Bst DNA 聚合酶在 LAMP 中扮演什麼角色？
等溫核酸擴增技術依擴增原理不同可分為多種。目前最常見、應用最廣泛的是日本學者Notomi等開發的環介導等溫擴增技術(LAMP)。 2000年，Bst DNA聚合酶是等溫擴增技術的核心酵素。 Bst DNA聚合酶在LAMP中的作用與表現是什麼？
1. Bst DNA聚合酶在LAMP中如何發揮作用？
2.什麼是凍乾 Bst Plus DNA 聚合酶？
3. 產品特點是什麼 冷凍乾燥 布施 加 脫氧核糖核酸 聚合酶(14405ES)？
4.凍乾粉針的產品性能如何？ 布施 加 脫氧核糖核酸 聚合酶（14405ES）？
5. 相關產品
6.關於閱讀
1. Bst DNA聚合酶在LAMP中如何發揮作用？
LAMP技術的特點是針對目的基因的6個區域設計4條引物，在60～65℃恆溫條件下，利用BST DNA聚合酶進行擴增反應，在15～60分鐘內實現109～1010倍的擴增。 Bst DNA聚合酶具有強烈的熱穩定性、鏈置換活性和聚合酶活性。可在恆溫條件下快速、有效率、特異的擴增模板，無需PCR熱變性的擴增循環，1小時內完成整個LAMP實驗。
2.什麼是凍乾 Bst Plus DNA 聚合酶？
冷凍乾燥Bst Plus DNA聚合酶用於冷凍無甘油的Bst Plus DNA聚合酶，解決了無甘油Bst酶不穩定的問題。同時本產品具有強的5’-3’DNA聚合酶活性、鏈置換活性、及dUTP耐受性，更適合抗污染的恆溫擴增反應，方便客戶在冷凍乾燥產品生產中使用。
圖1：14405ES-凍乾Bst Plus DNA聚合酶（60 U/μL，無甘油）
3. 凍乾粉的產品特色是什麼 布施 加 脫氧核糖核酸 聚合酶（14405ES）？
- 不含甘油的酶，適合冷凍乾燥
- 常溫運輸，降低成本
- 強鏈置換活性，靈敏、穩定
- 復溶速度快，操作方便
4.凍乾粉針的產品性能如何？ 布施 加 脫氧核糖核酸 聚合酶（14405ES）？
4.1凍乾粉形貌：與T0時刻相比，經過45℃-15DAYS凍乾，粉末形貌基本保持不變。
圖 2. 凍乾粉末形狀
4.2 穩定性
凍乾粉經過熱加速後性能仍能與液體試劑保持一致，凍乾粉（14405ES）
通用性強，可用於螢光染料法和pH指示劑法。
4.2.1 螢光染料法－穩定性
在RT-LAMP螢光染料擴增系統中，無甘油Bst凍乾粉經T0、45℃-7天及45℃-15天熱加速後性能與液態版無甘油Bst酶一致，NTC沒有出現峰值。
實驗條件：
| 系統 | RT-LAMP螢光染料 方法 | 樂器 | Q5、SLAN |
| 範本 | COVID-19 RNA | 專注 | 50份/T |
| 程式 | 37℃，2分鐘。 65℃, 60分鐘 |
註：對照組為不含甘油的同等濃度Bst酶的液體版本。
圖 3. 穩定性結果
4.2.2 螢光染料法－RT-LAMP系統冷凍乾燥後Bst酶的性能
在RT-LAMP螢光染料擴增系統中，無甘油Bst凍乾粉在RT-LAMP體系中冷凍乾燥45℃-15天後的產品表現與液態版無甘油Bst酶一致。對照組及冷凍乾燥後RT-LAMP系統產品的檢出率分別為100%(16/16)、94%(15/16)。
實驗條件：
| 系統 | RT-LAMP螢光染料 方法 | 樂器 | Q5、SLAN |
| 範本 | COVID-19 RNA | 專注 | 50份/T |
| 程式 | 37℃，2分鐘。 65℃, 60分鐘 |
註：對照組為不含甘油的同等濃度Bst酶的液體版本。
圖4 RT-LAMP系統凍乾後Bst酶的性能
4.2.3 PH指示劑法－穩定性
在RT-LAMP pH指示劑放大系統中，與T0時間相比，45℃—15天熱加速後Bst凍乾粉的檢出率為88%（7/8）。
實驗條件：
| 系統 | RT-LAMP PH 指示劑法 | 範本 | COVID-19 RNA |
| 程式 | 37℃，2分鐘。 65℃, 60分鐘 | 專注 | 50份/T |
註：對照組為不含甘油的同等濃度Bst酶的液體版本。
圖 5. 穩定性結果
4.2.4 PH指示劑法－再凍穩定性
在RT-LAMP pH指示劑放大系統中，經過45℃-7天的再冷凍，性能穩定。對照組為液體Bst酶。與對照組相比，熱加速後14405ES的檢出率為94%(30/32)。
實驗條件：
| 系統 | RT-LAMP PH 指示劑法 | 範本 | COVID-19 RNA |
| 程式 | 37℃，2分鐘。 65℃, 60分鐘 | 專注 | 50份/T |
註：對照組為不含甘油的同等濃度Bst酶的液體版本。
圖 6. 再冷凍穩定性結果
4.3 特異性
在RT-LAMP螢光染料擴增體系中，48孔NTC未出現峰，14405ES的特異性為100%。
實驗條件：
| 系統 | RT-LAMP螢光染料 方法 | 樂器 | Q5、SLAN |
| 範本 | COVID-19 RNA | 專注 | 50份/T |
| 程式 | 37℃，2分鐘。 65℃, 60分鐘 |
註：對照組為不含甘油的同等濃度Bst酶的液體版本。
圖 7. 具體成果
5. 相關產品
相關產品
表 1.相關產品
| 產品定位 | 產品名稱 | 貓＃ |
| 高靈敏度 Bst 酶 | Hieff™ Bst Plus DNA 聚合酶（40 U/μL） | 14402ES |
| Hieff™ Bst Plus DNA 聚合酶（2000 U/μL）(查詢） | 14403ES | |
| 冷凍乾燥 布施 加 脫氧核糖核酸 聚合酶 （ 60 U/μL，不含甘油) | 14405ES | |
| 螢光染料法 | RT-LAMP 染料檢測試劑盒 (UDG plus) | 13762ES |
| PH指示劑法 | RT-LAMP pH 敏感的 染料 顯色 版本 可冷凍乾燥 試劑 （查詢） | 13920ES |
| 新冠肺炎 | RT-LAMP 新冠肺炎 （pH 值 指標 方法） 冷凍乾燥 珠 （查詢） | 13919ES |
| RT-LAMP 新冠肺炎 底漆 掌握 混合 （否） （查詢） | 13995ES | |
| 適用於 RT-Lamp 的逆轉錄酶 | 希菲爾™Ⅲ 逆轉錄酶 （查詢） | 11111ES |
| 希菲爾™Ⅲ 不含甘油的逆轉錄酶 （查詢） | 11297ES | |
| 小鼠 RNase 抑制劑 | 小鼠 RNase 抑制劑 (40 U/μL) | 10603ES |
| 小鼠 RNase 抑制劑（200 U/μL，不含甘油） | 10703ES | |
| 熱不穩定UDG | 尿嘧啶 DNA 糖基化酶 (UDG/UNG)，熱不穩定，1 U/μL （查詢） | 10303ES |
| 高純度 dUTP | dUTP（100 mM 溶液） | 10128ES |
6.關於閱讀
選擇正確的關鍵酵素原料，讓LAMP/RT-LAMP更靈敏、更快速！
逆轉錄酶選擇指南