Axit nucleic đóng vai trò là nền tảng của mọi nghiên cứu sinh học phân tử. Hơn nữa, chất lượng axit nucleic chiết xuất cũng là một trong những yếu tố chính quyết định sự thành công hay thất bại của các thí nghiệm hạ nguồn. Khi phát triển thuốc thử chiết xuất axit nucleic, ngoài các thành phần hóa học thông thường, một số axit nucleic phân tử nhỏ hoặc enzyme có thể cải thiện đáng kể hiệu quả chiết xuất hoặc loại bỏ sự can thiệp của các chất không phải mục tiêu và trở thành thành phần quan trọng trong chiết xuất axit nucleic.
Về các chất phụ trợ cho quá trình kết tủa axit nucleic
RNA vận chuyển
- Khái niệm và chức năng của RNA vận chuyển
RNA vận chuyển, còn được gọi là chất hỗ trợ kết tủa axit nucleic trong tiếng Trung. Trong quá trình chiết xuất axit nucleic, các ống ly tâm được sử dụng để chiết xuất chủ yếu được làm bằng polypropylen. Có tĩnh điện trên thành ống, sẽ hấp thụ axit nucleic. Sử dụng RNA vận chuyển trong quá trình chiết xuất và tinh chế có thể giúp axit nucleic loại bỏ hiệu ứng tĩnh điện, đảm bảo axit nucleic có thể được hấp thụ tốt vào cột tinh chế, cải thiện hiệu quả rửa giải và do đó đạt được khả năng thu hồi axit nucleic trong mẫu càng nhiều càng tốt.
- Các loại RNA vận chuyển phổ biến
Là chất hỗ trợ cho quá trình kết tủa axit nucleic, RNA vận chuyển có nhiều loại như muối kali PolyA, tổng RNA E. coli, tổng RNA nấm men, tRNA, v.v.
- Các vấn đề thường gặp khi sử dụng RNA vận chuyển
RNA mang có thể vẫn được sử dụng sau khi để ở nhiệt độ phòng trong một khoảng thời gian không? Sự phân hủy của RNA mang có ảnh hưởng đến việc sử dụng nó không? RNA mang có ảnh hưởng đến các thí nghiệm tiếp theo không?
Carrier RNA được hòa tan trong chất bảo vệ RNA. Carrier RNA dạng lỏng có ít tác động khi được đặt ở nhiệt độ 37°C hoặc nhiệt độ phòng trong thời gian ngắn (trong vòng 7 ngày). Về cơ bản, Carrier RNA là một đoạn trong khoảng từ 500 nt đến 1000 nt. Sự suy thoái nhẹ không ảnh hưởng đến việc sử dụng bình thường. Đối với các ứng dụng hạ nguồn như PCR định lượng huỳnh quang, Carrier RNA không ảnh hưởng đến giá trị Ct. Đối với các ứng dụng hạ nguồn như NGS, nó có thể được thêm vào theo nhu cầu thực tế.
- Giới thiệu sản phẩm của RNA vận chuyển
Tên sản phẩm | Sản phẩm Con số | Đặc điểm kỹ thuật | Điều kiện bảo quản và thời hạn sử dụng |
RNA vận chuyển, 6 μg/μL | 19701ES | 1mL / 5mL / 100mL | Bảo quản ở nhiệt độ từ -25 đến -15 °C. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
Bột RNA vận chuyển, 216 μg/ống | 19703ES | 1 ống / 100 ống / 1000 ống | Bảo quản ở nhiệt độ phòng. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
19704ES | 1 ống / 100 ống / 1000 ống | Bảo quản ở nhiệt độ phòng. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
Dung dịch acrylamide tuyến tính
- Khái niệm và chức năng của dung dịch acrylamide tuyến tính
Linear acrylamide, tên tiếng Anh là Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide, viết tắt là LPA), là chất đồng kết tủa giúp kết tủa axit nucleic trong quá trình tinh chế axit nucleic.
- Đặc điểm của dung dịch acrylamide tuyến tính
Đây là chất mang trung tính và không có nguồn gốc sinh học. Do đó, nó không chứa axit nucleic hoặc nhiễm nuclease tiềm ẩn.
Nó sẽ không can thiệp vào các chỉ số A260/A280 và sẽ không ức chế hoạt động của polymerase và endonuclease hạn chế.
Nó tương thích với các ứng dụng sinh học phân tử khác sau này như PCR và tiêu hóa bằng enzym.
Nó có thể hỗ trợ kết tủa DNA và RNA ở mức picogram trở lên (bao gồm Oligo). Chiều dài đoạn có thể phục hồi là trên 20 nucleotide và cả axit nucleic mạch đơn và mạch đôi đều có thể áp dụng.
- Giới thiệu sản phẩm
Tên sản phẩm | Sản phẩm Con số | Đặc điểm kỹ thuật | Điều kiện bảo quản và thời hạn sử dụng |
Dung dịch Acrylamide tuyến tính (5 mg/mL) | 10408ES | 1mL | Lưu trữ ở 4 °C. Thời hạn sử dụng là 3 năm. |
Enzym phụ trợ chiết xuất axit nucleic
RNase A
- Khái niệm và chức năng của RNase A
Ribonuclease A (RNase A), là một endoribonuclease, đặc biệt phân hủy các gốc cytosine (C) hoặc uracil (U) trên RNA mạch đơn. Ứng dụng phổ biến nhất của ribonuclease A (RNase A) là loại bỏ RNA trong quá trình chuẩn bị DNA plasmid hoặc DNA bộ gen. Ngoài ra, sản phẩm này cũng có thể được sử dụng trong các thí nghiệm sinh học phân tử như xét nghiệm bảo vệ RNase và phân tích trình tự RNA.
- Đặc điểm của RNase A
RNase A có nguồn gốc từ tuyến tụy bò. Không bị nhiễm endo- và exonuclease deoxyribonuclease. Có thể sử dụng trực tiếp mà không cần làm nóng trước và chịu được môi trường nhiệt độ cao.
- Giới thiệu sản phẩm
Tên sản phẩm | Sản phẩm Con số | Đặc điểm kỹ thuật | Điều kiện bảo quản và thời hạn sử dụng |
RNase A (100 mg/mL) | 10406ES | 1mL | Bảo quản ở nhiệt độ -20°C. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
RNase A (10 mg/mL) | 10405ES | 1mL | Bảo quản ở nhiệt độ phòng.Thời hạn sử dụng là 1 năm. |
10407ES | 100mg/1g | Bảo quản ở nhiệt độ phòng. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
Deoxyribonuclease I (DNase I)
Deoxyribonuclease I (DNase I), một endonuclease được tìm thấy trong nhiều tế bào và mô, nhắm mục tiêu và cắt liên kết phosphodiester liền kề với pyrimidine, tạo ra polynucleotide có nhóm phosphate ở đầu 5' và nhóm hydroxyl ở đầu 3'. Sản phẩm tiêu hóa tối thiểu trung bình là một polyme tetra-nucleotide. DNase có thể xúc tác nhiều dạng DNA khác nhau, chẳng hạn như DNA mạch đơn, DNA mạch đôi và thậm chí cả chromatin (tốc độ cắt bị ảnh hưởng bởi histon). Trong các thí nghiệm sinh học phân tử, nó thường được sử dụng để loại bỏ DNA khỏi protein hoặc đưa các vết khía vào DNA để chèn các bazơ được gắn nhãn vào DNA.
2.Đặc điểm của DNase I
Phạm vi hoạt động tối ưu của DNase I là pH 7-8 và hoạt động của nó phụ thuộc vào Ca2+ và có thể được kích hoạt bởi các ion kim loại hóa trị hai như Co2+, Mn2+, Kẽm2+, v.v. 5 mM Ca2+ có thể bảo vệ enzyme khỏi bị thủy phân. Trong sự hiện diện của Mg2+, enzyme này có thể nhận dạng và cắt ngẫu nhiên bất kỳ vị trí nào trên bất kỳ sợi DNA nào; trong khi có sự hiện diện của Mn2+, nó có thể nhận diện cả hai sợi DNA cùng lúc và cắt ở gần như cùng một vị trí.
3. Giới thiệu sản phẩm
Tên sản phẩm | Sản phẩm Con số | Đặc điểm kỹ thuật | Điều kiện bảo quản và thời hạn sử dụng |
Deoxyribonuclease I (DNase I) từ tuyến tụy bò | 10607ES | 15KU/10×15KU | Bảo quản ở nhiệt độ -20°C. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
Deoxyribonuclease I (DNase I) từ tuyến tụy bò | 10608ES | 25mg/100mg/1g | Bảo quản ở nhiệt độ -20°C. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
Proteinase K
1.Khái niệm và chức năng của Proteinase K
Proteinase K (Proteinase K) là một serine protease có nhiều hoạt động cắt. Trọng lượng phân tử tương đối của nó là khoảng 29,3 kDa và nó có thể cắt các liên kết peptide đầu carboxyl của các axit amin aliphatic và các axit amin thơm. Proteinase K có nhiều ứng dụng và có thể được sử dụng trong các thí nghiệm như chuẩn bị DNA nhiễm sắc thể để điện di gel trường xung, Western blotting và loại bỏ nuclease trong các chế phẩm DNA và RNA. Các tác nhân biến tính như SDS (1%) có thể làm tăng hoạt động của nó.
2.Đặc điểm của Proteinase K
Có nguồn gốc từ chủng nấm men tái tổ hợp về mặt di truyền.
Không chứa RNase và DNase.
Hoạt động và ổn định trong urê và SDS.
Hoạt động trong phạm vi pH rộng (pH 4,0 - 12,0) và phạm vi pH tối ưu là pH 7,5 - 9,0.
Tên sản phẩm | Sản phẩm Con số | Đặc điểm kỹ thuật | Điều kiện bảo quản và thời hạn sử dụng |
10401ES | 100mg/1g/5g/100g | Bảo quản ở nhiệt độ 4°C. Thời hạn sử dụng là 3 năm. | |
Dung dịch Proteinase K (20 mg/mL) | 10412ES | 1mL/10mL/25mL/500mL | Bảo quản ở nhiệt độ 4°C. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
Dung dịch Proteinase K (20 mg/mL) | 10410ES | 1mL/10mL/25mL/500mL | Bảo quản ở nhiệt độ 4°C. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
chất ổn định RNA
Dung dịch ổn định RNA cho mô động vật và thực vật
1. Chức năng của dung dịch ổn định RNA cho mô động vật và thực vật
RNase có mặt rộng rãi trong môi trường và rất có khả năng phân hủy RNA trong các mẫu mô động vật và thực vật, máu, dịch cơ thể, v.v. mới thu thập. Chất ổn định mô RNAsafe cho mô động vật và thực vật (RNAsafe Tissue Stabilizer) được phát triển đặc biệt để ổn định và bảo vệ RNA trong các mẫu thu thập được. Là một dung dịch không độc hại, nó có thể nhanh chóng thâm nhập vào các mô và vô hiệu hóa RNase nội sinh.
2.Đặc điểm của dung dịch ổn định RNA cho mô động vật và thực vật
Cực kỳ dễ vận hành: Chỉ cần cắt mô tươi thành các khối mô có kích thước phù hợp (≤0,5 cm) và ngâm chúng trong thể tích RNAsafe gấp 5 đến 10 lần.
Thời gian ổn định dài: Các mô/tế bào được thấm RNAsafe có thể được bảo quản ở 37°C trong 1 ngày, ở nhiệt độ phòng trong 1 tuần, ở 4°C trong 4 tuần và để bảo quản lâu dài ở -20°C/-80°C.
Khả năng tương thích rộng rãi ở hạ nguồn: Tương thích với hầu hết các phương pháp phân lập RNA, chẳng hạn như Thuốc thử chiết xuất RNA tổng số HieffTM (số danh mục: 10606ES60) và hầu hết các bộ dụng cụ chiết xuất RNA thương mại, bao gồm phương pháp chiết xuất cột ly tâm và phương pháp tinh chế hạt từ.
Ứng dụng rộng rãi của vật liệu: Có thể sử dụng để bảo quản nhiều loại mô động vật và thực vật (như não, tim, gan, tụy, thận, lá lách, tinh hoàn, cơ, thân và lá cây, v.v.) và cũng có thể sử dụng để bảo quản nấm men, tế bào nuôi cấy mô, v.v.
3. Giới thiệu sản phẩm
Tên sản phẩm | Sản phẩm Con số | Đặc điểm kỹ thuật | Điều kiện bảo quản và thời hạn sử dụng |
Chất ổn định mô RNAsafe RNAsafe | 10604ES60 | 100mL | Bảo quản ở nhiệt độ phòng. Thời hạn sử dụng là 5 năm. |
Sản phẩm liên quan
Tên sản phẩm | Sản phẩm Con số | Đặc điểm kỹ thuật | Điều kiện bảo quản và thời hạn sử dụng |
Lysozym | 10402ES | 5/50 g | Bảo quản ở nhiệt độ -20°C. Thời hạn sử dụng là 3 năm. |
Lycase (10 U/μL) | 10403ES | 1500/3000/10000U | Được lưu trữ tại -20°C. |
ốc sên | 10404ES | 5/10 g | Bảo quản ở nhiệt độ 2-8°C. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |
RNAsafe-ICE | 10605ES | 100mL | Bảo quản ở nhiệt độ phòng. Thời hạn sử dụng là 2 năm. |