Das Protokoll der Ferkelmodellierung bei Colitis ulcerosa unter Verwendung von Dextran-Natriumsulfat (DSS)
Eine erhöhte Darmdurchlässigkeit ist einer der ätiologischen Faktoren von IBD und kann daher als Biomarker zur Beurteilung der Schwere von Dünn- und Dickdarmschäden verwendet werden. D-Mannitol, ein inertes kleines Kohlenhydratmolekül, das entlang der gesamten Kryptenzottenachse absorbiert werden kann, wurde zur Beurteilung der Darmdurchlässigkeit in vivo verwendet[1].
Abbildung 1. Ferkel
1. Modellbau
2. Ergebnisse
3. Links zu dieser Ressource
4. Erfolgreiches Modellierungsbeispiel mit
5. Produktbestellung
6. Veröffentlichte Artikel mit unseren Reagenzien
7. Lesen beachten
1. Modellbau
1.1 Tiermodell
Yorkshire-Ferkel im Alter von 4-5 Tagen
1.2 Werkstoff
DSS(
1.3 Protokoll
a) Yorkshire-Ferkel wurden einzeln in Metallställen mit Gummiboden in einem kontrollierten Raum mit 12-stündigem Hell-Dunkel-Zyklus untergebracht. Die Raumtemperatur wurde bei 26 °C gehalten und durch eine Heizlampe ergänzt;
b) Die Ferkel wurden dreimal täglich mit einer handelsüblichen Milchaustauschernahrung gefüttert, was ihrer Ad-libitum-Aufnahmemenge entsprach;
c) Den Tieren wurde chirurgisch ein intragastrischer Katheter angelegt. Der Katheter war an einem Silikonpflaster (etwa 8 x 12 mm) verankert, das weiter an die Magenwand genäht wurde, wobei etwa 30 mm in das Magenlumen eingeführt wurden. Jedes Tier erhielt eine maßgeschneiderte Weste mit einer Rückentasche zur vorübergehenden Aufbewahrung des äußeren Kathetersegments.
d) Die Tiere wurden in eine positive Kontrollgruppe (Pos), eine negative Kontrollgruppe (Neg) und eine Versuchsgruppe (Trp) aufgeteilt;
e) Positive Kontrollgruppe (Pos): Perfusion DSS (5 Tage) + Kochsalzlösung (5 Tage); Negative Kontrollgruppe (Neg): Perfusion mit normaler Kochsalzlösung (10 Tage); Experimentalgruppe (Trp): Infusion DSS (5 Tage) + therapeutische Medikamente (5 Tage);
f) DSS-Dosis: 1,25 g/kg, orale Einnahme über 5 Tage;
g) Am Endpunkt wurden die Tiere durch ein Inhalationsanästhetikum, Isofluran, sediert und durch eine intrakardiale Injektion von 0,3 ml Ethanol (Pentobarbital) pro kg Körpergewicht (KG) eingeschläfert.
h) Dickdarmgewebe wurde sofort in kalter Kochsalzlösung (154 mM, pH 7,4) mit 0,1 mM Phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF) gespült und für die Histologie beprobt oder für die anschließende Analyse in flüssigem Stickstoff schockgefroren.
2. Ergebnisse
2.1 Darmpermeabilitätsanalyse
Abbildung 2. Die durch DSS induzierte D-Mannitol-Konzentration bei Ferkeln war höher als in der Kontrollgruppe
Durch DSS stieg die D-Mannitol-Konzentration bei Ferkeln an und die Darmbarriere wurde zerstört.
2.2 Abschnitt „H&E-pathologische Färbung“
Abbildung 3. Abschnitt mit pathologischer H&E-Färbung (A: Neg-Gruppe; B: Pos-Gruppe)
Der Schweregrad der Dickdarmentzündung wurde anhand von Entzündungsbewertungen und histologischen Messungen beurteilt.In der mit DSS behandelten Pos-Gruppe war die Nischenstruktur verzerrt, entzündliche Zellen infiltrierten die Schleimhaut und Submukosa, es kam zu Nischenabszessen und einer Nischenentzündung.
2.3 Nachweis von Entzündungsfaktoren
Abbildung 4. Nachweis von Entzündungsfaktoren
Die Konzentration von zwei Zytokinen in der mit DSS behandelten Pos-Gruppe stieg[1].
3. Links zu dieser Ressource
[1]Connie J. Kim, et al. Journal of Nutritional Biochemistry 21 (2010) 468–475.
4. Erfolgreiches Modellierungsbeispiel mit Yeasen DSS
Tabelle 1 Konstruktion verschiedener Enteritismodelle mit DSS
| Modell | Modellierungsbeispiele | Modellierungsplan | Modellierungsergebnisse | Auswertung nutzen |
| akute Kolitis | BALB/c Mäuse, weiblich, 6-8 Wochen, 25 g | 3%-5% DSS trinken 7 Tage hintereinander frei | Am 5. Tag erschien Die Länge des Dickdarms war verkürzt, HE-Färbung und die Entzündung war offensichtlich | Die Formgeschwindigkeit ist schnell und die Zeit kurz. Im Einklang mit den Eigenschaften des akuten Kolitismodells |
| C57BL/6 Mäuse, männlich, 8 Wochen, 20 g | 3–5 % DSS durch Schlundsonde, kontinuierliche Verabreichung | Tag 5 tritt auf, Verkürzung des Dickdarms, Gewichtsverlust, Blut im Stuhl, Durchfall | Hohe Schimmelrate und kurze Dauer. Im Einklang mit den Merkmalen des akuten Kolitismodells | |
| chronische Kolitis | C57BL/6 Maus, männlich, 8 Wochen, 22 g | 1-2 % DSS durch Schlundsonde, kontinuierliche Verabreichung | Tag 40 tritt auf, Verkürzung des Dickdarms, Gewichtsverlust, Blut im Stuhl, Durchfall | Hohe Formrate. Im Einklang mit den Eigenschaften des chronischen Kolitismodells |
| Dickdarmkrebs | C57BL/6 Maus, männlich, 8 Wochen, 21 g | 1%-2% DSS ad libitum für 5 Tage für 3 Wochen | 14 Wochen mit verkürzter Dickdarmlänge, Gewichtsverlust, HE-Färbung und offensichtlicher Entzündung | Hohe Formungsrate. Im Einklang mit den Eigenschaften des Dickdarmkrebsmodells |
5. Produktbestellung
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Tabelle 2. Produktreihenfolge
| Produktname | Katzen-Nr. | Größe |
| Dextransulfat-Natriumsalz zur Modellierung von Colitis MW: 36000~50000 | 60316ES25 | 25g |
| 60316ES60 | 100 g | |
| 60316ES76 | 500 g | |
| 60316ES80 | 1 kg |
6. Veröffentlichte Artikel mit unseren Reagenzien
[1]Li Zhao, Fei Wang, Zhengwei Cai, et al.Verbesserung der Arzneimittelnutzungsplattform mit injizierbarem mukoadhäsivem Hydrogel zur Behandlung von Colitis ulcerosa[J]. Chemical Engineering Journal.424(2021)130464.IF=16.744
[2]Lingjun Tong, Haining Hao, Zhe Zhang, et al.Aus Milch gewonnene extrazelluläre Vesikel lindern Colitis ulcerosa, indem sie die Darmimmunität regulieren und die Darmmikrobiota umgestalten[J].Theranostics.2021; 11(17): 8570-8586 WENN=11,556
[3]Li, Y., Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Aus dem Darm kommensale Valeriansäure gewonnene Säure schützt vor Strahlenschäden. Darmmikroben,.2020 .1–18.IF=10.245
[4]Jingjing Gan, Yuxiao Liu, Lingyu Sun, et al.Oral verabreichte Nukleotid-Abgabepartikel aus der Mikrofluidik zur Behandlung entzündlicher Darmerkrankungen[J]. Applied Materials Today.2021 Dez;25:101231 WENN=10,041
[5]Mengmeng Xu, Ying Kong, Nannan Chen,et al.Identifizierung der immunbezogenen Gensignatur und Vorhersage des CeRNA-Netzwerks bei aktiver Colitis ulcerosa[J].Frontiers in Immunology.2022; 13: 855645. WENN=7,561
[6]JialiDong, YuanLi, HuiwenXiao, et al.Orale Mikrobiota beeinflusst die Wirksamkeit und Prognose der Strahlentherapie bei Darmkrebs in Mausmodellen[J].Cell reports.2021, 109886.IF=9.423
[7]Hao H, Zhang X, Tong L, Liu Q, et al.Lactobacillus plantarumWirkung von extrazellulären Vesikeln aus Q7 zu Darmmikrobiota und Colitis ulcerosa bei Mäusen[J].Frontiers in Immunology.2021.777147 .IF=7.561
[8]Yaohua Fan, Yanqun Fan, Kunfeng Liu, et al. Essbares Vogelnest lindert durch Dextransulfat-Natrium induzierte Colitis ulcerosa bei C57BL/6J-Mäusen durch Wiederherstellung des Th17/Treg-Zellgleichgewichts[J].Frontiers in Pharmacology.2021.632602.IF=7.561
[9]Jia-Rong Huang, Sheng-Te Wang, Meng-Ning Wei et al. Piperlongumin lindert Mauskolitis und Kolitis-assoziierten Darmkrebs [J].Frontiers in Pharmacology.2020.586885. WENN=7,561
[10]Gao X, Fan W, Tan L, et al. Soja-Isoflavone lindern experimentelle Kolitis, indem sie auf ERα/NLRP3-Inflammasom-Signalwege abzielen[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83.IF=6.048
[11]Lujuan Xing, Lijuan Fu, Songmin Cao,et al.Die entzündungshemmende Wirkung von aus Rinderknochengelatine gewonnenen Peptiden bei LPS-induzierter RAW264.7 Makrophagenzellen und Dextransulfat-Natrium-induzierte C57BL/6-Mäuse[J]. Nutrients 2022, 14, 1479. WENN=5,717
[12] Wang S, Huang J, Bräunen KS, et al. Isosteviolnatrium lindert durch Dextran-Natriumsulfat verursachte chronische Kolitis durch die Regulierung des metabolischen Profilings, der Makrophagenpolarisation und des NF-B-Signalwegs [J]. Oxidative Medizin und zelluläre Langlebigkeit. 2022,4636618. WENN=5,076
7.Grüße zum Lesen
Entwicklung eines Dextran-Natriumsulfat-(DSS)-Modells für Colitis ulcerosa
Etablierung eines durch Azoxymethan (AOM) und Dextransulfat-Natrium (DSS) induzierten Colitis-assoziierten Krebsmodells
Das Protokoll zur Modellierung von Colitis ulcerosa bei Drosophila unter Verwendung von Dextran-Natriumsulfat (DSS)