nhiệt độ -20℃ lần lượt là 10 lần, 20 lần và 50 lần.Kết quả cho thấy việc đông lạnh và rã đông 10 lần, 20 lần và 50 lần ở nhiệt độ -20℃ không ảnh hưởng đáng kể đến giá trị Ct và giá trị huỳnh quang, độ ổn định đông lạnh và rã đông rất mạnh.

Figure 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ freeze-thaw stability verification

Hình 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ xác minh độ ổn định đóng băng-tan băng

  • Độ nhạy cực cao, 1 bản sao/μL cũng có thể được phát hiện

Sử dụng Yeasen Sản phẩm đậu khỉ (Cat#13862ESES), 1000 bản sao/μL, 100 bản sao/μL, 10 bản sao/μL, 1 bản sao/μL và mẫu trắng âm tính (NTC) đã được sử dụng để phát hiện MPXV. Có thể thấy rằng một bản sao duy nhất cũng có thể được phát hiện (giá trị Ct khoảng 38) và Thử nghiệm NTC 48 giếng đã được lặp lại, với đường cơ sở ổn định, đỉnh NTC âm tính và không có hiện tượng đuôi, với độ nhạy cao và độ đặc hiệu cao.

Figure 6. MPXV sensitivity detection

Hình 6. Phát hiện độ nhạy MPXV

Figure 7. MPXV specificity detection

Hình 7. Phát hiện đặc hiệu MPXV

  • Thuốc thử ổn định và có thể tái tạo

Các Yeasen Bộ dụng cụ phát hiện bệnh đậu khỉ (Mã số: 13862ESES) được chọn để thực hiện 10 lần thử nghiệm lặp lại đối với nồng độ mẫu dương tính thấp, trung bình và cao. Kết quả cho thấy CV của mẫu dương tính trong kênh FAM nhỏ hơn hoặc bằng 2% và mẫu đối chứng trắng không có hiện tượng đỉnh và đuôi. , độ lặp lại tốt.

Figure 8. Repeatability Test

Hình 8. Kiểm tra khả năng lặp lại

6.2 Bộ xét nghiệm virus đậu mùa khỉ thời gian thực qPCR (UDG Plus)(Mã số: 13863ES)

Ưu điểm của sản phẩm:

⑴ Hoạt động hiệu quả và tiện lợi
⑵ Độ nhạy cao và độ đặc hiệu tốt
⑶ Độ ổn định cao
⑷ Độ lặp lại tốt
⑸ Phòng ngừa ô nhiễm UDG

6.2.1 Trường hợp trình bày:

  • Độ ổn định nhiệt siêu cao ở 37℃

MPXV được khuếch đại bằng cách đặt Cat#13863ES ở 37℃ trong 7 ngày và 14 ngày. Kết quả cho thấy sau 7 ngày và 14 ngày ở 37℃, không có tác động đáng kể nào đến giá trị Ct và giá trị huỳnh quang, và độ ổn định nhiệt mạnh.

Figure 9. Yeasen(Cat#13863ES)37℃ accelerated 7-day, 14-day stability verification

Hình 9. Yeasen(Cat#13863ES) Xác minh độ ổn định tăng tốc 37℃ trong 7 ngày, 14 ngày

  • Độ ổn định đông lạnh-tan băng tuyệt vời

Cat#13863ES được đông lạnh và rã đông ở -20℃ trong 50 lần để khuếch đại MPXV. Kết quả cho thấy đông lạnh và rã đông ở -20℃ trong 50 lần không có tác động đáng kể đến giá trị Ct và giá trị huỳnh quang, độ ổn định đông lạnh và rã đông rất mạnh.

Figure 10. Yeasen(Cat#13863ES)-20℃ freeze-thaw stability verification

Hình 10. Yeasen(Mã số # 13863ES) Xác minh độ ổn định đóng băng-tan băng ở nhiệt độ -20℃

  • Độ nhạy và độ đặc hiệu cao

5 bản sao/μL MPXV và mẫu trắng âm tính (NTC) đã được thử nghiệm bằng cách sử dụng Yeasen sản phẩm đậu khỉ (Cat#13863ESES). Kết quả cho thấy đường cơ sở ổn định, tỷ lệ phát hiện FAM là 100%, giới hạn phát hiện tối thiểu là 5 bản sao/μL và trong quá trình thử nghiệm lặp lại 48 giếng của NTC, đường cơ sở của kênh FAM và VIC ổn định, đỉnh âm tính của NTC không có hiện tượng đuôi và có Độ nhạy cao và độ đặc hiệu cao.

Figure 11.MPXV Sensitivity detection

Hình 11. Phát hiện độ nhạy MPXV

Figure 12. MPXV specificity detection

Hình 12. Phát hiện đặc hiệu MPXV

  • Độ tuyến tính tốt của thuốc thử

Mẫu dương tính được pha loãng 10 lần từ nồng độ 1×105 bản sao/μL và Yeasen Bộ kit qPCR monkeypox (Cat#13863ES) được sử dụng để lặp lại quá trình phát hiện hai lần. Logarit của số bản sao ban đầu là trục hoành, và giá trị Ct là trục tung. Đường cong chuẩn được tạo ra và kết quả cho thấy kênh FAM của gen monkeypox có phạm vi tuyến tính là 10~1×105 bản sao/μL và R2>0,99, có mối quan hệ tuyến tính tốt.

Figure 13. Linearity Test

Hình 13. Kiểm tra tính tuyến tính

  • Thuốc thử ổn định và có thể tái tạo

Các Yeasen Bộ dụng cụ qPCR monkeypox (Cat#13863ES) được chọn để thực hiện 10 xét nghiệm lặp lại đối với nồng độ dương tính thấp, trung bình và cao, và 20 xét nghiệm lặp lại đối với đối chứng âm tính (NC) và đối chứng trắng (NTC). Kết quả cho thấy: Kênh FAM CV của các mẫu dương tính nhỏ hơn 3%, đối chứng âm tính và đối chứng trắng không có hiện tượng đỉnh và không có đuôi; các giá trị Ct của kênh VIC NC đều nhỏ hơn 35, CV nhỏ hơn 0,3% và NTC không có đỉnh và không có đuôi, độ lặp lại tốt.

Figure 14. Repeatability Test(FAM)

Hình 14. Kiểm tra khả năng lặp lại (FAM)

Figure 15. Repeatability Test(VIC)

Hình 15. Kiểm tra khả năng lặp lại (VIC)

7. Đặt hàng sản phẩm

Yeasen Công ty TNHH Công nghệ sinh học (Thượng Hải) được thành lập vào năm 2014, là một doanh nghiệp công nghệ cao tham gia vào hoạt động R&D và sản xuất nguyên liệu enzyme công cụ và kháng thể kháng nguyên. Các sản phẩm của công ty bao gồm enzyme chẩn đoán phân tử, protein và kháng thể được sử dụng trong dược phẩm, thử nghiệm an toàn thực phẩm, chăn nuôi, tư pháp và các ngành công nghiệp khác. Chúng tôi cam kết cung cấp cho khách hàng trong lĩnh vực khoa học sự sống các sản phẩm và dịch vụ chất lượng cao. Hướng dẫn mua sản phẩm cho Virus đậu mùa khỉ như sau:

Bảng 1.Sản phẩm liên quan

Loại sản phẩm

Sản phẩm Sự miêu tả

Sản phẩm Tên

Số bài viết

Đặc điểm kỹ thuật

BỘ DỤNG CỤ

Hỗn hợp Enzym

Bộ dụng cụ qPCR thời gian thực virus đậu mùa khỉ (yêu cầu)

13862ES03

24T

13862ES48

48T

13862ES59

96T

Bộ xét nghiệm virus đậu mùa khỉ qPCR thời gian thực

13863ES25

25T

13863ES60

100T

13863ES80

1000T

Vi-rút giả

Gen F3L

Virus đậu khỉ F3L-Pseudovirus (yêu cầu)

12099ES03

1mL

12099ES08

5 × 1 mL

B6R Gen

Virus đậu khỉ B6R-Pseudovirus (hỏi thăm)

12100ES03

1mL

12100ES08

5 × 1 mL

Tài liệu tham khảo

[1] Trung tâm Kiểm soát và Phòng ngừa Dịch bệnh Trung Quốc: Mẹo phòng ngừa bệnh đậu mùa khỉ
[2] CDC:Về bệnh đậu mùa khỉ | Đậu mùa khỉ | Virus đậu mùa | CDC
[3] Tin tức buổi tối Yulin: Đã xác định được nguồn gốc của ca bệnh đậu mùa khỉ đầu tiên ở Trung Quốc đại lục! Nhắc nhở khẩn cấp về kiểm soát dịch bệnh Quảng Tây

Cuộc điều tra