Stört Sie immer noch die geringe Effizienz der homologen Rekombination von Multifragmenten oder superlangen Fragmenten und die geringe Anzahl von Kolonien?

Da der Träger oder das Fragment jedoch wertvoller ist und eine geringe Ausbeute aufweist, wird zur Einsparung von Rohstoffen ein kleines System mit niedriger Konzentration zur Ligation verwendet. Ist die Ligationseffizienz jedoch gering und störend?

YEASEN-Produkt: Deutlich verbesserte, niedrige Konzentration, kleines System und ultralange Fragmente der Ligationseffizienz, hohe positive Klonierungsrate, helfen Ihnen, die Ligatur.

Vergleich des Ein-Schritt-Klonierens mit herkömmlichen Enzym-Restriktionsklonierungsmethoden

Produktvorteile

Orientierung: 1–7 DNA-Fragmente – Klonen in einem Schritt.

Einfach: Mehrere Fragmente können in einem Röhrchen ligiert werden.

Schnell: Schnellste Ligation in 5 Min.

Hohe Effizienz: Hohe positive Klonrate.

Kleines System: Das gesamte Ligationssystem kann nur 6 μL betragen.

Überlänge: Über 25 kb (Träger+Fragmentlänge) für die Ligation.

Leistung Anzeige

• Effiziente Rekombination eines einzelnen Fragments 6 μL kleines System

Abb. 1 10 ng Einzelfragmente mit geringem Input wurden ligiert im nicht-reanimationsrezeptiven Zellzustand des 6 μL kleinen Systems.Die Ergebnisse zeigten, dass 10923ES eine bessere Leistung als Konkurrenzprodukte aufwies, mit hoher Ligationseffizienz, mehr Kolonien und einer positiven Rate von 100 %. AB: Rekonstituierte Konvertierungsplatte. Das Molverhältnis von Träger (10 kb) zu Insertfragment (1 kb) betrug 1:2. C: PCR-Identifizierung des Insertfragments. M: YEASEN 10505ES. Trägervolumen: 40 ng/6 μL Reaktionssystem, Reaktionsbedingungen: 50℃, 15 Min.

• Effiziente Rekombination mehrerer Fragmente

Abb. 2 Sechs Fragmente (7,6 kb) ligiert. Die Ergebnisse zeigten, dass 10923ES eine bessere Leistung als Konkurrenzprodukte hatte, mit mehr Kolonien und einer Positivrate von 100 %. AB: Rekonstituierte Konvertierungsplatte. Das Molverhältnis von Träger (11,6 kb) zu Insertfragment (7,6 kb) betrug 1:2. C: PCR-Identifizierung des Insertfragments. M: YEASEN 10505ES, PCR-Länge 2,6 kb. Trägervolumen: 200 ng/20 μL Reaktionssystem, Reaktionsbedingungen: 50℃, 50 min.

• Niedrige Konzentration Multifragment effiziente Rekombination

Abb. 3 Ligieren Sie die Fragmente fünf und sechs mit niedriger Konzentration separat. Die Ergebnisse zeigten, dass 10923ES bei niedrigen Konzentrationen eine stabile Konnektivität mit einer hohen Bakterienzahl und einer Positivitätsrate von 100 % aufwies. AB: Rekombinante Konvertierungsplatte. CD: Bild der Insertionsfragment-PCR-Identifikationselektrophorese, M: YEASEN 10505ES, PCR-Länge 2,6 kb.

• Reagenzstabilität

Abb. 4 Nach einer Lagerung bei 37 °C für 7 Tage zeigten die Ergebnisse, dass 10923ES bei niedrigen Konzentrationen die fünf und sechs Fragmente stabil verknüpfte. AF: Rekombinante Konvertierungsplatte. GH: Bild der PCR-Identifikationselektrophorese des Insertionsfragments, M: YEASEN 10505ES, PCR-Länge 2,6 kb.

Kundenfall

• Effiziente Reorganisation kleiner Systeme

Abb. 5 10923ES wurde an ein einzelnes Fragment in einem 10 μL kleines Reaktionssystem, mit einer Positivrate von 100 %. A: Rekonstituierte Konversionsplatte. B: PCR-Identifizierung des Insertfragments. Trägergröße: 5.631 bp; Zielfragmentgröße: 1.384 bp.

Abb. 6 10 μl kleines System mit Einzelfragmentverbindung und Punktmutationsklon, 100 % Positivrate. A & C: Rekombinationstransformationsplatten. B: PCR-Identifizierung von Insertfragmenten, Spuren 1-5 sind Kolonie 1, Kolonie 2, Negativkontrolle, Positivkontrolle (Genom als Vorlage), Positivkontrolle (PCR-gereinigtes Fragment als Vorlage). D: Elektrophoregramm der PCR-Identifizierung von Insertfragmenten.

• Effiziente Rekombination von kurzen Fragmenten in niedriger Konzentration

Abb. 7 10923ES Anschluss der Fragmente in geringer Konzentration. Im Vergleich zu Konkurrenzprodukten war die Koloniezahl hoch und die Positivrate (10 / 11) lag bei > 90,9 %. AB: Rekonstituierte Konversionsplatte. C: PCR-Identifizierung des Insertfragments. Trägergröße: 3.000 bp; Zielfragmentgröße: 441 bp.

• Effiziente und schnelle Multisegmentligatur

Feige.8 10923ES-Viersegmentligation, hohe GC und kurze Segmentkombinationsverbindung, im Vergleich zur Marke S, weist eine höhere Bakterienzahl von 10923ES und eine positive Rate von 100 % auf. D: Rekombinante Konvertierungstablette. E: Identifikationskarte für Insert-Fragmentsequenzierung. F: Die Sanger-Sequenzierung bestätigte die erfolgreiche Verbindung zwischen Vektor und Fragmenten, und die Sequenzierung an der Verbindungsstelle war korrekt.

Strength Star Produktempfehlung

10923ES Bestellkanal

Produktorientierung	Nmich	Art.Nr	SSpezifikationen
1 – 7 Fragmente wurden in einem Schritt verbunden und die Rekombinationsreaktion war in den schnellsten 5 Minuten abgeschlossen	Hieff-KlonTM Universal II Ein-Schritt-Klonierungskit	10923ES20/50	20 T/50 T

Rbegeistert PProdukte

Produktorientierung	Nmich	Art.Nr	SSpezifikationen
Hochpräzise PCR	2× Hieff CanaceTM AdvanceFast PCR Master Mix (mit Farbstoff)	10164ES03/08	1 ml/5×1 ml
Schnelles PCR-Upgrade, kann Kolonie-PCR sein und ist für die Amplifikation komplexer Templates geeignet	2×HieffTM Ultra-Rapid II HotStart PCR Master Mix	10167ES03/08	1 ml/5×1 ml