Yeasen Biotech, con años de experiencia en el campo de las materias primas enzimáticas, ha proporcionado materias primas de PCR para diagnóstico molecular de alta calidad y rentables a empresas de diagnóstico in vitro, instituciones de pruebas de terceros y organizaciones de investigación. Estas incluyen componentes individuales como transcriptasa inversa, inhibidor de ARNasa, ADN polimerasa Taq, ADN glicosilasa de uracilo (enzima UDG/UNG), anticuerpo enzimático Taq, dNTP, así como soluciones de premezcla qPCR/RT-qPCR optimizadas para el sistema, que ofrecen un rendimiento superior y materias primas enzimáticas estables para el desarrollo de kits de diagnóstico clínico/no clínico.

Kit de sonda RT-qPCR multiplexada de un solo paso Hifair® V C58P2 (UDG Plus)

Descripción

Esta mezcla maestra (Cat. n.° 13650ES) es un reactivo diseñado para reacciones de PCR cuantitativas multiplexadas que utilizan ARN como plantilla. Durante el procedimiento experimental, la transcripción inversa y la PCR cuantitativa se llevan a cabo en el mismo tubo de reacción, lo que agiliza el flujo de trabajo del laboratorio y minimiza el riesgo de contaminación.

Los reactivos RT-qPCR de un solo paso integran el rendimiento superior de la transcriptasa inversa y las enzimas de arranque en caliente, complementados con un sistema de amortiguación optimizado, lo que permite la detección rápida y sensible de plantillas de copia de un solo dígito. Validados por varios mercados de clientes, incluidos los de enfermedades respiratorias, epidemias animales y sistemas de investigación, estos reactivos pueden satisfacer las necesidades de varias direcciones de aplicación.

Ventajas del producto

• Alta sensibilidad: el sistema de tampón cuidadosamente optimizado mejora la sensibilidad de detección de plantillas de baja concentración hasta 250 copias/ml;
• Súper estabilidad: el producto ha pasado pruebas de estabilidad en tiempo real durante 18 meses.
• Sistema anticontaminación dUP/UDG: se introduce el sistema anticontaminación dUTP/UDG para degradar eficientemente la contaminación por aerosoles de los productos, reducir los falsos positivos y garantizar resultados auténticos.
• Compatible con programa rápido: compatible con programa rápido, 40 minutos pueden producir resultados.

Presentación parcial del rendimiento del producto

(1) Prueba de sensibilidad

Los 13650 almacenados a -20 °C durante 18 meses (grupo experimental) y aquellos dentro del período de vida útil (grupo de control) se analizaron simultáneamente para la dilución en gradiente (500 copias/ml, 250 copias/ml) del pseudovirus SARS-CoV-2, dirigido al gen ORF y al gen N. Se analizaron ocho pocillos replicados para cada concentración, con una tasa de detección del 100%. Además, no hubo diferencias significativas en las formas de los picos de la curva de amplificación y los valores Ct.

Lote	Familia (Número de aspectos positivos)		Victoria (Número de aspectos positivos)
	250 copias/ml	500 copias/ml	250 copias/ml	500 copias/ml
grupo experimental	8/8	8/8	8/8	8/8
grupo de control	8/8	8/8	8/8	8/8

(2) Prueba de estabilidad en tiempo real

Las 13650 almacenadas a -20°C durante 18 meses y las que están dentro de su vida útil.En ambos grupos se realizó la prueba simultánea del gen ORF y del gen N del pseudovirus SARS-CoV-2 a una concentración de 1000 copias/ml con 20 pocillos replicados. La tasa de detección para ambos fue del 100% y no hubo diferencias significativas en la forma de las curvas de amplificación ni en los valores Ct.

(3) Rendimiento estable después de repetidos ciclos de congelación y descongelación.

Al someter el reactivo 13650 a 30 y 50 ciclos de congelación-descongelación utilizando hielo seco, junto con reactivos almacenados normalmente a -20 °C, y probar simultáneamente el gen ORF del pseudovirus SARS-CoV-2, los resultados indicaron que el rendimiento del reactivo 13650 no se vio afectado después de 50 ciclos de congelación-descongelación.

Utilizando 13650ES, se detectaron el gen ORF y el gen N del pseudovirus SARS-CoV-2 bajo el mismo sistema de reacción con protocolos estándar y rápidos. Los resultados mostraron que bajo un sistema de 4-plex, no hubo diferencia en las formas de los picos de la curva de amplificación y los valores Ct entre los dos protocolos.