Yeasen Gel ái lực chống DYKDDDDK (Flag): Làm sạch chính xác các protein màng có hàm lượng thấp

Trong lĩnh vực nghiên cứu y sinh, tinh chế protein là công nghệ then chốt để khám phá những bí ẩn của sự sống. Tuy nhiên, các phương pháp tinh chế truyền thống gặp khó khăn do kém hiệu quả và chi phí cao—đặc biệt là đối với protein màng, trọng tâm của nghiên cứu sinh học cấu trúc. Các protein này có cấu trúc phức tạp, có mức biểu hiện thấp trong màng tế bào và nhạy cảm với các điều kiện môi trường, khiến việc tinh chế chúng trở nên đặc biệt khó khăn. Bây giờ, Yeasen Công nghệ sinh học, với khả năng R&D vượt trội, đã cho ra mắt phiên bản nâng cấp Gel Affinity chống DYKDDDDK(Flag) (Mã số: 20584ES), một công cụ mạnh mẽ để tinh chế protein hiệu quả và thuận tiện, ngay cả đối với các protein màng khó tinh chế.

Hiệu suất sản phẩm

1. Độ đặc hiệu cao và khả năng liên kết cao: Những lợi thế chính để thu giữ protein mục tiêu

Yeasen Gel Affinity chống DYKDDDDK(Flag) (Mã số: 20584ES) được chuẩn bị bằng cách ghép nối cộng hóa trị các kháng thể đơn dòng IgG2b chuột chất lượng cao với gel agarose liên kết chéo cao 4%. Quy trình sản xuất độc đáo này mang lại cho sản phẩm tính đặc hiệu cực cao, cho phép sản phẩm nhận dạng và liên kết chính xác các protein hợp nhất với thẻ Flag. Cho dù đó là protein hợp nhất Flag đầu N được biến đổi bởi Met (Protein Met-Flag), protein hợp nhất Flag đầu N (Protein Cờ), hoặc protein hợp nhất Flag ở đầu C (Protein-Cờ), gel có thể xử lý chúng một cách dễ dàng.

Trong quá trình tinh chế protein màng, tính đặc hiệu này đặc biệt quan trọng vì các protein này có cấu trúc phức tạp và dễ liên kết không đặc hiệu với các protein khác. Tính đặc hiệu cao của gel Flag làm giảm hiệu quả sự can thiệp từ các protein không đặc hiệu, đảm bảo độ tinh khiết cao của các protein màng đã tinh chế. Ngoài ra, gel có khả năng liên kết cao đối với các protein hợp nhất gắn nhãn Flag (ít nhất 1,1 mg protein/mL gel). Điều này có nghĩa là ngay cả khi protein mục tiêu được biểu hiện ở mức thấp, nó vẫn có thể được thu thập và tinh chế hiệu quả bằng gel Flag.

2. Độ tinh khiết cao và năng suất cao: Cho phép các ứng dụng hạ nguồn

Yeasen Gel Affinity chống DYKDDDDK(Flag) (Mã số: 20584ES) có liên kết không đặc hiệu tối thiểu với tạp chất, tạo ra các mẫu protein có độ tinh khiết cao sau khi tinh chế. Điều này rất quan trọng đối với các ứng dụng hạ nguồn như xét nghiệm hoạt tính sinh học và phân tích cấu trúc. Các mẫu protein có độ tinh khiết cao cung cấp dữ liệu thực nghiệm chính xác hơn, tạo nền tảng vững chắc cho các nghiên cứu của các nhà nghiên cứu.

3. Quy trình làm việc thử nghiệm được tối ưu hóa: Đơn giản hóa những thách thức trong quá trình tinh chế protein

Quá trình tinh chế protein cần được thực hiện trong điều kiện nhẹ nhàng để tránh làm hỏng cấu trúc protein, đặc biệt là đối với protein màng phức tạp. Yeasen Gel Affinity chống DYKDDDDK(Flag) (Mã số: 20584ES) được thiết kế với mục đích này. Bộ đệm lưu trữ của nó là TBS chứa 50% glycerol ở pH 7.4, không chỉ bảo vệ hoạt động của gel mà còn cung cấp môi trường nhẹ nhàng để tinh chế protein.

Quá trình thanh lọc với gel Flag rất đơn giản và hiệu quả. Để tạo điều kiện thuận lợi cho việc sử dụng elution peptide 1×Flag, gói sản phẩm bao gồm một peptide 1×Flag miễn phí (Cat#20572ES). Điều này làm cho quá trình elution nhẹ nhàng (gần như không gây hại cho protein) và rất tiện lợi (cải thiện hơn nữa tính dễ dàng của thử nghiệm).

4. Nhiều kích cỡ và tùy chọn vận chuyển linh hoạt: Đáp ứng nhu cầu thử nghiệm đa dạng

Xem xét các quy mô và nhu cầu khác nhau của các phòng thí nghiệm khác nhau, Yeasen cung cấp gel Flag với nhiều kích cỡ, bao gồm 1 mL, 5 mL, 25 mL và 100 mL. Cho dù là thăm dò sơ bộ quy mô nhỏ hay sản xuất protein quy mô lớn, đều có tùy chọn phù hợp. Đối với các giao dịch mua hàng năm với khối lượng lớn, khách hàng có thể chọn nhận hàng theo lô, cho phép họ được hưởng mức giảm giá trong khi tránh áp lực tồn kho quá mức.

Dữ liệu thử nghiệm

M: Dấu hiệu protein 1: Mẫu thô trước cột của protein Flag-N/ Flag-M/ Flag-C 2: Dòng chảy sau cột của protein Flag-N/ Flag-M/ Flag-C 3: Giải hấp (giải hấp pH 2,7) 4: Giải hấp (giải hấp pH 12) 5: Giải hấp (1×Giải phóng peptit cờ) 6: Gel tinh khiết (pH 2,7 rửa giải) 7: Gel tinh khiết (pH 12 rửa giải) 8: Gel tinh khiết (1×Giải phóng peptit cờ) Một：Cờ-N   b：Cờ-M   c：Cờ-C

Hình 1.   Yeasen Gel Affinity chống DYKDDDDK(Flag) kết quả tinh chế đối với các protein biểu hiện thấp (Flag-N (a), Flag-M (b), Flag-C (c)) được hiển thị trong SDS-PAGE.

M: Dấu hiệu protein 1: Mẫu thô trước cột của protein Flag-C 2: Dòng chảy qua cột sau của protein Flag-C 3: Giải hấp (giải hấp pH 2,7) 4: Giải hấp (giải hấp pH 12) 5: Giải hấp (1×Giải phóng peptit cờ) 6: Gel tinh khiết (pH 2.7 rửa giải) 7: Gel tinh khiết (pH 12 rửa giải) 8: Gel tinh khiết (1×Giải phóng peptit cờ) Một：Yeasen b：Thương hiệu S*   c：Thương hiệu G*

Nhân vật 2. So sánh của Yeasen (a) vớiBrand S* (b) và Brand G* (c) Gel Anti-Flag trong việc tinh chế các protein biểu hiện thấp (ví dụ, protein màng) được hiển thị trong SDS-PAGE.

Kết luận:

1. Yeasen Gel Affinity chống DYKDDDDK(Flag) (Mã số: 20584ES) có tính đặc hiệu cao và có thể liên kết với các thẻ Flag ở nhiều vị trí khác nhau (protein liên kết Flag ở đầu N, protein liên kết Flag ở đầu N được sửa đổi Met, protein liên kết Flag ở đầu C).

2. Trong điều kiện biểu hiện protein mục tiêu cực kỳ thấp (ví dụ, protein màng), Yeasen Gel Affinity chống DYKDDDDK(Flag) (Cat#20584ES) đạt được năng suất và độ tinh khiết cao hơn đáng kể so với các đối thủ cạnh tranh. Việc sử dụng Yeasen Peptide Flag 1× bổ sung (Cat#20572ES) để giải hấp mang lại kết quả thậm chí còn tốt hơn.

Giải pháp hoàn chỉnh cho Protein tổng hợp gắn cờ:

Enterokinase tái tổ hợp (Cat#20395ES): Một loại protease đặc hiệu cắt đầu carboxyl của lysine được dẫn trước bởi bốn axit aspartic: Asp-Asp-Asp-Asp-Lys. Trình tự này là một phần của thẻ Flag octapeptide (DYKDDDDK). Enterokinase tái tổ hợp (rEK) có thể dễ dàng loại bỏ thẻ Flag khỏi protein tổng hợp, khiến nó trở thành một công cụ lý tưởng để nghiên cứu cấu trúc và chức năng của protein bản địa.

MagBeads chống DYKDDDDK(Flag) (Mã số: 20565ES): Vi cầu từ tính polyme được chế tạo bằng cách ghép cộng hóa trị các kháng thể đơn dòng kháng DYKDDDDK (Flag) của chuột chất lượng cao với các hạt từ tính gốc silica (đường kính của 200 nm). Những hạt này thích hợp cho quá trình kết tủa miễn dịch (IP) hoặc đồng kết tủa miễn dịch (Co-IP) các protein có gắn thẻ Flag.

Thông tin sản phẩm

Tên sản phẩm	Số sản phẩm	Đặc điểm kỹ thuật
Gel Affinity chống DYKDDDDK(Flag)	20584Tiếng Việt03/08/25	1 ml/5 ml/25 ml
Enterokinase bò tái tổ hợp, His, được biểu hiện trong nấm men	20395ES60/76/90	100 Bạn/500 U/5000 U
MagBeads chống DYKDDDDK(Flag)	20565ES03/08	1 ml/5 ml