Giới thiệu về kháng thể gắn nhãn
Kháng thể gắn thẻ được sử dụng để phát hiện và tinh chế các chuỗi gắn thẻ trên nhiều vector biểu hiện thương mại khác nhau để phân tích và xác định mức độ biểu hiện và chức năng của protein mục tiêu. Nguyên lý đằng sau việc sử dụng chúng là phản ứng kháng nguyên-kháng thể, trong đó các kháng thể gắn thẻ này có thể liên kết đặc hiệu với các protein gắn thẻ tương ứng. Sau đây là danh sách tóm tắt một số thẻ protein phổ biến phù hợp để sử dụng với kháng thể gắn thẻ:
Bảng 1. Giới thiệu về các thẻ protein khác nhau
| Nhãn | Sự liên tiếp | Đặc trưng | Các tình huống áp dụng |
| Lá cờ | DYKDDDDK | 1. Trọng lượng phân tử nhỏ, không làm thay đổi chức năng của protein tổng hợp, ưa nước hơn các loại tag tương tự; 2. Chứa vị trí nhận dạng enterokinase (DDDDK), thuận tiện cho việc loại bỏ thẻ khi gắn vào đầu N của protein mục tiêu. | Thích hợp cho việc tinh chế và phát hiện các protein tổng hợp có mức biểu hiện thấp trong hệ thống biểu hiện của sinh vật nhân chuẩn. |
| HÀ | YPYDVPDYA | Có nguồn gốc từ yếu tố quyết định kháng nguyên bề mặt hemagglutinin của virus cúm; tránh sử dụng trong các thí nghiệm liên quan đến tế bào chết theo chương trình. | Thích hợp cho việc tinh chế và phát hiện protein. |
| Myc | Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu | Có nguồn gốc từ gen tiền ung thư Myc của con người; tránh sử dụng trong các thí nghiệm liên quan đến tế bào người. | Nói chung không được sử dụng để tinh chế protein, chỉ phù hợp để phát hiện. |
| Dòng sản phẩm | Dòng nhựa thanh lọc | Dòng hạt từ tính miễn dịch | |||||
| Số sản phẩm | 20584ES | 20586ES | 20587ES | 20565ES | 20566ES | 20567ES | 20564ES |
| Tên sản phẩm | Hạt MagBeads chống HA | Hạt Chống MycMag | |||||
| Các phối tử | Kháng thể đơn dòng IgG chuột chất lượng cao | Kháng thể đơn dòng kháng GFP/Flag/HA/Myc ở chuột chất lượng cao | |||||
| Khả năng liên kết protein | ≥1,1 mg Protein tổng hợp gắn cờ/mL gel ≥1,5 mg protein hợp nhất gắn thẻ HA/mL gel ≥0,9 mg protein tổng hợp gắn thẻ Myc/mL gel | ≥0,8 mg protein hợp nhất gắn thẻ GFP/mg hạt cườm ≥0,6 mg Protein tổng hợp gắn cờ/hạt mg ≥0,4 mg protein hợp nhất gắn thẻ HA/mg hạt ≥0,5 mg Protein hợp nhất gắn thẻ Myc/mg hạt cườm
| |||||
| Ma trận | Gel agarose liên kết chéo 4% | Hạt từ tính gốc silica | |||||
| Kích thước hạt | 45-165µm | 200 nm | |||||
| Thuận lợi | Liên kết không đặc hiệu thấp, khả năng cao | Độ tinh khiết cao, công suất cao, độ đặc hiệu cao, sử dụng thuận tiện với giá đỡ từ tính | |||||
| Ứng dụng được đề xuất | Làm sạch ái lực của protein tổng hợp được gắn thẻ ở bất kỳ quy mô nào, kết tủa miễn dịch (IP) | Kết tủa miễn dịch (IP), Đồng kết tủa miễn dịch (COIP) | |||||
Dữ liệu thử nghiệm
1.
Hình 1.
M: Protein Marker; 1: Lysate tiền cột của protein Flag-N, M, C; 2: Permeat sau cột của protein Flag-N, M, C; 3: Elution (elution pH 2.7); 4: Elution (elution pH 12)
2. Các mũi tên trong hình bên dưới chỉ ra các protein được gắn thẻ mục tiêu và ba dải từ trên xuống dưới sau khi đun sôi trực tiếp các hạt từ tính là BSA, chuỗi nặng của kháng thể và chuỗi nhẹ của kháng thể.
Nhân vật 2. Thanh lọc các protein có gắn cờ bằng MagBeads Anti-Flag
1: Dịch lysate E. coli chứa protein gắn thẻ Flag 10 μL; 2: Dịch nổi sau khi ủ dịch lysate E. coli chứa protein gắn thẻ Flag với hạt từ tính 10 μL; 3: Đun sôi trực tiếp protein gắn thẻ Flag với hạt MagBeads Anti-Flag 10 μL; 4: Đun sôi trực tiếp hạt MagBeads Anti-Flag; 5: Đánh dấu
3.
Nhân vật 3. Thanh lọc các hạt MagBeads chống GFP của các protein gắn thẻ GFP
1: Dịch lysate E. coli chứa protein gắn thẻ GFP 10 μL; 2: Dịch nổi sau khi ủ dịch lysate E. coli chứa protein gắn thẻ GFP với hạt từ tính 10 μL; 3: Đun sôi trực tiếp protein gắn thẻ GFP với hạt MagBeads Anti-GFP 10 μL; 4: Đun sôi trực tiếp hạt MagBeads Anti-GFP; 5: Đánh dấu
Thông tin sản phẩm
| Tên sản phẩm | Số sản phẩm | Đặc điểm kỹ thuật |
| 20584ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20586ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20587ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20565ES03/08 | 1 ml/5 ml | |
| Hạt MagBeads chống HA | 20566ES03/08 | 1 ml/5 ml |
| Hạt MagBeads chống Myc | 20567ES03/08 | 1 ml/5 ml |
| 20564ES03/08 | 1 ml/5 ml |