Das kreisförmige RNA -Forschungswerkzeug -RNase R.

Das zirkuläre RNA-Forschungstool - RNAse R

—— Beschleunigung der Entwicklung zirkulärer RNA-Medikamente

In den letzten Jahren sind mRNA-Impfstoffe/-Medikamente allmählich ins Blickfeld der Öffentlichkeit gerückt. mRNA-Impfstoffe/-Medikamente haben die Vorteile einer schnellen Entwicklung, niedriger Kosten und einfachen Herstellung, aber da mRNA selbst leicht abbaubar ist, wird derzeit hauptsächlich die Stabilität der mRNA-Präparation durch Hinzufügen eines Hutes und eines Schwanzes verbessert und die mRNA-Translation unterstützt. In den letzten Jahren haben Forscher einen neuen RNA-Typ entdeckt – zirkuläre RNA (Circular RNA, circRNA). Solche RNAs haben eine kovalente, geschlossene Ringstruktur, die nicht so leicht abbaubar ist. Im Vergleich zu mRNA ist circRNA stabiler und kann eine nicht-hut-abhängige Translation erreichen. Daher bietet die Entdeckung von CIRCRNA Möglichkeiten für die Entwicklung einer neuen Generation von RNA-Impfstoffen und -Medikamenten mit einfacherer und besserer Stabilität.

Abbildung 1: Der Prozess des RNA-Impfstoffs 1

Der Produktionsprozess von CIRCRNA umfasst: Vorlagenvorbereitung, In-vitro-Transkription, DNA-Vorlagenentfernung, Zirkularisierung und Reinigung. Nachdem die RNA zirkularisiert wurde, muss die unbemannte RNA mit Ribonuklease R (Ribonuklease R, RNASE R) verdaut werden, um CirCRNA anzureichern. Yeasen verfügt über eine Plattform für molekulare Enzymtechnik und rationale Evolution. Gleichzeitig wird die Qualität des Produkts sichergestellt. Das Forschungs- und Entwicklungsteam von Yeasen hat erfolgreich RNASE R-Enzyme mit hoher Reinheit und hoher Aktivität entwickelt.

RNASE R (KAT.-Nr.: 14606ES) ist eine Mg2+-abhängige 3'→5'-Ribonukleinsäure-Exonuklease, die aus E. coli gewonnen wird. Sie kann alle linearen RNAs verdauen, verdaut aber keine CirCRNA und Lariat-RNA. Sie wird häufig verwendet, um lineare RNA-Moleküle zu entfernen und den Zweck der Anreicherung nichtlinearer RNA wie CirCRNA und Lariat-RNA zu erreichen.

Merkmale

Proteinreinheit (SDS-PAGE) ≥95 %

Abbildung 2: Proteinreinheitsnachweis: Verschiedene Volumina (1 μL, 2 μL, 3 μL) des Produkts (Kat.-Nr. 14606ES) zeigen eine hohe Reinheit von ≥95 %.

Keine Rückstände Exonuklease

Abbildung 3: 20 U RNASE R wurden zu 0,5 μg λDNA-Hind III Digest hinzugefügt und 4 Stunden lang bei 37 ℃ inkubiert. Das Ergebnis zeigt, dass keine Reste Exonuklease wurde in den RNASE R-Produkten (CAT#14606ES) nachgewiesen.

Fähigkeit der Verdauung linearer RNA und CircRNA

Abbildung 4: RNASE R (CAT#14606ES) kann lineare RNA-Moleküle verdauen
Abbildung 5: CircRNA verträgt die Behandlung mit RNASE R (CAT#14606ES).

Produkt

Katze

Größe

RNAse R (20 U/μL)

14606ES

250U/2500U/10000U
RNase R (GMP-Qualität, 20 U/μL) 14615ES 250U/2500U/10000U

T7 RNA-Polymerase, GMP-Qualität (250 U/μL)

10625ES

10 KU/100 KU/2500 KU
CleaScrip™ T7 RNA-Polymerase (niedrige dsRNA, 250 U/μL) 10628ES 10 KU/100 KU/2500 KU

Referenz

  1. Qu L, Yi Z, Shen Y, et al. Zirkuläre RNA-Impfstoffe gegen SARS-CoV-2 und neue Varianten. Zelle.2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
  2. Chen L, Wang C, Sun H et al. Die bioinformatische Toolbox zur Entdeckung und Analyse von circRNA. Brief Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001

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