Der erste bestätigte Fall von Affenpocken wurde Anfang Mai in Großbritannien gemeldet und brach schnell in nicht-endemische Länder und Regionen aus. Bis zum 21. September 2022 wurden weltweit 106 Länder/Regionen mit insgesamt 63.117 Fällen bestätigt. Am 16. September bestätigte Chongqing einen importierten Fall von Affenpocken, den ersten Fall auf dem chinesischen Festland, der gesellschaftliche Besorgnis erregte.

Abbildung 1. Weltweite Karte der Affenpockenausbrüche 2022 (vom CDC)

1. Was sind Affenpocken?
2. Die Geschichte der Affenpocken
3. Wie es sich verbreitet
4. Anzeichen und Symptome
5. Nachweismethode
6. Produktübereinstimmung
7. Produktbestellung

1. Was sind Affenpocken?

Das Affenpockenvirus ist ein doppelsträngiges DNA-Virus mit einer Gesamtlänge von etwa 197 kb. Es gehört zur Gattung Orthopoxvirus der Familie Poxviridae. Es gibt zwei Zweige des Affenpockenvirus (westafrikanischer Zweig und Kongobecken-Zweig). Unter ihnen beträgt die Letalitätsrate des westafrikanischen Zweigs etwa 3,6 %, während die Letalitätsrate des Kongobecken-Zweigs 10,6 % erreichen kann. Proben von Affenpockenfällen, die seit Mai 2022 in nicht-endemischen Gebieten gefunden wurden, zeigten durch Sequenzanalyse die westafrikanische Klade^[1].

Abbildung 2. Bild von Affenpocken (Bild vom CCDC)

2. Die Geschichte der Affenpocken

Affenpocken wurden 1958 entdeckt, als in Affenkolonien, die zu Forschungszwecken gehalten wurden, zwei Ausbrüche einer pockenähnlichen Krankheit auftraten. Obwohl die Krankheit den Namen „Affenpocken“ trägt, ist ihre Quelle unbekannt. Afrikanische Nagetiere und nichtmenschliche Primaten (wie Affen) könnten jedoch Träger des Virus sein und Menschen infizieren.^[2].
Der erste Fall von Affenpocken beim Menschen wurde 1970 registriert. Vor dem Ausbruch im Jahr 2022 wurden Affenpocken bei Menschen in mehreren zentral- und westafrikanischen Ländern gemeldet. Zuvor waren fast alle Affenpockenfälle bei Menschen außerhalb Afrikas auf internationale Reisen in Länder zurückzuführen, in denen die Krankheit häufig auftritt, oder auf importierte Tiere. Diese Fälle traten auf mehreren Kontinenten auf^[2].

3. Wie es sich verbreitet

Die Krankheit kann von Tieren auf Menschen, von Menschen auf Menschen und über die Umwelt auf Menschen übertragen werden.
Es ist mittlerweile klar, dass Affenpocken Menschen auf drei Arten infizieren können: Erstens von infizierten Tieren auf Menschen. Das Virus kann durch verletzte Haut, Atemwege oder Schleimhäute (Augen, Nase oder Mund) in den Körper gelangen. Zweitens erfolgt die Übertragung durch engen Kontakt zwischen Menschen, einschließlich Geschlechtsverkehr, Küssen, Umarmen oder Berühren der Körperteile von Affenpocken sowie Kontakt mit viruskontaminierter Kleidung, Bettwäsche, Handtüchern oder Geschirr und anderen Gegenständen, die ebenfalls infiziert sein können. Drittens erfolgt die Übertragung durch Atemtröpfchen.^[3].

4. Anzeichen und Symptome

Die wichtigsten klinischen Manifestationen sind Fieber, Hautausschlag und Lymphadenopathie.
Zu den häufigsten Symptomen im Frühstadium zählen Fieber, Kopfschmerzen, Muskelschmerzen und geschwollene Lymphknoten. Der Ausschlag tritt 1 bis 3 Tage nach Ausbruch der Krankheit auf. Der typische Ausschlag tritt zuerst im Gesicht auf und breitet sich allmählich auf die Gliedmaßen und andere Körperteile aus. Der Ausschlag ist meist zentrifugal., Ausschläge im Gesicht und an den Gliedmaßen kommen häufiger vor als am Rumpf, Ausschläge können an den Handflächen und Fußsohlen auftreten und die Anzahl der Ausschläge variiert von einigen bis zu Tausenden; die Mundschleimhaut, der Verdauungstrakt, die Geschlechtsorgane, die Bindehaut und die Hornhaut können ebenfalls betroffen sein.
Die Symptome halten im Allgemeinen 14 bis 21 Tage an und klingen bei den Patienten normalerweise von selbst ab. Erytheme oder Hyperpigmentierung oder sogar Narben können zurückbleiben, nachdem die Krusten abgefallen sind. Es ist erwähnenswert, dass die Kruste ansteckend bleibt, bis sie abfällt und sich darunter eine neue Hautschicht bildet.^[3].

5. Nachweismethode

Um die Affenpockenepidemie wirksam zu verhindern und zu kontrollieren und die Einfuhr und Verbreitung des Virus zu verhindern, haben globale IVD-Unternehmen aktiv reagiert. Als Lieferant von Rohstoffen für die Produktion von IVD-Erkennungsreagenzien und Reagenzlösungen bietet YEASEN eine Komplettlösung zum effizienten Nachweis des Affenpockenvirus. Von der Nukleinsäureextraktion über Reagenzkomponenten (Enzymreagenzien und Pseudoviren) bis hin zu halbfertigen Kits (Primersonden, Enzymreagenzien und Plasmidkontrollen) kann YEASEN Sie zuverlässig beliefern.

Abbildung 3. Methode zur Virenerkennung

5.1 Methodenvorteil

• Effiziente und bequeme Bedienung – ein Satz Kits, einschließlich aller Komponenten, ohne umständliche Bedienung, Hinzufügen in einem Schritt
• Hohe Nachweisempfindlichkeit – Methode mit genetisch verändertem Antikörper, Hot-Start-Taq-Enzym, 1 Kopie/Reaktion kann ebenfalls nachgewiesen werden
• Hohe Reagenzstabilität – 1 Woche lang bei 37 °C lagern, stabile Leistung nach wiederholtem Einfrieren und Auftauen
• Vermeidung von UDG-Verschmutzung – Das dUTP/UDG-System wird dem System hinzugefügt, um das Risiko einer Aerosolkontamination wirksam zu verhindern.
• Anwendbar auf mehreren Plattformen – Geeignet für Bio-Rad CFX96, ABI Q5 und Slan

5.2 Produktübereinstimmung

• Reagenzien zur Nukleinsäureextraktion: MolPure™ Magnetischer Abstrich für virale DNA/RNA-Kit (Kat.-Nr. 18300ES)
• Reagenz zum Nachweis von Affenpocken: Echtzeit-qPCR-Kit für Affenpockenviren(Kat.-Nr. 13862ES/Kat.-Nr. 13863ES)
• Affenpocken-Pseudovirus: Affenpocken-Pseudovirus (Kat.-Nr. 12099ES/Kat.-Nr. 12100ES)

6. Empfohlene Produkte

6.1 Echtzeit-qPCR-Kit für Affenpockenviren (Kat.-Nr. 13862ES)

Produktvorteile:
Effiziente und komfortable Bedienung
Hohe Sensitivität und gute Spezifität
Hohe Stabilität
Gute Wiederholgenauigkeit

6.1.1 Fallbeispiel:

• Super thermische Stabilität für 37℃

Der MPXV wurde verstärkt, indem Cat#13862ES 7 Tage lang bei 37 °C aufbewahrt wurde. Die Ergebnisse zeigten, dass der Ct-Wert und der Fluoreszenzwert durch 7 Tage bei 37 °C nicht signifikant beeinflusst wurden und die thermische Stabilität stark war.

Abbildung 4. Yeasen (Cat#13862ES) 37℃ beschleunigte 7-Tage-Stabilitätsüberprüfung

• Extrem hohe Frost-Tau-Stabilität

Das MPXV wurde durch Einfrieren und Auftauen von Cat#13862ES bei -20℃ jeweils 10-mal, 20-mal und 50-mal verstärkt.Die Ergebnisse zeigten, dass 10-, 20- und 50-maliges Einfrieren und Auftauen bei -20 °C keinen signifikanten Einfluss auf den Ct-Wert und den Fluoreszenzwert hatte und die Gefrier- und Auftaustabilität stark war.

Abbildung 5. Yeasen(Cat#13862ES)-20℃ Frost-Tau-Stabilitätsüberprüfung

• Ultrahohe Empfindlichkeit, 1 Kopien/μL können ebenfalls erkannt werden

Unter Verwendung des Affenpockenprodukts Yeasen (Kat.-Nr. 13862ESES) wurden 1000 Kopien/µl, 100 Kopien/µl, 10 Kopien/µl, 1 Kopie/µl und ein negativer Leerwert (NTC) verwendet, um MPXV zu erkennen. Es ist ersichtlich, dass auch eine einzelne Kopie erkannt werden kann (Ct-Wert liegt bei etwa 38), und der 48-Well-NTC-Test wurde wiederholt, mit einer stabilen Basislinie, negativen NTC-Spitzen und ohne Tailing-Phänomen, mit hoher Sensitivität und hoher Spezifität.

Abbildung 6. MPXV-Empfindlichkeitserkennung

Abbildung 7. MPXV-Spezifitätserkennung

• Reagenzien sind stabil und reproduzierbar

Das Yeasen-Affenpocken-Nachweiskit (Kat.-Nr. 13862ESES) wurde ausgewählt, um 10 wiederholte Tests für niedrige, mittlere und hohe Konzentrationen positiver Proben durchzuführen. Die Ergebnisse zeigten, dass der CV der positiven Proben im FAM-Kanal kleiner oder gleich 2 % war und die Blindkontrolle keine Peaking- und kein Tailing-Phänomen aufwies. Gute Wiederholbarkeit.

Abbildung 8. Wiederholbarkeitstest

6.2 Echtzeit-qPCR-Kit für Affenpockenviren (UDG Plus)(Kat.-Nr. 13863ES)

Produktvorteile:

⑴ Effiziente und komfortable Bedienung
⑵ Hohe Sensitivität und gute Spezifität
⑶ Super Stabilität
⑷ Gute Wiederholbarkeit
⑸ Vermeidung von UDG-Umweltverschmutzung

6.2.1 Fallbeispiel:

• Super thermische Stabilität für 37℃

Der MPXV wurde verstärkt, indem Cat#13863ES 7 Tage bzw. 14 Tage lang bei 37 °C platziert wurde. Die Ergebnisse zeigen, dass nach 7 Tagen bzw. 14 Tagen bei 37 °C keine signifikanten Auswirkungen auf den Ct-Wert und den Fluoreszenzwert auftreten und die thermische Stabilität stark ist.

Abbildung 9. Yeasen (Cat#13863ES) 37℃ beschleunigte 7-Tage-, 14-Tage-Stabilitätsüberprüfung

• Extrem hohe Frost-Tau-Stabilität

Cat#13863ES wurde 50-mal bei -20 °C eingefroren und aufgetaut, um den MPXV zu verstärken. Die Ergebnisse zeigten, dass das 50-malige Einfrieren und Auftauen bei -20 °C keinen signifikanten Einfluss auf den Ct-Wert und den Fluoreszenzwert hatte und die Gefrier- und Auftaustabilität stark war.

Abbildung 10. Yeasen(Cat#13863ES) -20℃ Frost-Tau-Stabilitätsüberprüfung

• Hohe Sensitivität und Spezifität

5 Kopien/µl MPXV und negativer Leerwert (NTC) wurden mit dem Affenpockenprodukt Yeasen (Kat.-Nr. 13863ESES) getestet. Die Ergebnisse zeigten, dass die Basislinie stabil war, die Nachweisrate von FAM 100 % betrug, die Mindestnachweisgrenze 5 Kopien/µl betrug und während des wiederholten Tests von NTC in 48 Vertiefungen die Basislinie der FAM- und VIC-Kanäle stabil war, der negative NTC-Peak kein Tailing-Phänomen aufwies und eine hohe Sensitivität und Spezifität aufwies.

Abbildung 11.MPXV Empfindlichkeitserkennung

Abbildung 12. MPXV-Spezifitätserkennung

• Gute Linearität der Reagenzien

Die positive Vorlage wurde 10-fach von der Konzentration 1×105 Kopien/μl verdünnt und das Yeasen qPCR Monkeypox Kit (Cat#13863ES) wurde verwendet, um die Erkennung zweimal zu wiederholen. Der Logarithmus der anfänglichen Kopienzahl ist die Abszisse und der Ct-Wert ist die Ordinate. Die Standardkurve wurde erstellt und die Ergebnisse zeigten, dass der FAM-Kanal des Monkeypox-Gens einen linearen Bereich von 10～1×105 Kopien/μl und R2>0,99 hatte, was eine gute lineare Beziehung darstellte.

Abbildung 13. Linearitätstest

• Stabile und reproduzierbare Reagenzien

Das Yeasen qPCR Monkeypox Kit (Cat#13863ES) wurde ausgewählt, um 10 wiederholte Tests für niedrige, mittlere und hohe Konzentrationen von positiven Proben und 20 wiederholte Tests für negative Kontrollen (NC) und Blindkontrollen (NTC) durchzuführen. Die Ergebnisse zeigen, dass: Der CV der positiven Proben im FAM-Kanal weniger als 3 % beträgt und die negative Kontrolle und die Blindkontrolle keine Peaking- und kein Tailing-Phänomen aufweisen; die Ct-Werte des VIC-Kanals NC liegen alle unter 35, der CV beträgt weniger als 0,3 %, und NTC weist keine Peaking- und kein Tailing-Phänomen auf und die Wiederholbarkeit ist gut.

Abbildung 14. Wiederholbarkeitstest (FAM)

Abbildung 15. Wiederholbarkeitstest (VIC)

7. Produktbestellung

Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd. wurde 2014 gegründet und ist ein Hightech-Unternehmen, das sich mit der Forschung und Entwicklung sowie der Produktion von Rohstoffen für Werkzeugenzyme und Antigen-Antikörper beschäftigt. Zu seinen Produkten gehören molekulardiagnostische Enzyme, Proteine ​​und Antikörper, die in der Pharmazie, bei Lebensmittelsicherheitstests, in der Züchtung, im Justizwesen und in anderen Branchen verwendet werden. Wir sind bestrebt, Kunden im Bereich Biowissenschaften qualitativ hochwertige Produkte und Dienstleistungen anzubieten. Die Produktkaufrichtlinien für das Affenpockenvirus lauten wie folgt:

Tabelle 1.Ähnliche Produkte

Verweise

[1] Chinesisches Zentrum für Krankheitskontrolle und Prävention: Gesundheitstipps zu Affenpocken
[2] CDC:Über Affenpocken | Affenpocken | Pockenvirus | CDC
[3] Yulin Evening News: Die Quelle des ersten Affenpockenfalls auf dem chinesischen Festland wurde identifiziert! Notfallerinnerung der Seuchenkontrolle in Guangxi