Angiogenese ist eng mit Wundheilung, Entzündungen, rheumatoider Arthritis, diabetischer Retinopathie, Makuladegeneration und Tumorwachstum verbunden. Während des Wachstums eines Organismus ist Angiogenese ein wichtiger Teil des Wachstums neuen Gewebes. Im Erwachsenenalter fehlt fast jedem normalen Gewebe aufgrund des Gleichgewichts zwischen pro-angiogenetischen und anti-angiogenetischen endogenen Faktoren ein großer Teil der physiologischen Angiogenese, abgesehen von periodischen Ereignissen, die in speziellen Organen streng reguliert sind. Wenn das Gleichgewicht in Richtung einer Förderung der Angiogenese gestört wird, wechseln mikrovaskuläre Endothelzellen (ECs) zu einem angiogenen Phänotyp und lösen dadurch eine angiogene Reaktion aus, die eliminiert oder beschleunigt werden kann.
In der Studie wurden traditionelle experimentelle Methoden zur In-vivo-Angiogenese eingesetzt, darunter Hornhautmikrotaschen, Mesenterium, Schwamm-/Matriximplantate, Bandscheibenanalyse (DAS), Zebrafische usw. Diese Experimente sind jedoch nicht nur technisch anspruchsvoll, teuer und zeitaufwändig, sondern werfen auch ethische Fragen auf. Im Vergleich zu In-vivo-Angiogeneseexperimenten ist es wirtschaftlicher und praktischer, eine spezielle Matrix zu verwenden, um die Zellangiogenese in vitro aufrechtzuerhalten. Die am häufigsten verwendete Matrix zur Aufrechterhaltung des Zellwachstums ist ein lösliches Basalmembranpräparat, das aus EHS-Maustumoren extrahiert wird – Matrixgel.
Die Hauptbestandteile des Matrixgels sind Laminin, Kollagen Typ IV, Heparansulfat-Proteoglykan (HSPG) und Nestin. Außerdem enthält es Wachstumsfaktoren wie TGF-beta, EGF, IGF, FGF, Gewebeplasminogenaktivator und andere Wachstumsfaktoren, die in EHS-Tumoren enthalten sind. Es bietet Unterstützung, Zugfestigkeit und Gerüstunterstützung für Gewebe und Zellen und kann auch als dreidimensionale Unterstruktur für Zelladhäsion und -bewegung sowie als Reservoir für Wachstumsfaktoren, Chemokine und Zytokine dienen. Es kann auch als Signal für die Zellmorphogenese und -differenzierung wirken.
Produkteigenschaften
Hohe Sicherheit: LDEV (Lactate Dehydrogenase Enhancement Virus) frei
Konzentrationsvielfalt: Konzentrationsbereich von 8~20 mg/mL
Gute Chargenstabilität: Strenger Produktions- und Qualitätskontrollprozess, um eine stabile Leistung zwischen den Chargen zu gewährleisten
Niedriges Endotoxin: Endotoxingehalt ≤4 EU/mL
Schadstoffnachweis: keine Mykoplasmen-, Bakterien- und Pilzrückstände nachgewiesen.
Angiogenese-Experiment
- Matrixgel-Vorbereitung
1) Einen Tag vor dem Experiment das Ceturegel entfernenTM Matrixgel aus dem Gefrierschrank nehmen und über Nacht bei 4°C in den Kühlschrank stellen, um es zu schmelzen und die verwendeten Verbrauchsmaterialien vorzukühlen.
2) Platzieren Sie das CeturegelTM Bewahren Sie das Matrixgel vor dem Experiment stets in einer Eisbox auf.
3) Öffnen Sie die Sterilisationsverpackung der angiogenen Objektträger und entnehmen Sie die Objektträger.
4) 10 μl Ceturegel hinzufügenTM Matrix Gel in jede Vertiefung geben und darauf achten, dass die Spitze der Pistole beim Hinzufügen von Ceturegel senkrecht zur Oberseite der inneren Vertiefung steht.TM Matrixgel, um zu verhindern, dass Matrixgel durch die obere Vertiefung fließt und Gelrückstände zurückbleiben.
- Gel
1) Bedecken Sie zunächst den Objektträger mit einem Deckel und bereiten Sie eine 10 cm große Petrischale vor, indem Sie ein wassergetränktes Papiertuch hineinlegen, sodass eine Nassbox entsteht.
2) Legen Sie den Objektträger in die Petrischale und verschließen Sie ihn mit dem Deckel.
3) Legen Sie die ganze Petrischale in ein CO2 Inkubator und lassen Sie es etwa 30 Minuten stehen, um zu warten, bis das Gel kondensiert, während Sie die Zellsuspension vorbereiten.
- Zellausbreitung
1) Bereiten Sie die verdauten Zellen zu einer Zellsuspension mit einer Dichte von 2×10 vor5 Zellen/ml und gut mischen.
2) Entfernen Sie die Blutgefäßobjektträger mit den zu Gel erstarrten Blutgefäßen.
3) Geben Sie 50 μl Zellsuspension in jede Vertiefung. Achten Sie dabei darauf, dass die Spitze der Pistole senkrecht zur Oberseite der oberen Vertiefung steht und das Gel in der unteren Vertiefung nicht berührt.
4) Fügen Sie das Zellkulturmedium hinzu, decken Sie es ab und lassen Sie es stehen. Nach einer gewissen Zeit sinken alle Zellen nach unten und fallen auf die Oberfläche des Matrixgels.
- Bildaufnahme
Beobachten Sie regelmäßig die Zellwachstumsrate, machen Sie Fotos und bewahren Sie Bilder auf.
- Präsentation der Ergebnisse
Notiz:Angiogenese- und Fluoreszenzergebnisse
Produktempfehlung
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