Sự miêu tả
Hifair™ Bộ dụng cụ thăm dò RT-qPCR một bước đa năng (UDG Thêm vào đó) là bộ PCR định lượng đa thành phần dựa trên RNA làm khuôn mẫu. Trong quá trình thí nghiệm, phiên mã ngược và PCR định lượng được thực hiện trong cùng một ống, giúp đơn giản hóa thao tác thí nghiệm và giảm nguy cơ nhiễm bẩn.
Trong bộ dụng cụ này, sợi cDNA đầu tiên được tổng hợp hiệu quả bằng Hifair chịu nhiệtTM V Reverse Transcriptase và khuếch đại định lượng bởi UNICON™ HotStart Taq DNA Polymerase. Bộ dụng cụ chủ yếu chứa đệm MP được tối ưu hóa, hỗn hợp enzyme, v.v. Dung dịch đệm đã chứa Mg2+ và dNTP. Ngoài ra, các yếu tố có thể ức chế hiệu quả sự khuếch đại PCR không đặc hiệu và cải thiện hiệu quả khuếch đại của nhiều phản ứng qPCR được thêm vào, có thể đảm bảo hiệu quả khuếch đại và thực hiện tới nhiều phản ứng khuếch đại. Hệ thống dUTP/UDG được thêm vào để ngăn ngừa hiệu quả nguy cơ ô nhiễm khí dung.
Đặc trưng
1. Gtính linh hoạt cao: Thích hợp cho việc khuếch đại qPCR và phát hiện axit nucleic của vi sinh vật gây bệnh, bộ gen người, thực vật và các loài khác.
2. Độ nhạy cao: Hệ thống đệm được tối ưu hóa cẩn thận giúp cải thiện độ nhạy phát hiện của các mẫu có nồng độ thấp lên đến 250 bản sao/mL.
3. Hệ thống dUP/UDG: Hệ thống chống ô nhiễm dUTP/ UDG không chịu nhiệt được giới thiệu để phân hủy ô nhiễm khí dung của sản phẩm một cách hiệu quả, giảm kết quả dương tính giả và đảm bảo kết quả xác thực.
4. Ủng hộđang chương trình nhanh: tương thích với chương trình nhanh 40 phút.
5. Độ ổn định cao: chuồng ngựavà ở nhiệt độ 37℃ trong 14 ngày, đông lạnh và rã đông lặp lại 10 lần.
Thành phần
Thành phần | Tên | 16630ES60 (100 tấn) | 16630ES80 (1000 tấn) | 16630ES92 (10000 tấn) |
16630-A | Bộ đệm MP Hifair 5× | 500 μL | 5 ml | 50ml |
16630-B | Enzym Hifair Trộn | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
16630-C | GC-Tăng cường | 500 μL | 5 ml | 50ml |
Ghi chú: 1) 5×Xin chàoTM Bộ đệm MP là chữ viết tắt của HifairTM Bộ đệm thăm dò RT-qPCR một bước V Multiplex, bao gồm dNTPs, dUTP, Mg2+, chất ổn định, chất tăng cường và nhiều chất khác.
2) Hỗn hợp enzyme Hifair chủ yếu chứa chịu nhiệt HifairTM Phiên mã ngược V, UNICONTM HotStart Taq DNA polymeras và UDGase.
3) GC enhancer là tùy chọn. Vui lòng tìm phiên bản GC enhancer miễn phí: Mèo: 16901ES.
4) 16630-A và 16630-B tương đương với 16901-A và 16901-B, tương ứng.
Thông số kỹ thuật
Phương pháp PCR | Một bước RT-qPCR |
Loại mẫu | ARN |
Kho
TAnh ta sản phẩm nên là được lưu trữ Tại -25°C~-15°C vì 1 năm.
Các con số
Hình 1. Tỷ lệ phát hiện cao
Hướng dẫn
1. Sự phản ứng lại Thành phần
Thành phần | Âm lượng ((ml) | Nồng độ cuối cùng |
5×Hifair™ Bộ đệm MP | 5 | 1 × |
Hỗn hợp enzyme Hifair | 1 | - |
GC-Tăng cường | 0-5 | - |
Hỗn hợp mồi (10 μM) | 0,4 mỗi | 0,16 μM |
Hỗn hợp đầu dò (10 μM) | 0,2 mỗi | 0,08 μM |
ARN | 1-5 | - |
RNase không có H2O | đến 25 | - |
Ghi chú:Đảm bảo trộn đều trước khi sử dụng, tránh tạo ra nhiều bọt khí do rung động mạnh.
a) Nồng độ mồi: Mồi trộn bao gồm mồi đa năng, tùy thuộc vào tình huống, nồng độ mồi tối ưu có thể nằm trong khoảng từ 0,1 đến 1,0 μM.
b) Nồng độ đầu dò: Hỗn hợp đầu dò bao gồm nhóm huỳnh quang khác biệt gắn nhãn đầu dò đa kênh, tùy thuộc vào tình huống, nồng độ đầu dò tối ưu có thể nằm trong khoảng từ 0,05 đến 0.5 μM.
c) Pha loãng mẫu: qPCR có độ nhạy cao và nên pha loãng mẫu. Giá trị Ct kiểm soát phù hợp trong khoảng từ 20 đến 35.
ngày) Chuẩn bị hệ thống: mở đầu bằng bộ lọc. Tránh ô nhiễm chéo và ô nhiễm khí dung.
2. Giao thức đạp xe được tối ưu hóa
Giai đoạn phản ứng | Nhiệt độ | Thời gian | Xe đạp | |
1 | Phiên mã ngược | 50°CMột | 15 phút | 1 |
2 | Biến tính ban đầu | 95°C | 5 phút | 1 |
3 | Phản ứng khuếch đại | 95°C | 15 giây | 45 chu kỳ |
60°Cb | 30 giâyc |
Ghi chú:a) Rphiên âm ngược: Nhiệt độ có thể chọn 42°C hoặc 50°C trong 10-15 phút.
b) Phản ứng khuếch đại: Nhiệt độ được điều chỉnh theo giá trị Tm của các đoạn mồi được thiết kế.
c) Thu tín hiệu huỳnh quang: Vui lòng thiết lập quy trình thử nghiệm theo yêu cầu của hướng dẫn sử dụng thiết bị.
Thanh toán & Bảo mật
Thông tin thanh toán của bạn được xử lý an toàn. Chúng tôi không lưu trữ chi tiết thẻ tín dụng cũng như không có quyền truy cập vào thông tin thẻ tín dụng của bạn.
Cuộc điều tra
Bạn cũng có thể thích
Câu hỏi thường gặp
Sản phẩm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng để điều trị hoặc chẩn đoán ở người hoặc động vật. Sản phẩm và nội dung được bảo vệ bởi các bằng sáng chế, nhãn hiệu và bản quyền thuộc sở hữu của
Một số ứng dụng có thể yêu cầu thêm quyền sở hữu trí tuệ của bên thứ ba.