- Die Versuchung, Enzyme zu reinigen.

Warum Proteasen und Phosphatasen aus Proteinen entfernen?

Im Gleichgewichtszustand werden endogene Proteine ​​produziert und abgebaut, wobei ihre zellulären Werte stabil bleiben. Wenn Proteine ​​in vitro aus Zellen und Geweben extrahiert werden, werden auch zahlreiche endogene Enzyme freigesetzt, die die extrahierten Proteine ​​abbauen können, wie etwa Phosphatasen und Proteasen. Da die Produktion von Proteinen deutlich gehemmt wird und der Abbau fortschreitet, können diese Enzyme die Proteine ​​im Extrakt schnell abbauen. Um die Zerstörung des Zielproteins durch Proteasen während der Proteinreinigung zu verhindern, werden Proteaseinhibitoren hinzugefügt, um deren Aktivität zu hemmen.

Darüber hinaus sind Proteinphosphorylierung und -dephosphorylierung in Zellen die regulatorischen Schalter für viele wichtige biologische Aktivitäten wie Signaltransduktion, Zellproliferation, Zelldifferenzierung und Zellapoptose. Der Schutz des Phosphorylierungszustands von Proteinen ist für die Untersuchung von Proteinphosphorylierungswegen und Signaltransduktionswegen von entscheidender Bedeutung. Daher ist die Kontrolle der Wirkung von Phosphatasen in der Proteinforschung von erheblicher physiologischer Bedeutung.

Yeasen Biotech führt ständig Innovationen ein und versorgt seine Kunden durch den gezielten Entwurf molekularer Proteinstrukturen und groß angelegte Enzym-Protein-Mutagenese-Screenings mit hochwirksamen Protease- und Phosphatasehemmerprodukten.

Produkteinführung

Proteolytische Inhibitoren (Proteaseinhibitoren) beziehen sich allgemein auf Substanzen, die an bestimmte Gruppen im aktiven Zentrum von Proteasemolekülen binden und so deren Aktivität verringern oder sogar eliminieren, ohne eine Denaturierung des Enzymproteins zu verursachen. Substanzen wie Leupeptin, Antipain, Chymostatin, Elastatinaldehyd, Aprotinin und Phosphoramidon, die aus Fermentationsbrühen von Actinomyceten isoliert werden, können Trypsin, Papain, Chymotrypsin, Elastase, Pepsin bzw. Metalloproteinasen hemmen und werden alle als Proteaseinhibitoren betrachtet.

Produktzusammensetzung

Hemmstoff

Komponente

Hemmungstyp

Proteasehemmer

AEBSF (Kat.-Nr. 20111ES)

Irreversibler Inhibitor von Serinproteasen

Aprotinin (Kat.-Nr. 20105ES)

Kompetitiver reversibler Inhibitor von Serinproteasen

Bestatin (Kat.-Nr. 20132ES)

Reversibler Inhibitor von Aminopeptidasen

E-64 (Kat.-Nr. 20129ES)

Irreversibler Inhibitor von Cysteinproteasen

Leupeptin (Kat.-Nr. 20112ES)

Reversibler Inhibitor von Serin- und Cysteinproteasen

Pepstatin A (Kat.-Nr. 20113ES)

Reversibler Inhibitor von Aspartatproteasen

EDTA (Kat.-Nr. 60126ES)

Reversibler Inhibitor von Metalloproteinasen

1,10-Phenanthrolin

Reversibler Inhibitor von Metalloproteinasen

Phosphoramidon

Reversibler Inhibitor von Metalloproteinasen

Phosphatasehemmer

Cantharidin

Reversibler Inhibitor der Proteinphosphatase 2A

(-)-p-Bromtetramisol Oxalat

Irreversibler Inhibitor der alkalischen Phosphatase

Microcystin-LR

Reversibler Inhibitor der Proteinphosphatase 1 und Proteinphosphatase 2A

Natriumorthovanadat (Kat.-Nr. 20133ES)

Reversibler Inhibitor der alkalischen Phosphatase und Tyrosinphosphatase

Natrium Molybdat

Irreversibler Inhibitor der sauren Phosphatase

Natriumtartrat

Reversibler Inhibitor der sauren Phosphatase

Imidazol

Reversibler Inhibitor der alkalischen Phosphatase

Natriumfluorid

Reversibler Inhibitor der sauren Phosphatase

Produktinformationen

Verschiedene Arten von Proteinextrakten enthalten verschiedene Arten von Proteasen. Beispielsweise enthalten Säugetierzellextrakte typischerweise eine große Menge an Serinproteasen, Bakterienzellextrakte enthalten normalerweise mehr Serinproteasen und Metalloproteinasen und Pflanzenextrakte enthalten oft eine große Anzahl an Serin- und Cysteinproteasen sowie einige mit Aspartatproteasen. Darüber hinaus kann AEBSF eine Peakdrift bei der Massenspektrometrie verursachen, sodass Proteaseinhibitoren, die AEBSF enthalten, nicht für die Erkennung und Analyse mittels Massenspektrometrie (Massenspektrometrie, MS) geeignet sind. Daher bietet Yeasen Biotech verschiedene Arten von Proteasen, Phosphatasen und Inhibitormischungen zur Auswahl an, die auf die Proteinextraktion und die anschließenden Versuchszwecke verschiedener Arten von Proben zugeschnitten sind. Spezifische Kaufinformationen finden Sie in den Bestelldetails.

Produktbestellung

Produktnummer

Produktname

Komponenten

Spezifikation

20123ES

InStab™ Protease Cocktail, EDTA-frei, Mini, Tablettenform

Enthält AEBSF, Aprotinin, Bestatin, E-64, Leupeptin, Pepstatin A und andere Komponenten

1 Flasche (10 Tabletten) / 1 Flasche (50 Tabletten)

20124ES

InStab™ Proteaseinhibitor-Cocktail, EDTA-frei, 100 × DMSO-Stammlösung

Enthält AEBSF, Aprotinin, Bestatin, E-64, Leupeptin, Pepstatin A und andere Komponenten

1 ml/10 × 1 ml/100 × 1 ml

20134ES

InStab™ Proteaseinhibitor-Cocktail für Pilz- und Hefeextrakte, EDTA-frei, 100×DMSO-Stammlösung

Enthält AEBSF, E-64, Pepstatin A, 1,10-Phenanthrolin

1 ml

20135ES

InStab™ Protease-Inhibitor-Cocktail zur Reinigung von His-markierten Proteinen, EDTA-frei, 100×DMSO-Stammlösung

Enthält AEBSF, Bestatin, E-64, Pepstatin A, Phosphoramidon-Dinatriumsalz

1 ml

20136ES

InStab™ Proteaseinhibitor-Cocktail für Pflanzenzellen- und Gewebeextrakte, EDTA-frei, 100×DMSO-Stammlösung

Enthält AEBSF, Bestatin, E-64, Leupeptin, Pepstatin A, 1,10-Phenanthrolin

1 ml

20137ES

InStab™ Proteaseinhibitor-Cocktail für Bakterienzellextrakte, 100 × Stammlösung

Enthält AEBSF, Bestatin, E-64, Pepstatin A und einzeln verpacktes EDTA

2 ml

20138ES

InStab™ Proteaseinhibitor-Cocktail für MS-SAFE, 50×Stammlösung

Enthält Aprotinin, Bestatin, E-64, Leupeptin und einzeln verpacktes EDTA

2 ml

20109ES

InStab™ Phosphatase-Inhibitor-Cocktail (100×, Stammlösung)

Röhrchen A enthält Cantharidin, Bromtetramisol, Microcystin-LR. Röhrchen B enthält Natriumorthovanadat, Natriummolybdat, Natriumtartrat, Imidazol, Natriumfluorid

2 ml/10 × 2 ml/100 × 2 ml

20140ES

Deacetylase-Inhibitor-Cocktail (100× in 70% DMSO)

Enthält Trichostatin A, EX-527, Nicotinamid, Natriumbutyrat

1 ml

20104ES

PMSF

1 g/5×1 g

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