Bst DNA 聚合酶在 LAMP 中起什么作用？
等温核酸扩增技术根据扩增原理不同可以分为很多种类，目前最常见、应用最广泛的是2000年日本学者Notomi等开发的环介导等温扩增技术（LAMP）。Bst DNA聚合酶是等温扩增技术的核心酶。Bst DNA聚合酶在LAMP中的作用和性能如何？
1. Bst DNA聚合酶在LAMP中如何发挥作用？
2.什么是冻干 Bst Plus DNA 聚合酶？
3. 产品特点是什么 冻干 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶(14405ES)？
4.冻干粉针的产品性能如何？ 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶（14405ES）？
5. 相关产品
6.关于阅读
1. Bst DNA聚合酶在LAMP中如何发挥作用？
LAMP的技术特点是针对目的基因的6个区域设计4条引物，在60~65℃恒温条件下利用BST DNA聚合酶进行扩增反应，在15~60分钟内实现109~1010倍的扩增。Bst DNA聚合酶具有较强的热稳定性、链置换活性和聚合酶活性，可在恒温条件下作为快速、高效、特异的扩增模板，无需PCR热变性扩增循环，在1小时内完成整个LAMP实验。
2.什么是冻干 Bst Plus DNA 聚合酶？
冻干Bst Plus DNA聚合酶是采用冻干无甘油Bst Plus DNA聚合酶，解决了无甘油Bst酶不稳定的问题，同时本产品具有强5’-3’DNA聚合酶活性、链置换活性、dUTP耐受性，更适合抗污染的恒温扩增反应，方便客户在冻干产品生产中使用。
图1：14405ES-冻干Bst Plus DNA聚合酶（60 U/μL，无甘油）
3. 冻干粉的产品特点是什么 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶（14405ES）？
- 不含甘油的酶，适合冻干
- 常温运输，降低成本
- 强链置换活性，灵敏、稳定
- 复溶速度快，操作方便
4.冻干粉针的产品性能如何？ 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶（14405ES）？
4.1冻干粉形貌：与T0时刻相比，经过45℃-15DAYS冻干，粉末形貌基本保持不变。
图 2. 冻干粉末形状
4.2 稳定性
冻干粉经过热加速后性能仍能与液体试剂保持一致，冻干粉（14405ES）
通用性强，可用于荧光染料法和pH指示剂法。
4.2.1 荧光染料法——稳定性
在RT-LAMP荧光染料扩增体系中，无甘油Bst冻干粉经过T0、45℃-7天及45℃-15天热加速后性能与液态版无甘油Bst酶一致，NTC没有出现峰值。
实验条件：
| 系统 | RT-LAMP荧光染料 方法 | 乐器 | Q5、SLAN |
| 模板 | COVID-19 RNA | 专注 | 50份/T |
| 程序 | 37℃, 2分钟。65℃, 60分钟 |
注：对照组为不含甘油的同等浓度Bst酶的液体版本。
图 3. 稳定性结果
4.2.2 荧光染料法——RT-LAMP系统冻干后Bst酶的性能
在RT-LAMP荧光染料扩增体系中，无甘油Bst冻干粉在RT-LAMP体系中45℃-15天冻干后的产品性能与液态版无甘油Bst酶一致，对照组和冻干后RT-LAMP体系中产品的检出率分别为100%（16/16）和94%（15/16）。
实验条件：
| 系统 | RT-LAMP荧光染料 方法 | 乐器 | Q5、SLAN |
| 模板 | COVID-19 RNA | 专注 | 50份/T |
| 程序 | 37℃, 2分钟。65℃, 60分钟 |
注：对照组为不含甘油的同等浓度Bst酶的液体版本。
图4 RT-LAMP系统冻干后Bst酶的性能
4.2.3 PH指示剂法——稳定性
在RT-LAMP pH指示剂放大体系中，与T0时间相比，45℃—15天热加速后Bst冻干粉的检出率为88%（7/8）。
实验条件：
| 系统 | RT-LAMP PH 指示剂法 | 模板 | COVID-19 RNA |
| 程序 | 37℃, 2分钟。65℃, 60分钟 | 专注 | 50份/T |
注：对照组为不含甘油的同等浓度Bst酶的液体版本。
图 5. 稳定性结果
4.2.4 PH指示剂法——再冻稳定性
在RT-LAMP pH指示剂扩增体系中，45℃-7天复冻后性能稳定，对照组为液体Bst酶，与对照组相比，热加速后14405ES的检出率为94%（30/32）。
实验条件：
| 系统 | RT-LAMP PH 指示剂法 | 模板 | COVID-19 RNA |
| 程序 | 37℃, 2分钟。65℃, 60分钟 | 专注 | 50份/T |
注：对照组为不含甘油的同等浓度Bst酶的液体版本。
图 6. 再冷冻稳定性结果
4.3 特异性
在RT-LAMP荧光染料扩增体系中，48孔NTC未出现峰，14405ES的特异性为100%。
实验条件：
| 系统 | RT-LAMP荧光染料 方法 | 乐器 | Q5、SLAN |
| 模板 | COVID-19 RNA | 专注 | 50份/T |
| 程序 | 37℃, 2分钟。65℃, 60分钟 |
注：对照组为不含甘油的同等浓度Bst酶的液体版本。
图 7. 具体结果
5. 相关产品
相关产品
表 1.相关产品
| 产品定位 | 产品名称 | 猫＃ |
| 高灵敏度 Bst 酶 | Hieff™ Bst Plus DNA 聚合酶（40 U/μL） | 14402ES |
| Hieff™ Bst Plus DNA 聚合酶（2000 U/μL）(查询） | 14403ES | |
| 冻干 布施 加 脱氧核糖核酸 聚合酶 （ 60 U/μL，不含甘油) | 14405ES | |
| 荧光染料法 | RT-LAMP 染料检测试剂盒 (UDG plus) | 13762ES |
| PH指示剂法 | RT-LAMP pH 敏感的 染料 显色法 版本 可冷冻干燥 试剂 （查询） | 13920ES |
| 新冠肺炎 | RT-LAMP 新冠肺炎 （pH 值 指标 方法） 冻干 珠子 （查询） | 13919ES |
| RT-LAMP 新冠肺炎 底漆 掌握 混合 （否） （查询） | 13995ES | |
| 适用于 RT-Lamp 的逆转录酶 | 希菲尔™Ⅲ 逆转录酶 （查询） | 11111ES |
| 希菲尔™Ⅲ 不含甘油的逆转录酶 （查询） | 11297ES | |
| 小鼠 RNase 抑制剂 | 小鼠 RNase 抑制剂 (40 U/μL) | 10603ES |
| 小鼠 RNase 抑制剂（200 U/μL，不含甘油） | 10703ES | |
| 热不稳定UDG | 尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDG/UNG)，热不稳定，1 U/μL （查询） | 10303ES |
| 高纯度 dUTP | dUTP（100 mM 溶液） | 10128ES |
6.关于阅读
选择正确的关键酶原料，让LAMP/RT-LAMP更灵敏、更快速！
逆转录酶选择指南