隨著生物技術的快速發展，mRNA治療作為一種新興的治療方法，因其可編程性強、響應速度快而備受關注。在mRNA疫苗和基因治療領域，高效合成高品質mRNA是實現治療目標的關鍵步驟。在此過程中，T7 RNA聚合酶（T7 RNAP）起著至關重要的作用，它能有效催化mRNA的體外合成。
儘管T7 RNAP在mRNA合成中起著至關重要的作用，但在實踐中它常常會產生雙股RNA（dsRNA）作為副產物。 dsRNA 是許多病毒的標誌之一，因此它很容易被細胞內的 dsRNA 結合蛋白識別，從而引發先天免疫反應和發炎反應。這意味著，如果 mRNA 製劑中含有較高水平的 dsRNA，可能會導致不必要的免疫激活，從而影響治療效果或嚴重的副作用。過量的dsRNA也會幹擾mRNA的正常功能，包括翻譯效率和mRNA的穩定性，間接影響mRNA治療的效果。
圖 1：dsRNA 副產物的影響和優化的 T7 RNAP 反應。
因此，開發和採用有效的方法來減少dsRNA的產生是mRNA技術發展的關鍵部分。研究人員已經開發出各種策略，包括使用改良的T7 RNA聚合酶、修飾核苷酸、優化IVT轉錄緩衝液和下游純化過程。
產品數據
產量：超過 9 mg/mL
dsRNA含量：dsRNA含量顯著降低至少10倍
封蓋效率：99%以上
低 dsRNA T7 RNA 聚合酶 篩選流程：
1）建構了隨機文庫及FADS高通量篩選方法，建立了10個以上隨機突變文庫^6 進行了放映。
2)利用半理性設計和微孔板技術篩選位點飽和的文庫。兩種方法均產生了低 dsRNA T7 RNA 聚合酶突變體。在確保其他指標不降低（如完整性/封蓋效率/產量等）的情況下考慮dsRNA含量， 選擇了幾種突變體，其中一個名為CleaScrip™T7的突變體用於商業應用。
產品數據
在不同長度的應用場景中，低dsRNA T7 RNA Polymerase與WT T7及競爭產品相比均表現出了高度顯著的降低，同時確保了產量和完整性不降低。
| 片段長度 | T7 RNA聚合酶 | 屈服（毫克/毫升） |
正直（％） | dsRNA 含量（每 1ug RNA 產生的 dsRNA ng 數） |
| 4K | T7-WT | 12.4 | 88.3 | 0.4273 |
| 清潔文具™ T7 | 12.1 | 89.9 | 0.0129 | |
| A公司 | 11.0 | 87.8 | 0.0323 | |
| 9千 | T7-WT | 9.5 | 81.9 | 2.9180 |
| 清潔文具™ T7 | 9.0 | 82.0 | 0.0379 | |
| A公司 | 7.2 | 78.7 | 0.1805 |
使用 當封端濃度為 2.5 mM 時，與 WT 相比，在不同片段長度下仍可實現出色的封端效率。此外，在細胞層面也觀察到了優異的蛋白質表現性能。
| Cap類比輸入（毫米） | 封蓋效率（％）4K | |
| 野生型 | 低 dsRNA | |
| 10 | 100 | 100 |
| 5 | 100 | 100 |
| 2.5 | 100 | 100 |
已在美國提交專利。
產品資訊
| 產品名稱 | 目錄編號 | 規格 | 體積 |
| 克利斯克里普商標 T7 RNA聚合酶 （低 dsRNA，250 U/μL） | 10628ES | 100 /2500 /25,000KU | 400 μL/10 毫升/100 毫升 |
| 10629ES | 100 /2500 /25,000KU | 400 μL/10 毫升/100 毫升 |