Die Isothermal Nucleic Acid Amplification Technology (INAAT) wird hauptsächlich in der Molekularbiologie zur Identifizierung und Analyse von Nukleinsäuren eingesetzt. Sie wird hauptsächlich für DNA, RNA, Zellproteine, Ionen, Moleküle usw. verwendet. INAAT ermöglicht eine schnelle, sensible und genaue Diagnose von genetischen und infektiösen Krankheiten. Seine amplifizierten Produkte können in Biosensoren, Bioimaging und Biomedizin verwendet werden. Darüber hinaus wird INAAT zur Erkennung verschiedener Krankheiten wie Grippe, HIV, Tuberkulose, Chlamydien, Gonorrhoe (CT/NG), Hepatitis A und Hepatitis B usw. verwendet. Je nach Technologie kann die isothermale Amplifikation in LAMP, RPA, CPA, SDA, RCA, HDA usw. unterteilt werden. Was ist also LAMP? Was sind die Vorteile von RT-LAMP?

1. Was ist LAMP?
2. Was sind die Vorteile von RT-LAMP?
3. Was sind die Merkmale der "Cat#13762 RT-LAMP Farbstoff-Assay-Kit (UDG plus)"?
4. Was sind die Merkmale des „Cat#13906 RT-LAMP pH Sensitive Dyestuff Kit“?
5. Kann es zu gefriergetrockneten Perlen gefriergetrocknet werden?
6. Welche Produkte können wir empfehlen?

1. Was ist LAMP?

LAMP ist derzeit eine weit verbreitete Technologie im Bereich der isothermen Amplifikation. Es verwendet 4-6 Primer, die 6 spezifische Regionen auf dem Zielgen identifizieren können, und basiert auf der starken Strangverdrängungsaktivität der Bst-DNA-Polymerase. Die interne Amplifikation des Zielprodukts kann 10 erreichen.⁹-10¹⁰ mal. Es gibt viele LAMP-Erkennungsmethoden, darunter die Farbstoffmethode, die pH-kolorimetrische Methode, die Trübungsmethode, HNB, Calcein usw. Die neu entwickelte Fluoreszenzmethode und die pH-Erkennungskits unseres Unternehmens weisen eine hohe Empfindlichkeit, gute Primer-Anwendbarkeit und hervorragende Leistung in Bezug auf Spezifität, Toleranz und Stabilität auf. Im Vergleich zu ähnlichen Produkten hat es offensichtliche Vorteile.

2. Was sind die Vorteile von RT-LAMP?

Einfach zu bedienen: kurze Reaktionszeit, geringe Anforderungen an die Laborumgebung, kann mit Mikrofluidik-Chips oder tragbaren Detektoren zur schnellen Erkennung verwendet werden;
Empfindlichkeit: 50 Kopien/T, 25-μL-System;
Gute Anwendbarkeit der Primer: N-2-Primer, E-Gen-Primer, interne Referenzprimer-Amplifikation usw. haben eine gute Anwendbarkeit;
Spezifität: 48-Well-NTC hat überhaupt keine Peaks und die Spezifität ist stark;
Verträglichkeit: gute Verträglichkeit gegenüber einigen Nukleinsäure-Freisetzungsmitteln;
Hohe Stabilität: 5 Tage lang bei 37 °C mit guter Stabilität stabil und kann mehr als 10-maligem Einfrieren und Auftauen standhalten;
Marktvorteil: Die Leistung ist ähnlichen in- und ausländischen Konkurrenzprodukten überlegen und das Preis-Leistungs-Verhältnis ist hoch.

3. Was sind die Merkmale des „Cat#13762 RT-LAMP Dye Assay Kit (UDG plus)“?

3.1 Hohe Empfindlichkeit

Abbildung 1. Sensitivitätstest

Rot: 50 Kopien/T, Antwortzeit weniger als 15 Minuten
Blau: 25 Kopien/T, Antwortzeit weniger als 15 Minuten
Es wurden die beiden Kopienzahlen 50 Kopien/T und 25 Kopien/T getestet. Die Testergebnisse zeigten, dass innerhalb von 15 Minuten die Ergebnisse von 50 Kopien/T besser waren und die Erkennungsrate 100 % erreichte.

3.2 Primer-Eignung

Abbildung 2. N5 Locked Nucleic Acid Primer Eignungserkennung

Lila: Yeasen  Blau: Kompanie N

Abbildung 3.N Primer Eignungstest

Grün: Yeasen     Rot: Kompanie N

Abbildung 2, Abbildung 3: Bei der spezifischen Erkennung von N5-gebundenen Nukleinsäureprimern und N-Primern wurde die entsprechende Erkennung gemäß 50 Kopien/T mit Yeasen- und N-Marken durchgeführt. Die Ergebnisse zeigten, dass die Anwendbarkeit von N5-gebundenen Nukleinsäureprimern besser war als die von N-Marken. Die Anwendbarkeit von N-Primern ist für beide Produkte gleich.

Abbildung 4. Erkennung der Eignung von ACTIN-Primern

Lila: Yeasen     Blau: Kompanie N

15 ng 293DNA wurden mit den Marken Yeasen und N auf ihre Eignung als ACTIN-Primer getestet. Die Ergebnisse zeigten, dass Yeasen eine hervorragende Anwendbarkeit aufwies.

3.3 Spezifität

Abbildung 5. 48-Well NTC-spezifischer Test

Zur spezifischen Erkennung des Produkts wurde eine 48-Well-NTC-Erkennung verwendet. Es wurde kein Peak erkannt, was darauf hinweist, dass die Spezifität besser war.

3.4 Toleranz

Abbildung 6. Nukleinsäure-Releaser-Toleranztest

Rot: Matrix DEPC H₂O
Grün: jeweils 50 % Nukleinsäure-Freisetzungsmittel und DEPC H₂O
Blau: 100 % Nukleinsäure-Freisetzungsmittel
Verwendung der Matrix DEPC H₂O, Nukleinsäure-Freisetzungsmittel und DEPC H₂O mit 50 % bzw. 100 % Nukleinsäure-Freisetzungsmittel wurden getestet. Die Ergebnisse zeigen, dass dieses Produkt eine ausgezeichnete Verträglichkeit gegenüber Nukleinsäure-Freisetzungsmitteln aufweist.

3.5 Stabilität

Abbildung 7. Stabilitätsprüfung bei gleicher Temperatur

Rot: 37℃ 0 Tag Blau: 37℃ 1 Tag Grün: 37℃ 3 Tage Lila: 37℃ 5 Tage
0 Tage bei 37 °C als Kontrolle und Stabilitätstests wurden 1, 3 und 5 Tage lang bei der gleichen Temperatur durchgeführt, was darauf hinweist, dass es bei 37 °C für 5 Tage immer noch eine relativ stabile Wirkung aufrechterhalten kann.

Abbildung 8. Wiederholter Frost-Tau-Stabilitätstest bei -20 °C

Rot: Einfrieren und Auftauen 0 Mal wiederholen
Blau: Einfrieren und Auftauen 5 Mal wiederholen
Grün: Einfrieren und Auftauen 10 Mal wiederholen

Abbildung 9. Wiederholter Frost-Tau-Stabilitätstest mit Trockeneis

Rot: Einfrieren und Auftauen 0 Mal wiederholen
Lila: Einfrieren und Auftauen 5 Mal wiederholen
Wiederholter Frost-Tau-Stabilitätstest bei -20 °C und Trockeneis. Es wurde festgestellt, dass die Frost-Tau-Stabilität 10 Mal bei -20 °C und 5 Mal auf Trockeneis wiederholt wurde.

3.6 Vergleich ähnlicher Produkte

Abbildung 10. Vergleich der Auswirkungen ähnlicher Produkte

Rot: Yeasen  Blau: Marke N1  Grün: Marke N2
Bei Verwendung des Primers N-Genprimers zeigten Yeasen-Produkte im Fall von 50 Kopien/T unter Verwendung von Yeasen, Marke N1 und Marke N2 zur Produktvergleichsüberprüfung gute Ergebnisse.

6. Welche Produkte können wir empfehlen?

Die von Yeasen bereitgestellten Produkte sind wie folgt.

Tabelle 1.Produktinformationen